| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 甲壳动物免疫防御与疾病 | 第12页 |
| 1.2 活性氧ROS与氧化应激 | 第12-15页 |
| 1.2.1 活性氧简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 活性氧造成的损伤 | 第13页 |
| 1.2.3 抗氧化系统 | 第13-15页 |
| 1.3 小热休克蛋白研究现状 | 第15-19页 |
| 1.3.1 热休克蛋白简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 小热休克蛋白简介 | 第16-17页 |
| 1.3.3 小热休克蛋白的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.3.4 小热休克蛋白的抗氧化机制 | 第18-19页 |
| 1.4 铁蛋白 | 第19-22页 |
| 1.4.1 铁蛋白简介 | 第19-21页 |
| 1.4.2 铁蛋白的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.4.3 铁蛋白的抗氧化机制 | 第22页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第2章 日本沼虾MnHSP27基因的克隆和生物信息学分析 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 日本沼虾 | 第24页 |
| 2.1.2 引物 | 第24页 |
| 2.1.3 主要实验仪器及试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.2.1 总RNA提取及cDNA制备 | 第25页 |
| 2.2.2 日本沼虾MnHSP27基因的搜索及克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.3 日本沼虾MnHSP27序列的生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-32页 |
| 2.3.1 日本沼虾MnHSP27基因的序列分析 | 第26-28页 |
| 2.3.2 日本沼虾MnHSP27蛋白的一级结构分析 | 第28页 |
| 2.3.3 日本沼虾MnHSP27蛋白的二级和三级结构分析 | 第28-30页 |
| 2.3.4 日本沼虾MnHSP27的功能序列分析 | 第30-31页 |
| 2.3.5 日本沼虾MnHSP27的分子进化分析 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 日本沼虾MnFerritin基因的克隆和生物信息分析 | 第34-44页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第34页 |
| 3.1.1 引物 | 第34页 |
| 3.1.2 日本沼虾铁蛋白基因的搜索与克隆 | 第34页 |
| 3.2 实验结果 | 第34-43页 |
| 3.2.1 日本沼虾铁蛋白基因的序列分析 | 第34-36页 |
| 3.2.2 日本沼虾铁蛋白的一级结构分析 | 第36-37页 |
| 3.2.3 日本沼虾铁蛋白的二级和三级结构分析 | 第37-39页 |
| 3.2.4 日本沼虾铁蛋白的结构域预测 | 第39-40页 |
| 3.2.5 日本沼虾铁蛋白的分子进化分析 | 第40-43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-44页 |
| 第4章 日本沼虾MnHSP27和MnFerritin基因的重组表达 | 第44-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 4.1.1 菌种和质粒 | 第44页 |
| 4.1.2 引物 | 第44页 |
| 4.1.3 实验仪器和试剂 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 4.2.1 构建原核表达载体 | 第45页 |
| 4.2.2 重组蛋白的可溶性分析及纯化 | 第45-46页 |
| 4.2.3 铁蛋白的复性及活性检测 | 第46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-48页 |
| 4.3.1 日本沼虾MnHSP27重组蛋白的表达和纯化 | 第46-47页 |
| 4.3.2 日本沼虾铁蛋白重组蛋白的表达和纯化 | 第47-48页 |
| 4.3.3 检测重组铁蛋白的活性 | 第48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第5章 日本沼虾MnHSP27和MnFerritin表达模式的研究 | 第49-56页 |
| 5.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.1.1 病原菌 | 第49页 |
| 5.1.2 引物 | 第49页 |
| 5.1.3 实验仪器和试剂 | 第49-50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 日本沼虾不同组织的分离 | 第50页 |
| 5.2.2 日本沼虾总蛋白的提取 | 第50页 |
| 5.2.3 维氏气单孢菌感染日本沼虾的免疫刺激实验 | 第50-51页 |
| 5.2.4 数据处理 | 第51页 |
| 5.3 实验结果及讨论 | 第51-56页 |
| 5.3.1 日本沼虾MnHSP27的表达模式 | 第51-53页 |
| 5.3.2 日本沼虾铁蛋白的表达模式 | 第53-56页 |
| 第6章 日本沼虾MnHSP27和MnFerritin的抗氧化作用 | 第56-62页 |
| 6.1 实验材料 | 第56页 |
| 6.1.1 实验仪器与试剂 | 第56页 |
| 6.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 6.2.1 大肠杆菌对过氧化氢的耐受分析 | 第56-57页 |
| 6.2.2 阿霉素刺激日本沼虾的氧化应激实验 | 第57页 |
| 6.2.3 数据处理 | 第57页 |
| 6.3 实验结果及讨论 | 第57-62页 |
| 6.3.1 日本沼虾MnHSP27的抗氧化作用分析 | 第57-59页 |
| 6.3.2 日本沼虾铁蛋白的抗氧化作用分析 | 第59-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第79页 |
