| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 黄瓜遗传转化相关研究进展 | 第9-11页 |
| 1.1.1 直接再生 | 第9-10页 |
| 1.1.2 间接再生 | 第10-11页 |
| 1.1.3 体细胞胚胎发生 | 第11页 |
| 1.2 基因编辑相关研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 基因编辑技术的发现和发展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 基因编辑技术在农作物育种中优势初显 | 第13页 |
| 1.2.3 缺乏高效遗传转化体系限制了基因编辑技术在黄瓜中的应用 | 第13页 |
| 1.3 黄瓜性别决定相关研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 研究黄瓜性别发育具有重要的应用价值 | 第13-14页 |
| 1.3.2 葫芦科植物性别决定主效基因相关研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第16-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.2 培养基及其它生化试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-27页 |
| 2.3.1 载体改造和优化 | 第17页 |
| 2.3.2 设计sgRNA | 第17-18页 |
| 2.3.3 pKCG401/pHCG401载体构建 | 第18-19页 |
| 2.3.4 下胚轴抗性愈伤诱导体系 | 第19-20页 |
| 2.3.5 突变效率检测 | 第20-22页 |
| 2.3.6 原位杂交 | 第22-24页 |
| 2.3.7 农杆菌介导的遗传转化 | 第24-25页 |
| 2.3.8 脱靶效率检测 | 第25-26页 |
| 2.3.9 转基因后代筛选 | 第26-27页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第27-45页 |
| 3.1 遗传转化体系地建立 | 第27-32页 |
| 3.1.1 利用传统浸泡方法无法获得转基因植株 | 第27-28页 |
| 3.1.2 再生位点在U口深处 | 第28-29页 |
| 3.1.3 真空负压增加了侵染深度 | 第29-30页 |
| 3.1.4 获得GFP阳性再生芽 | 第30页 |
| 3.1.5 添加Hemin可以促进生根、提高转基因植株成活率 | 第30-31页 |
| 3.1.6 获得GFP阳性再生植株 | 第31-32页 |
| 3.2 基因编辑体系的优化 | 第32-36页 |
| 3.2.1 检索黄瓜内源CsU6启动子 | 第32-33页 |
| 3.2.2 以CsU6-1驱动sgRNA获得最高的编辑效率 | 第33-36页 |
| 3.3 创制全雌系种质材料 | 第36-42页 |
| 3.3.1 设计敲除Cs WIP1基因的sgRNA | 第36-37页 |
| 3.3.2 遗传转化得TO代转基因植株 | 第37-38页 |
| 3.3.3 检测脱靶率 | 第38页 |
| 3.3.4 荧光辅助筛选获得transgene-free突变体 | 第38-41页 |
| 3.3.5 Cswip1突变体为全雌株 | 第41-42页 |
| 3.4 检验遗传转化和基因编辑效率 | 第42-45页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简历 | 第51页 |
