| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 核盘菌概述 | 第12-16页 |
| 1.1 核盘菌的分类及生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.2 核盘菌的生活史 | 第14页 |
| 1.3 核盘菌的危害及防治 | 第14-16页 |
| 2 丝状真菌基因功能研究策略 | 第16-21页 |
| 2.1 转座子标签技术 | 第16页 |
| 2.2 基因敲除 | 第16-18页 |
| 2.3 RNA 干扰 | 第18-19页 |
| 2.4 超表达 | 第19-20页 |
| 2.5 酵母单/双杂技术 | 第20页 |
| 2.6 其他方法 | 第20-21页 |
| 2.7 总结 | 第21页 |
| 3 bZIP 转录因子研究进展 | 第21-25页 |
| 3.1 转录因子概述 | 第21-22页 |
| 3.2 bZIP 转录因子家族 | 第22-23页 |
| 3.3 真菌 bZIP 转录因子研究进展 | 第23-25页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 核盘菌 SsAda-1 序列分析及敲除载体的构建 | 第26-43页 |
| 1 材料 | 第26-28页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 主要培养基及试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-35页 |
| 2.1 核盘菌 SsAda-1 上下游片段扩增及序列测定 | 第28-32页 |
| 2.2 敲除载体 pXEH:: AL::AR 构建及重组质粒鉴定 | 第32-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.1 核盘菌转录因子 SsAda-1 序列分析 | 第35-39页 |
| 3.2 PCR 扩增核盘菌 SsAda-1 上下游片段结果 | 第39页 |
| 3.3 重组质粒 pMD18-T:: AL、pMD18-T::AR PCR 及酶切鉴定结果 | 第39-41页 |
| 3.4 重组质粒 pXEH:: AL::AR PCR 和酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 PEG-CaCl2介导核盘菌原生质体遗传转化及转化子的筛选验证 | 第43-61页 |
| 1 材料 | 第43-45页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要培养基及试剂配制 | 第43-45页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-53页 |
| 2.1 核盘菌原生质体的制备 | 第45-46页 |
| 2.2 PEG 介导的核盘菌原生质体转化 | 第46页 |
| 2.3 转化子的筛选 | 第46页 |
| 2.4 转化子 PCR 初步鉴定 | 第46-49页 |
| 2.5 Southern 杂交鉴定敲除突变体 | 第49-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-60页 |
| 3.1 核盘菌原生质体制备 | 第53-54页 |
| 3.2 核盘菌原生质体的转化 | 第54-55页 |
| 3.3 转化子 DNA 提取 | 第55页 |
| 3.4 转化子 PCR 初步验证 | 第55-58页 |
| 3.5 转化子 Southern 杂交验证 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 转录因子 SsAda-1 的功能研究 | 第61-73页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| 1.1 菌株 | 第61页 |
| 1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-66页 |
| 2.1 菌丝生长速度测定 | 第62页 |
| 2.2 菌丝形态及侵染结构的显微观察 | 第62页 |
| 2.3 核盘菌 SsAda-1 敲除突变体致病性分析 | 第62-63页 |
| 2.4 核盘菌菌核的诱导 | 第63页 |
| 2.5 核盘菌子囊盘的诱导 | 第63页 |
| 2.6 核盘菌总 RNA 的提取 | 第63-64页 |
| 2.7 反转录 | 第64-65页 |
| 2.8 Real-Time PCR 引物设计及扩增条件 | 第65-66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-72页 |
| 3.1 菌丝生长形态观察及生长速度测定 | 第66-67页 |
| 3.2 菌丝形态及侵染结构显微观察结果 | 第67-68页 |
| 3.3 致病性分析 | 第68-69页 |
| 3.4 Real-Time PCR 检测核盘菌 SsAda-1 基因不同时期的表达量 | 第69-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
