摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 动物的应激 | 第12-13页 |
1.2 热应激对鱼类的影响 | 第13-15页 |
1.2.1 热应激对鱼类生存影响 | 第13-14页 |
1.2.2 热应激对鱼类生长影响 | 第14页 |
1.2.3 热应激对鱼类基因表达影响 | 第14-15页 |
1.3 热休克蛋白与应激 | 第15-19页 |
1.3.1 热休克蛋白分类及功能 | 第16-18页 |
1.3.2 鱼类热应激下热休克蛋白研究进展 | 第18-19页 |
1.4 应激与免疫 | 第19-20页 |
1.4.1 补体(C3) | 第19页 |
1.4.2 核转录因子(NF-κB) | 第19-20页 |
1.4.3 主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex, MHC) | 第20页 |
1.5 尖头大吻鱥生物学特征 | 第20-21页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
1.6.1 研究目的 | 第21页 |
1.6.2 研究意义 | 第21-22页 |
第二章 尖头大吻鱥热休克蛋白基因克隆及序列特征分析 | 第22-62页 |
2.1 材料和试剂仪器 | 第22-24页 |
2.1.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.2 实验试剂、仪器 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-34页 |
2.2.1 总RNA提取及第一链c DNA的合成 | 第24-27页 |
2.2.2 热休克蛋白基因中间片段的克隆 | 第27-31页 |
2.2.3 热休克蛋白基因 5′和 3′片段扩增 | 第31-34页 |
2.2.4 热休克蛋白基因序列拼接及生物信息学分析 | 第34页 |
2.3 实验结果 | 第34-58页 |
2.3.1 RNA提取和检测 | 第34-35页 |
2.3.2 尖头大吻鱥热休克蛋白基因c DNA序列 | 第35-36页 |
2.3.3 热休克蛋白基因生物信息学及进化分析 | 第36-58页 |
2.4 讨论 | 第58-62页 |
2.4.1 HSP60序列特征分析 | 第58页 |
2.4.2 HSP70序列特征分析 | 第58-59页 |
2.4.3 HSP90β 序列特征分析 | 第59-62页 |
第三章 热应激下尖头大吻鱥HSPs和免疫相关基因的表达响应 | 第62-90页 |
3.1 实验材料、仪器 | 第62页 |
3.1.1 实验材料来源 | 第62页 |
3.1.2 实验试剂设备 | 第62页 |
3.2 实验方法 | 第62-66页 |
3.2.1 热应激处理实验 | 第62-63页 |
3.2.2 总RNA的提取及第一链c DNA的合成 | 第63页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR | 第63-66页 |
3.2.4 数据分析 | 第66页 |
3.3 结果分析 | 第66-84页 |
3.3.1 热应激下HSP60、HSP70、HSP90β1 和HSP90β2 基因表达变化 | 第66-76页 |
3.3.2 热应激下尖头大吻鱥中C3、NF-κB2、MHCⅡB基因的表达 | 第76-84页 |
3.4 讨论 | 第84-90页 |
3.4.1 热应激下热休克蛋白基因的表达分析 | 第84-87页 |
3.4.2 热应激下C3、NF-κB2、MHCⅡB基因的表达分析 | 第87-90页 |
第四章 总结 | 第90-94页 |
参考文献 | 第94-102页 |
附录 1 HSP60系统进化树涉及物种种类表 | 第102-104页 |
附录 2 HSP70系统进化树涉及物种种类表 | 第104-106页 |
附录 3 HSP90β 系统进化树涉及物种种类 | 第106-110页 |
致谢 | 第110-112页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第112-113页 |