| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第13-26页 |
| 1.1 单核细胞增生李斯特菌简介 | 第13-15页 |
| 1.1.1 李斯特菌的生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.1.2 PrfA因子简介 | 第15页 |
| 1.2 CcpA因子简介 | 第15-16页 |
| 1.3 PTS系统及PTS糖代谢 | 第16-18页 |
| 1.3.1 PTS系统 | 第16页 |
| 1.3.2 PTS糖的代谢 | 第16-18页 |
| 1.4 生物被膜简介 | 第18页 |
| 1.5 生物被膜的形成及影响因素 | 第18-20页 |
| 1.5.1 生物被膜的形成 | 第18-19页 |
| 1.5.2 生物被膜形成的影响因素 | 第19-20页 |
| 1.6 生物被膜的危害及防治 | 第20-23页 |
| 1.6.1 生物被膜的危害 | 第20页 |
| 1.6.2 生物被膜的防治 | 第20-23页 |
| 1.7 生物被膜研究的常用技术 | 第23-24页 |
| 1.7.1 常用生物模型 | 第23页 |
| 1.7.2 常用的方法 | 第23-24页 |
| 1.8 组学研究 | 第24-26页 |
| 第二章 单核细胞增生李斯特菌CcpA与PrfA关系的探究 | 第26-39页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第26-28页 |
| 2.1.1 菌株 | 第26页 |
| 2.1.2 实验试剂及配制 | 第26-28页 |
| 2.1.3 实验设备 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 引物设计及检测 | 第28-29页 |
| 2.2.2 菌株的培养及收集 | 第29-30页 |
| 2.2.3 RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.4 RNA含量测定及完整性检测 | 第30页 |
| 2.2.5 反转录 | 第30-31页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR | 第31-34页 |
| 2.2.7 溶血活性检测 | 第34-35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-37页 |
| 2.3.1 qRT-PCR检测游离状态下不同培养基EGDe、EGDe△PrfA、EGDe△PrfApPrfA、EGDe△PrfApPrfA~*四种菌中ccpA的相对表达 | 第35-36页 |
| 2.3.2 qRT-PCR检测被膜状态下不同培养基EGDe、EGDe△PrfA、EGDe△PrfApPrfA、EGDe△PrfApPrfA~*四种菌中ccpA的相对表达 | 第36页 |
| 2.3.3 EGDe、EGDeACcpA溶血实验结果 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 全基因组微阵列分析Lm中PrfA调控生物被膜形成的可能途径及分子机制 | 第39-57页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第39页 |
| 3.1.1 菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 实验试剂及配制 | 第39页 |
| 3.1.3 实验设备 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 菌株的培养及收集 | 第39-40页 |
| 3.2.2 RNA的提取 | 第40页 |
| 3.2.3 RNA含量测定及完整性检测 | 第40页 |
| 3.2.4 全基因组微阵列分析 | 第40页 |
| 3.2.5 qRT-PCR做进一步验证 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-54页 |
| 3.3.1 EGDe被膜菌全基因组微阵列分析 | 第41-42页 |
| 3.3.2 PrfA调控Lm生物被膜形成中在转录水平发生差异表达的与PrfA相关的基因分析 | 第42-54页 |
| 3.3.3 qRT-PCR结果 | 第54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 半定量RT-PCR研究PrfA调控Lm被膜形成可能相关基因 | 第57-67页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第58-59页 |
| 4.1.1 菌株 | 第58页 |
| 4.1.2 实验试剂及配制 | 第58页 |
| 4.1.3 实验设备 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 4.2.1 引物设计及特异性检测 | 第59-60页 |
| 4.2.2 菌株的培养及收集 | 第60页 |
| 4.2.3 RNA的提取 | 第60-61页 |
| 4.2.4 RNA含量测定及完整性检测 | 第61页 |
| 4.2.5 反转录得到cDNA | 第61页 |
| 4.2.6 双链DNA的合成 | 第61页 |
| 4.2.7 电泳及软件分析 | 第61-62页 |
| 4.3 实验结果 | 第62-65页 |
| 4.3.1 电泳结果图 | 第62-63页 |
| 4.3.2 Origin5.0及CorelDraw Graphics SuiteX4结果图 | 第63-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
