摘要 | 第4-6页 |
SUMMARY | 第6-7页 |
第一部分 文献综述 | 第13-23页 |
1 纤维素酶简介 | 第13-16页 |
1.1 纤维素酶来源 | 第13-14页 |
1.2 纤维素酶的功能 | 第14页 |
1.3 纤维素酶的应用 | 第14-16页 |
1.3.1 纤维素酶在畜牧业的应用 | 第14-16页 |
1.3.2 纤维素酶在食品中的应用 | 第16页 |
1.3.3 纤维素酶在工业中的应用 | 第16页 |
2 诱变筛选高产纤维素酶菌株的研究进展 | 第16-19页 |
2.1 物理诱变 | 第17页 |
2.2 化学诱变 | 第17-18页 |
2.3 复合诱变 | 第18-19页 |
3 产纤维素酶菌株发酵条件研究的进展 | 第19-20页 |
3.1 固态发酵 | 第19-20页 |
3.2 液态发酵 | 第20页 |
4 研究目的、内容与技术路线 | 第20-23页 |
4.1 研究目的 | 第21页 |
4.2 主要内容 | 第21页 |
4.3 技术路线 | 第21-23页 |
第二部分 试验研究 | 第23-56页 |
试验一 绿色木霉L4C液态发酵产纤维素酶条件的研究 | 第23-38页 |
1 试验材料 | 第23-24页 |
1.1 菌种来源 | 第23页 |
1.2 主要仪器设备 | 第23页 |
1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
1.4 培养基配制 | 第24页 |
1.5 主要溶液配制 | 第24页 |
2 试验方法 | 第24-28页 |
2.1 标准曲线的绘制 | 第25页 |
2.1.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第25页 |
2.1.2 木糖标准曲线的绘制 | 第25页 |
2.2 液态发酵产酶培养方法 | 第25-26页 |
2.2.1 斜面培养 | 第25页 |
2.2.2 种子摇瓶培养 | 第25页 |
2.2.3 产酶培养 | 第25-26页 |
2.3 酶活测定 | 第26页 |
2.3.1 粗酶液的制备 | 第26页 |
2.3.2 羧甲基纤维素酶活(CMCase)的测定 | 第26页 |
2.3.3 滤纸酶活(FPA)的测定 | 第26页 |
2.3.4 半纤维素酶活的测定 | 第26页 |
2.3.5 酶活性的计算 | 第26页 |
2.4 液态发酵产酶条件研究方法 | 第26-28页 |
2.4.1 碳源、氮源对液态发酵产酶的影响 | 第26-27页 |
2.4.2 接种量对液态发酵产酶的影响 | 第27页 |
2.4.3 培养时间对液态发酵产酶的影响 | 第27页 |
2.4.4 培养温度对液态发酵产酶的影响 | 第27页 |
2.4.5 培养基初始p H对液态发酵产酶的影响 | 第27页 |
2.4.6 液态产酶发酵部分条件的正交优化 | 第27-28页 |
2.5 数据处理 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-36页 |
3.1 标准曲线的绘制 | 第28-30页 |
3.1.1 葡萄糖标准曲线 | 第28-29页 |
3.1.2 木聚糖标准曲线 | 第29-30页 |
3.2 碳源、氮源对产酶的影响 | 第30-31页 |
3.2.1 碳源对产酶的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 氮源对产酶的影响 | 第31页 |
3.3 接种量对产酶的影响 | 第31-32页 |
3.4 培养时间对产酶的影响 | 第32-33页 |
3.5 培养温度对产酶的影响 | 第33-34页 |
3.6 培养基初始pH对产酶的影响 | 第34-35页 |
3.7 液态产酶发酵部分条件的正交优化结果 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-37页 |
5 小结 | 第37-38页 |
试验二 紫外、亚硝基胍及复合诱变提高绿色木霉L4C产酶的研究 | 第38-52页 |
1 试验材料 | 第38页 |
1.1 菌株 | 第38页 |
1.2 试剂 | 第38页 |
1.3 仪器与设备 | 第38页 |
1.4 培养基配制 | 第38页 |
1.5 溶液配制 | 第38页 |
2 试验方法 | 第38-41页 |
2.1 诱变筛选路线 | 第39页 |
2.2 诱变方法 | 第39-41页 |
2.2.1 菌种的活化 | 第39页 |
2.2.2 孢子悬浮液的制备 | 第39页 |
2.2.3 紫外线诱变 | 第39-40页 |
2.2.4 NTG诱变 | 第40页 |
2.2.5 紫外线- NTG复合诱变 | 第40页 |
2.2.6 最佳突变株的筛选 | 第40-41页 |
2.2.7 诱变致死率 | 第41页 |
2.2.8 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第41页 |
2.2.9 酶活力的测定 | 第41页 |
2.2.10突变株的遗传稳定性试验 | 第41页 |
2.3 数据处理 | 第41页 |
3 结果与分析 | 第41-50页 |
3.1 紫外诱变条件的选择 | 第41-42页 |
3.2 亚硝基胍诱变条件的选择 | 第42-44页 |
3.2.1 亚硝基胍诱变最适浓度的选择 | 第42-43页 |
3.2.2 NTG诱变最佳时间的选择 | 第43-44页 |
3.3 紫外和亚硝基胍复合诱变条件的选择 | 第44-45页 |
3.4 紫外诱变的初筛与复筛 | 第45-47页 |
3.4.1 纤维素水解圈初筛 | 第45-46页 |
3.4.2 突变株的摇瓶发酵复筛 | 第46-47页 |
3.4.3 突变株Z15的遗传稳定性 | 第47页 |
3.5 亚硝基胍诱变初筛及复筛 | 第47-49页 |
3.5.1 纤维素水解圈初筛 | 第47-48页 |
3.5.2 突变株的摇瓶发酵复筛 | 第48页 |
3.5.3 突变株N12的遗传稳定性 | 第48-49页 |
3.6 紫外和亚硝基胍复合诱变初筛及复筛 | 第49-50页 |
3.6.1 纤维素水解圈法初筛 | 第49页 |
3.6.2 突变株的摇瓶发酵复筛 | 第49-50页 |
3.6.3 突变株ZN4的遗传稳定性研究 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
5 小结 | 第51-52页 |
试验三 产纤维素酶菌株对稻草秸秆发酵的研究 | 第52-56页 |
1 试验材料 | 第52页 |
1.1 菌种 | 第52页 |
1.2 秸秆 | 第52页 |
1.3 培养基配制 | 第52页 |
2 试验方法 | 第52-53页 |
2.1 菌种活化 | 第52页 |
2.2 种子液的制备 | 第52-53页 |
2.3 秸秆发酵 | 第53页 |
2.4 粗蛋白的测定 | 第53页 |
2.5 粗纤维的测定 | 第53页 |
2.6 数据处理 | 第53页 |
3 结果与分析 | 第53-55页 |
3.1 发酵秸杆中粗蛋白含量测定结果 | 第53-54页 |
3.2 发酵秸秆中粗纤维含量测定结果 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55页 |
5 小结 | 第55-56页 |
第三部分 论文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附件一 培养基配制 | 第63-64页 |
附件二 主要溶液配制 | 第64-65页 |
附件三 酶活测定 | 第65-66页 |
附件四 粗蛋白和粗纤维的测定 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69-70页 |
导师简介 | 第70-72页 |