| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-35页 |
| 1.1 无脊椎动物的先天性免疫 | 第15-18页 |
| 1.1.1 物理防御 | 第15页 |
| 1.1.2 细胞免疫 | 第15-16页 |
| 1.1.3 体液免疫 | 第16-18页 |
| 1.2 拟穴青蟹病害概况 | 第18-19页 |
| 1.2.1 细菌性疾病 | 第18页 |
| 1.2.2 真菌性疾病 | 第18-19页 |
| 1.2.3 病毒性疾病 | 第19页 |
| 1.3 抗菌肽的研究概况 | 第19-27页 |
| 1.3.1 天蚕素(Cecropin) | 第20-21页 |
| 1.3.2 防御素(Defensin) | 第21-23页 |
| 1.3.3 抗脂多糖因子(ALF) | 第23-24页 |
| 1.3.4 对虾素(Penaeidin) | 第24-25页 |
| 1.3.5 溶菌酶(Lysozyme) | 第25-27页 |
| 1.4 Crustin研究进展 | 第27-34页 |
| 1.4.1 Crustin的定义 | 第27-28页 |
| 1.4.2 Crustin的结构 | 第28页 |
| 1.4.3 Crustin的类型 | 第28-30页 |
| 1.4.4 Crustin的表达模式 | 第30-32页 |
| 1.4.5 Crustin的功能特性 | 第32-34页 |
| 1.5 本论文的研究目的及意义 | 第34-35页 |
| 第二章 拟穴青蟹SpCrus3和SpCrus4功能差异的研究 | 第35-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第36页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第36页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-46页 |
| 2.2.1 实验动物的获得和免疫刺激 | 第37页 |
| 2.2.2 血细胞的分离和组织采样 | 第37-38页 |
| 2.2.3 总RNA的提取 | 第38页 |
| 2.2.4 总RNA的检测 | 第38页 |
| 2.2.5 cDNA第一条链的合成 | 第38-39页 |
| 2.2.6 cDNA的克隆 | 第39-40页 |
| 2.2.7 免疫刺激后表达模式分析 | 第40页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.2.9 SpCrus3和SpCrus4重组蛋白的表达和纯化 | 第41-44页 |
| 2.2.10 SpCrus3和SpCrus4抑菌活性的比较 | 第44-45页 |
| 2.2.11 SpCrus3和SpCrus4细菌结合实验 | 第45页 |
| 2.2.12 SpCrus3和SpCrus4微生物多糖结合实验 | 第45-46页 |
| 2.2.13 SpCrus3和SpCrus4细菌凝集实验 | 第46页 |
| 2.3 结果 | 第46-61页 |
| 2.3.1 SpCrus3和SpCrus4cDNA序列和序列比对结果 | 第46-48页 |
| 2.3.2 相似性和系统进化树分析 | 第48-51页 |
| 2.3.3 SpCrus3和SpCrus4的表达模式 | 第51-54页 |
| 2.3.4 重组蛋白SpCrus3和SpCrus4的表达和纯化 | 第54页 |
| 2.3.5 SpCrus3和SpCrus4在细菌生长抑制实验上的差异 | 第54-55页 |
| 2.3.6 SpCrus3和SpCrus4的细菌结合实验 | 第55-56页 |
| 2.3.7 SpCrus3和SpCrus4微生物多糖结合实验 | 第56-59页 |
| 2.3.8 SpCrus3和SpCrus4细菌凝集实验 | 第59-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第三章 拟穴青蟹SpCrus5的表达及功能研究 | 第63-83页 |
| 3.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第63页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第63页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第63-64页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第64页 |
| 3.2 实验方法 | 第64-67页 |
| 3.2.1 实验动物的获得和免疫刺激 | 第64页 |
| 3.2.2 血细胞的分离和组织采样 | 第64页 |
| 3.2.3 总RNA的提取 | 第64页 |
| 3.2.4 总RNA的检测 | 第64页 |
| 3.2.5 cDNA第一条链的合成 | 第64页 |
| 3.2.6 cDNA的克隆 | 第64-65页 |
| 3.2.7 免疫刺激后表达模式分析 | 第65页 |
| 3.2.8 生物信息学分析 | 第65页 |
| 3.2.9 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR重组蛋白的表达和纯化 | 第65-66页 |
| 3.2.10 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR抑菌活性的比较 | 第66页 |
| 3.2.11 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR细菌结合实验 | 第66页 |
| 3.2.12 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR微生物多糖结合实验 | 第66页 |
| 3.2.13 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR细菌凝集实验 | 第66-67页 |
| 3.2.14 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR蛋白酶抑制实验 | 第67页 |
| 3.3 结果 | 第67-79页 |
| 3.3.1 SpCrus5cDNA序列 | 第67-69页 |
| 3.3.2 相似性和系统进化树分析 | 第69-70页 |
| 3.3.3 SpCrus5的组织分布和表达模式 | 第70-73页 |
| 3.3.4 重组蛋白SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR的表达和纯化 | 第73页 |
| 3.3.5 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR抑菌试验 | 第73-74页 |
| 3.3.6 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR的细菌结合实验 | 第74-75页 |
| 3.3.7 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR的微生物多糖结合实验 | 第75-77页 |
| 3.3.8 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR细菌凝集实验 | 第77-78页 |
| 3.3.9 SpCrus5和SpCrus5-ΔGRR蛋白酶抑制实验 | 第78-79页 |
| 3.4 讨论 | 第79-83页 |
| 总结与创新点 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第95-96页 |
