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共培养系统中血管内皮细胞对乳腺癌细胞影响的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
第1章 绪论第9-24页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第9页
    1.2 国内外研究进展第9-11页
    1.3 肿瘤细胞与内皮细胞相互作用机制第11-18页
        1.3.1 肿瘤组织中血管生成的重要性第12页
        1.3.2 肿瘤细胞与内皮细胞的相互作用第12-13页
        1.3.3 肿瘤细胞与肿瘤干细胞的区别第13页
        1.3.4 肿瘤干细胞与内皮细胞的相互作用第13-18页
    1.4 肿瘤细胞与血管内皮细胞共培养的研究策略第18-21页
        1.4.1 体内模型研究第19页
        1.4.2 体外构建肿瘤细胞血管生成模型第19-20页
        1.4.3 肿瘤细胞与血管内皮细胞间旁分泌作用的研究第20-21页
    1.5 本研究的主要研究内容第21-24页
        1.5.1 生物活性水凝胶的制备第21页
        1.5.2 共培养系统的构建第21-22页
        1.5.3 肿瘤细胞与内皮细胞的共培养第22页
        1.5.4 肿瘤干细胞与内皮细胞的共培养第22-23页
        1.5.5 技术路线图第23-24页
第2章 实验材料与方法第24-33页
    2.1 实验材料第24-27页
        2.1.1 细胞系第24页
        2.1.2 主要试剂第24-25页
        2.1.3 主要实验仪器第25-26页
        2.1.4 主要溶液配制第26页
        2.1.5 实时定量PCR引物(qRT-PCR)第26-27页
    2.2 实验方法第27-32页
        2.2.1 细胞培养第27页
        2.2.2 海藻酸钠氧化第27-28页
        2.2.3 共培养体系的构建第28-29页
        2.2.4 扫描电镜第29页
        2.2.5 鬼笔环肽渲染细胞微丝骨架蛋白第29页
        2.2.6 细胞克隆直径统计第29-30页
        2.2.7 实时定量PCR第30-31页
        2.2.8 免疫荧光检测肿瘤细胞分子标志物的表达第31页
        2.2.9 Transwell观察细胞侵袭能力第31-32页
        2.2.10 划痕实验观察细胞迁移能力第32页
        2.2.11 死活细胞染色第32页
        2.2.12 统计分析第32页
    2.3 本章小结第32-33页
第3章 共培养系统的构建第33-48页
    3.1 引言第33页
    3.2 共培养体系的构建第33-45页
        3.2.1 水凝胶材料的制备第34-35页
        3.2.2 共培养体系结构设计第35-36页
        3.2.3 水凝胶力学性能对血管内皮细胞生长及增殖的影响第36-37页
        3.2.4 共培养系统中细胞来源的确定第37-40页
        3.2.5 共培养系统中细胞比例对肿瘤细胞生长增殖的影响第40-41页
        3.2.6 共培养系统中细胞总数对肿瘤细胞生长增殖的影响第41-43页
        3.2.7 细胞间直接接触作用与间接作用对肿瘤细胞生长增殖的影响第43-44页
        3.2.8 直接接触作用与间接作用后细胞团死活染色第44-45页
    3.3 讨论第45-46页
    3.4 本章小结第46-48页
第4章 血管内皮细胞对乳腺癌细胞影响的研究第48-56页
    4.1 引言第48页
    4.2 肿瘤细胞与内皮细胞共培养第48-54页
        4.2.1 共培养肿瘤细胞生长增殖能力的影响第48-49页
        4.2.2 扫描电镜(SEM)观察肿瘤细胞三维外观形貌第49-50页
        4.2.3 肿瘤细胞多药耐药蛋白 1(MDR1)的表达第50-51页
        4.2.4 肿瘤细胞基质金属蛋白酶 9(MMP9)的表达第51-52页
        4.2.5 肿瘤细胞干细胞标志物的检测第52-53页
        4.2.6 qRT-PCR检测分子标志物mRNA的表达第53-54页
    4.3 讨论第54-55页
    4.4 本章小结第55-56页
第5章 血管内皮细胞对乳腺癌干细胞影响的研究第56-65页
    5.1 引言第56页
    5.2 内皮细胞对肿瘤干细胞的影响第56-62页
        5.2.1 内皮细胞对肿瘤干细胞生长增殖的影响第56-57页
        5.2.2 肿瘤干细胞VEGFR的表达第57-58页
        5.2.3 肿瘤干细胞标志物的检测第58-59页
        5.2.4 肿瘤干细胞多药耐药蛋白 1(MDR1)的表达第59页
        5.2.5 肿瘤干细胞基质金属蛋白酶 9(MMP9)的表达第59-61页
        5.2.6 qRT-PCR检测分子标志物mRNA的表达第61-62页
    5.3 讨论第62-63页
    5.4 本章小结第63-65页
结论第65-66页
展望第66-67页
参考文献第67-73页
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果第73-75页
致谢第75页

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