摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 引言 | 第8-22页 |
1.1 选题背景 | 第8-9页 |
1.2 黄病毒属病毒的研究简史、分类和疾病 | 第9-11页 |
1.2.1 黄病毒属病毒的研究简史 | 第9-10页 |
1.2.2 黄病毒属病毒的分类 | 第10-11页 |
1.3 黄病毒属病毒的基因组和生活周期 | 第11-14页 |
1.3.1 黄病毒属病毒的基因组 | 第11-13页 |
1.3.2 黄病毒属病毒的生活周期 | 第13-14页 |
1.4 黄病毒属病毒ns2b-ns3的研究意义 | 第14-19页 |
1.4.1 ns2b-ns3蛋白的意义 | 第14-15页 |
1.4.2 ns2b-ns3蛋白的研究现状 | 第15-19页 |
1.5 本课题的研究内容与意义 | 第19-20页 |
1.6 本论文的结构安排 | 第20-22页 |
第2章 实验材料、实验方法和实验原理 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 质粒载体 | 第22页 |
2.1.2 菌株 | 第22页 |
2.1.3 实验试剂 | 第22-24页 |
2.1.5 实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.6 引物 | 第25-26页 |
2.2 实验原理 | 第26-32页 |
2.2.1 大肠杆菌表达体系 | 第26-27页 |
2.2.2 重组基因的构建 | 第27-28页 |
2.2.3 融合蛋白的纯化原理和方法 | 第28-30页 |
2.2.4 酶活测定原理 | 第30-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-38页 |
2.3.1 基因克隆 | 第32-35页 |
2.3.2 蛋白的表达与纯化 | 第35-37页 |
2.3.3 蛋白酶活性分析 | 第37-38页 |
第3章 结果和讨论 | 第38-58页 |
3.1 NS2B-NS3蛋白的基本信息 | 第38-43页 |
3.1.1 ZIKANS2B-NS3蛋白的理化性质分析 | 第38-41页 |
3.1.2 二级结构预测 | 第41-43页 |
3.2 寨卡病毒NS2B45-NS3蛋白的分子构建和表达及纯化 | 第43-49页 |
3.2.1 pET-32m-NS2B45-NS3重组质粒的构建 | 第43-45页 |
3.2.2 NS2B45-NS3融合蛋白的表达和纯化 | 第45-49页 |
3.3 寨卡病毒NS2B45-NS3蛋白的蛋白酶活性测定和抑制剂活性测定 | 第49-58页 |
3.3.1 NS2B45-NS3融合蛋白的蛋白酶活性测定 | 第49-51页 |
3.3.2 NS2B45-NS3融合蛋白的蛋白酶抑制剂aprotinin活性测定 | 第51-53页 |
3.3.3 NS2B45-NS3融合蛋白与NS2B45-NS3pro的蛋白酶活性和抑制剂活性比较 | 第53页 |
3.3.4 NS2B45-NS3融合蛋白的蛋白酶抑制剂单宁酸活性测定 | 第53-58页 |
第4章 结果讨论和总结 | 第58-60页 |
4.1 实验结果讨论 | 第58-59页 |
4.1.1 生理状况下,寨卡病毒蛋白酶可能以NS3的全长状态存在. | 第58页 |
4.1.2 生理状况下,寨卡病毒NS3蛋白不同结构域间可能存在协同效果 | 第58页 |
4.1.3 寨卡病毒的抗病毒药物筛选平台的构建 | 第58-59页 |
4.2 全文总结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
发表论文及参加科研情况 | 第70-71页 |