| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 鱼类免疫系统研究进展 | 第7-9页 |
| 1.1.1 免疫系统分类 | 第7页 |
| 1.1.2 鱼类的免疫器官 | 第7页 |
| 1.1.3 鱼类免疫应答元件 | 第7-9页 |
| 1.2 干扰素 | 第9-11页 |
| 1.2.1 干扰素的分类 | 第9页 |
| 1.2.2 鱼类干扰素γ研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2.3 重组干扰素研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 趋化因子 | 第11-13页 |
| 1.3.1 趋化因子的分类 | 第11页 |
| 1.3.2 趋化因子的功能 | 第11-12页 |
| 1.3.3 趋化因子在炎症反应中的作用 | 第12-13页 |
| 1.4 白介素 | 第13页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二章 红鳍东方鲀IFNγ和CCL19 基因的克隆及生物信息学分析 | 第14-27页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 实验生物 | 第14页 |
| 2.1.2 生化试剂及试剂盒 | 第14页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.2 方法 | 第15-18页 |
| 2.2.1 红鳍东方鲀头肾RNA的提取 | 第15页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第15页 |
| 2.2.3 IFNγ和CCL19 基因的克隆与鉴定 | 第15-17页 |
| 2.2.4 IFNγ和CCL19 基因的生物信息学分析 | 第17-18页 |
| 2.3 结果 | 第18-25页 |
| 2.3.1 IFNγ基因和CCL19 基因的克隆与鉴定 | 第18-22页 |
| 2.3.2 IFNγ和CCL19 基因的生物信息学分析 | 第22-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 红鳍东方鲀干扰素γ基因和趋化因子19基因的原核表达 | 第27-41页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 载体与菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-31页 |
| 3.2.1 表达载体pET-32a-IFNγ和pET-32a-CCL19 的构建与鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2.2 重组表达质粒在E.coli BL21（DE3）中的诱导表达 | 第28-30页 |
| 3.2.3 蛋白可溶性分析 | 第30页 |
| 3.2.4 融合蛋白的小量纯化 | 第30页 |
| 3.2.5 纯化蛋白的Western blot分析 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-39页 |
| 3.3.1 表达载体pET-32a-IFNγ和pET-32a- CCL19 的构建 | 第31-33页 |
| 3.3.2 重组质粒的序列测定 | 第33页 |
| 3.3.3 表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
| 3.3.4 表达条件的优化 | 第34-36页 |
| 3.3.5 融合蛋白的可溶性分析 | 第36-37页 |
| 3.3.6 融合蛋白的纯化及Western blot分析 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 重组IL15 的活性测定 | 第41-47页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 实验用菌株 | 第41页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-42页 |
| 4.2.1 重组红鳍东方鲀IL15 蛋白的制备 | 第41页 |
| 4.2.2 重组IL15 蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
| 4.2.3 CTLL-2 细胞的培养 | 第42页 |
| 4.2.4 重组IL15 蛋白活性的测定 | 第42页 |
| 4.3 结果 | 第42-45页 |
| 4.3.1 重组IL15 蛋白纯化结果 | 第42-44页 |
| 4.3.2 重组IL15 蛋白浓度的测定 | 第44页 |
| 4.3.3 CTLL-2 细胞培养结果 | 第44-45页 |
| 4.3.4 重组IL15 蛋白活性检测结果 | 第45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
