向日葵NBS型抗锈病相关基因的克隆与分析
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 向日葵锈病的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.1 向日葵锈病的危害 | 第8页 |
| 1.2 向日葵锈病的防治 | 第8-9页 |
| 1.3 向日葵抗锈病育种的研究进展 | 第9页 |
| 2 植物的抗病机制及抗病基因的研究 | 第9-17页 |
| 2.1 植物抗病机制 | 第9-10页 |
| 2.2 植物抗病基因的类型 | 第10-12页 |
| 2.3 植物抗病基因的结构与功能 | 第12-15页 |
| 2.4 植物抗病基因的克隆方法 | 第15-17页 |
| 3 RGA的表达分析 | 第17-18页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第18页 |
| 第二章 向日葵NBS型RGAs的克隆研究 | 第18-31页 |
| 1 材料与方法 | 第18-26页 |
| 1.1 材料 | 第18-19页 |
| 1.2 试剂 | 第19页 |
| 1.3 仪器 | 第19页 |
| 1.4 培养与接菌方法 | 第19页 |
| 1.5 样品采集 | 第19页 |
| 1.6 向日葵叶片总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 1.7 RNA的纯化及检测 | 第20-21页 |
| 1.8 cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| 1.9 引物的设计及合成 | 第21-22页 |
| 1.10 PCR扩增 | 第22-23页 |
| 1.11 PCR扩增产物回收 | 第23页 |
| 1.12 回收产物连接 | 第23页 |
| 1.13 感受太细胞的制备 | 第23-24页 |
| 1.14 连接产物转化 | 第24页 |
| 1.15 阳性克隆PCR检测 | 第24-25页 |
| 1.16 质粒提取 | 第25页 |
| 1.17 PCR产物测序及序列分析 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.1 向日葵总RNA提取 | 第26页 |
| 2.2 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.3 片段回收、克隆及阳性克隆鉴定 | 第27页 |
| 2.4 质粒提取与测序 | 第27页 |
| 2.5 阳性克隆的测序结果初步分析 | 第27-28页 |
| 2.6 向日葵HaRGA系统进化树分析 | 第28-29页 |
| 2.7 向日葵HaRGAs氨基酸序列相似性分析 | 第29页 |
| 2.8 向日葵HaRGAs氨基酸多重序列对比 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 向日葵RGA的表达谱分析 | 第31-40页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.2 材料的种植培养、处理及采样 | 第31-32页 |
| 1.3 试剂 | 第32页 |
| 1.4 仪器 | 第32页 |
| 1.5 RNA提取 | 第32-33页 |
| 1.6 RNA的纯化及检测 | 第33页 |
| 1.7 cDNA第一链的合成 | 第33-34页 |
| 1.8 引物设计、合成及检测 | 第34-35页 |
| 1.9 RT-PCR反应 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.1 向日葵总RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.2 定量引物检测 | 第36页 |
| 2.3 表达谱分析 | 第36-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 全文结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
