中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
第一部分 绪论 | 第16-32页 |
1.1 流感病毒简介 | 第16-22页 |
1.1.1 流行性感冒 | 第16-18页 |
1.1.2 流感病毒的分型 | 第18-19页 |
1.1.3 流感病毒结构特征 | 第19-20页 |
1.1.4 流感病毒感染机制 | 第20-21页 |
1.1.5 流感病毒HA蛋白 | 第21-22页 |
1.2 流感病毒的防治 | 第22-27页 |
1.2.1 抗病毒药物 | 第22-23页 |
1.2.2 季节性流感疫苗 | 第23页 |
1.2.3 减毒活疫苗 | 第23-24页 |
1.2.4 广谱流感疫苗 | 第24-27页 |
1.3 铁蛋白 | 第27-29页 |
1.3.1 Ferritin结构 | 第27-28页 |
1.3.2 Ferritin的应用 | 第28-29页 |
1.4 立题依据及实验设计 | 第29-32页 |
1.4.1 立题依据 | 第29-30页 |
1.4.2 实验设计 | 第30-32页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第32-52页 |
2.1 实验材料 | 第32-39页 |
2.1.1 目的基因优化及合成 | 第32页 |
2.1.2 主要试剂 | 第32-34页 |
2.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
2.1.4 质粒,菌种和细胞 | 第35-36页 |
2.1.5 试剂配制 | 第36-39页 |
2.1.6 细胞系,病毒,实验动物 | 第39页 |
2.2 实验方法 | 第39-52页 |
2.2.1 流感表位的筛选 | 第39-40页 |
2.2.2 表达载体质粒的构建 | 第40-43页 |
2.2.3 质粒大提 | 第43页 |
2.2.4 重组蛋白表达 | 第43-44页 |
2.2.5 蛋白纯化及蛋白透析复性 | 第44-46页 |
2.2.6 蛋白性质分析 | 第46页 |
2.2.7 动物免疫 | 第46-47页 |
2.2.8 H3-pep重组蛋白免疫原病毒交叉加强评价 | 第47-48页 |
2.2.9 免疫效果评价 | 第48-51页 |
2.2.10 数据分析 | 第51-52页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第52-74页 |
3.1 流感表位的筛选 | 第52页 |
3.2 重组蛋白哺乳动物细胞表达分析 | 第52-60页 |
3.2.1 哺乳细胞表达载体的构建 | 第52-55页 |
3.2.2 真核重组蛋白表达 | 第55-59页 |
3.2.3 小结 | 第59-60页 |
3.3 重组蛋白原核细胞表达分析 | 第60-66页 |
3.3.1 原核蛋白表达质粒构建 | 第60-62页 |
3.3.2 原核蛋白重组表达 | 第62-66页 |
3.3.3 小结 | 第66页 |
3.4 免疫效果评价 | 第66-72页 |
3.4.1 抗血清和表位结合性测定 | 第66-68页 |
3.4.2 抗体分型检测 | 第68-70页 |
3.4.3 H3-pep血清血凝与血凝抑制实验 | 第70-71页 |
3.4.4 H3-pep免疫血清中和能力检测 | 第71-72页 |
3.5 H3-pep对小鼠保护能力检测 | 第72-74页 |
讨论 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
附表 | 第83-87页 |
作者简介 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |