摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第9-24页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第9页 |
1.2 国内外研究进展 | 第9-11页 |
1.3 肿瘤细胞与内皮细胞相互作用机制 | 第11-18页 |
1.3.1 肿瘤组织中血管生成的重要性 | 第12页 |
1.3.2 肿瘤细胞与内皮细胞的相互作用 | 第12-13页 |
1.3.3 肿瘤细胞与肿瘤干细胞的区别 | 第13页 |
1.3.4 肿瘤干细胞与内皮细胞的相互作用 | 第13-18页 |
1.4 肿瘤细胞与血管内皮细胞共培养的研究策略 | 第18-21页 |
1.4.1 体内模型研究 | 第19页 |
1.4.2 体外构建肿瘤细胞血管生成模型 | 第19-20页 |
1.4.3 肿瘤细胞与血管内皮细胞间旁分泌作用的研究 | 第20-21页 |
1.5 本研究的主要研究内容 | 第21-24页 |
1.5.1 生物活性水凝胶的制备 | 第21页 |
1.5.2 共培养系统的构建 | 第21-22页 |
1.5.3 肿瘤细胞与内皮细胞的共培养 | 第22页 |
1.5.4 肿瘤干细胞与内皮细胞的共培养 | 第22-23页 |
1.5.5 技术路线图 | 第23-24页 |
第2章 实验材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 细胞系 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第26页 |
2.1.5 实时定量PCR引物(qRT-PCR) | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第27页 |
2.2.2 海藻酸钠氧化 | 第27-28页 |
2.2.3 共培养体系的构建 | 第28-29页 |
2.2.4 扫描电镜 | 第29页 |
2.2.5 鬼笔环肽渲染细胞微丝骨架蛋白 | 第29页 |
2.2.6 细胞克隆直径统计 | 第29-30页 |
2.2.7 实时定量PCR | 第30-31页 |
2.2.8 免疫荧光检测肿瘤细胞分子标志物的表达 | 第31页 |
2.2.9 Transwell观察细胞侵袭能力 | 第31-32页 |
2.2.10 划痕实验观察细胞迁移能力 | 第32页 |
2.2.11 死活细胞染色 | 第32页 |
2.2.12 统计分析 | 第32页 |
2.3 本章小结 | 第32-33页 |
第3章 共培养系统的构建 | 第33-48页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 共培养体系的构建 | 第33-45页 |
3.2.1 水凝胶材料的制备 | 第34-35页 |
3.2.2 共培养体系结构设计 | 第35-36页 |
3.2.3 水凝胶力学性能对血管内皮细胞生长及增殖的影响 | 第36-37页 |
3.2.4 共培养系统中细胞来源的确定 | 第37-40页 |
3.2.5 共培养系统中细胞比例对肿瘤细胞生长增殖的影响 | 第40-41页 |
3.2.6 共培养系统中细胞总数对肿瘤细胞生长增殖的影响 | 第41-43页 |
3.2.7 细胞间直接接触作用与间接作用对肿瘤细胞生长增殖的影响 | 第43-44页 |
3.2.8 直接接触作用与间接作用后细胞团死活染色 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-46页 |
3.4 本章小结 | 第46-48页 |
第4章 血管内皮细胞对乳腺癌细胞影响的研究 | 第48-56页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 肿瘤细胞与内皮细胞共培养 | 第48-54页 |
4.2.1 共培养肿瘤细胞生长增殖能力的影响 | 第48-49页 |
4.2.2 扫描电镜(SEM)观察肿瘤细胞三维外观形貌 | 第49-50页 |
4.2.3 肿瘤细胞多药耐药蛋白 1(MDR1)的表达 | 第50-51页 |
4.2.4 肿瘤细胞基质金属蛋白酶 9(MMP9)的表达 | 第51-52页 |
4.2.5 肿瘤细胞干细胞标志物的检测 | 第52-53页 |
4.2.6 qRT-PCR检测分子标志物mRNA的表达 | 第53-54页 |
4.3 讨论 | 第54-55页 |
4.4 本章小结 | 第55-56页 |
第5章 血管内皮细胞对乳腺癌干细胞影响的研究 | 第56-65页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 内皮细胞对肿瘤干细胞的影响 | 第56-62页 |
5.2.1 内皮细胞对肿瘤干细胞生长增殖的影响 | 第56-57页 |
5.2.2 肿瘤干细胞VEGFR的表达 | 第57-58页 |
5.2.3 肿瘤干细胞标志物的检测 | 第58-59页 |
5.2.4 肿瘤干细胞多药耐药蛋白 1(MDR1)的表达 | 第59页 |
5.2.5 肿瘤干细胞基质金属蛋白酶 9(MMP9)的表达 | 第59-61页 |
5.2.6 qRT-PCR检测分子标志物mRNA的表达 | 第61-62页 |
5.3 讨论 | 第62-63页 |
5.4 本章小结 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |