| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第17-27页 |
| 1.1 米曲霉简介及生物学特征 | 第17页 |
| 1.2 硒的概述 | 第17-21页 |
| 1.2.1 硒的存在形式 | 第17-18页 |
| 1.2.2 硒的代谢 | 第18页 |
| 1.2.3 硒的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3.1 抗氧化作用 | 第18页 |
| 1.2.3.2 促进免疫系统功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3.3 抗衰老 | 第19页 |
| 1.2.3.4 促进体内多种代谢活动 | 第19页 |
| 1.2.3.5 硒的解毒功能 | 第19页 |
| 1.2.4 硒与疾病的关系 | 第19-21页 |
| 1.2.4.1 硒与克山病和大骨节病 | 第19-20页 |
| 1.2.4.2 硒与癌症 | 第20页 |
| 1.2.4.3 硒与心血管疾病 | 第20页 |
| 1.2.4.4 硒与其他疾病 | 第20-21页 |
| 1.2.5 硒的生物学功能与形态的关系 | 第21页 |
| 1.2.6 富硒米曲霉中硒种态分析的意义 | 第21页 |
| 1.3 硒的形态分析技术 | 第21-25页 |
| 1.3.1 常用硒化物的提取方法 | 第21-22页 |
| 1.3.1.1 酸-热处理法 | 第21-22页 |
| 1.3.1.2 超声波破碎法 | 第22页 |
| 1.3.1.3 机械研磨法 | 第22页 |
| 1.3.2 联用技术在富硒米曲霉硒的种态分析中的应用 | 第22-25页 |
| 1.3.2.1 联用系统中的分离技术 | 第23-24页 |
| 1.3.2.2 硒化物中硒元素的检测技术 | 第24-25页 |
| 1.4 富硒米曲霉的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.4.1 微生物的富硒机理 | 第25-26页 |
| 1.4.2 国内外富硒米曲霉的研究进展 | 第26页 |
| 1.5 本实验研究的目的意义和内容 | 第26-27页 |
| 1.5.1 研究目的和意义 | 第26页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 富硒米曲霉菌种的筛选及诱变选育 | 第27-35页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.2.1 原料 | 第27页 |
| 2.2.2 仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.3 试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.4 培养基 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.3.1 富硒米曲霉菌种活化 | 第29页 |
| 2.3.2 单孢子悬液制备 | 第29页 |
| 2.3.3 紫外诱变改造出发菌株 | 第29-30页 |
| 2.3.4 诱变菌株的初筛 | 第30页 |
| 2.3.5 诱变菌株的复筛 | 第30页 |
| 2.3.6 生物量的测定 | 第30页 |
| 2.3.7 硒含量的测定 | 第30-31页 |
| 2.3.7.1 硒标准曲线的绘制 | 第30页 |
| 2.3.7.2 富硒米曲霉中硒含量的测定 | 第30-31页 |
| 2.3.8 诱变菌株遗传稳定性检测 | 第31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-34页 |
| 2.4.1 硒含量的标准曲线 | 第31页 |
| 2.4.2 初始菌种的富硒值 | 第31-32页 |
| 2.4.3 初筛结果 | 第32页 |
| 2.4.4 复筛结果 | 第32-33页 |
| 2.4.5 诱变菌株遗传稳定性的检测 | 第33-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 富硒米曲霉发酵条件的优化 | 第35-45页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 原料 | 第35页 |
| 3.2.2 仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.3 试剂 | 第36页 |
| 3.2.4 培养基 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.3.1 富硒米曲霉菌丝体培养方法 | 第36-37页 |
| 3.3.2 富硒米曲霉富硒值的计算 | 第37页 |
| 3.3.3 富硒米曲霉发酵条件的单因素实验 | 第37页 |
| 3.3.3.1 接种量的确定 | 第37页 |
| 3.3.3.2 装液量的确定 | 第37页 |
| 3.3.3.3 转速的确定 | 第37页 |
| 3.3.3.4 温度的确定 | 第37页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 3.4.1 最优单因素发酵条件的确定 | 第37-40页 |
| 3.4.1.1 最佳接种量的确定 | 第37-38页 |
| 3.4.1.2 最佳装液量的确定 | 第38-39页 |
| 3.4.1.3 最佳转速的确定 | 第39页 |
| 3.4.1.4 最适培养温度的确定 | 第39-40页 |
| 3.4.2 响应面法优化培养条件 | 第40-44页 |
| 3.4.2.1 响应面水平设计 | 第40页 |
| 3.4.2.2 响应面优化培养条件结果 | 第40-44页 |
| 3.4.2.3 验证性试验 | 第44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 富硒米曲霉中有机硒形态分析 | 第45-53页 |
| 4.1 引言 | 第45-46页 |
| 4.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.2.1 原料 | 第46页 |
| 4.2.2 仪器 | 第46页 |
| 4.2.3 试剂 | 第46-47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-48页 |
| 4.3.1 标准储备溶液的配制 | 第47页 |
| 4.3.2 样品预处理 | 第47页 |
| 4.3.3 样品的衍生 | 第47页 |
| 4.3.4 色谱条件 | 第47-48页 |
| 4.4 结果与分析 | 第48-52页 |
| 4.4.1 硒代氨基酸提取方法的选择 | 第48页 |
| 4.4.2 衍生条件的优化 | 第48-49页 |
| 4.4.2.1 衍生剂的选择 | 第48-49页 |
| 4.4.2.2 衍生剂用量对衍生效率的影响 | 第49页 |
| 4.4.2.3 衍生化反应时间的选择 | 第49页 |
| 4.4.2.4 衍生反应缓冲液pH的选择 | 第49页 |
| 4.4.3 色谱条件的优化 | 第49-50页 |
| 4.4.4 富硒米曲霉样品的衍生色谱分析图 | 第50-51页 |
| 4.4.5 方法的线性范围与方法检出限 | 第51页 |
| 4.4.6 方法的重复性及加标回收率实验 | 第51-52页 |
| 4.5 结论 | 第52-53页 |
| 第五章 米曲霉富硒能力与胞内谷胱甘肽含量关系研究 | 第53-59页 |
| 5.1 引言 | 第53页 |
| 5.2 实验材料 | 第53-54页 |
| 5.2.1 原料 | 第53页 |
| 5.2.2 仪器 | 第53-54页 |
| 5.2.3 试剂 | 第54页 |
| 5.2.4 培养基 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.3.1 米曲霉的培养方法 | 第54-55页 |
| 5.3.2 硒的测定方法 | 第55页 |
| 5.3.3 米曲霉谷胱甘肽(GSH)的测定方法 | 第55-56页 |
| 5.3.4 斯皮尔曼(Spearman)系数检验方法 | 第56页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第56-58页 |
| 5.4.1 谷胱甘肽的测定 | 第56页 |
| 5.4.2 变异米曲霉菌株的富硒能力与胞内谷胱甘肽含量测定 | 第56-57页 |
| 5.4.3 不同硒浓度下培养的米曲霉富硒能力与胞内谷胱甘肽含量的测定 | 第57-58页 |
| 5.4.4 米曲霉富硒能力与胞内谷胱甘肽含量的相关分析 | 第58页 |
| 5.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第六章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 6.1 结论 | 第59-60页 |
| 6.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第68页 |
