| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第14-25页 |
| 1 农药的使用现状及危害 | 第14页 |
| 2 有机磷与氨基甲酸酯类农药的使用情况和危害分析 | 第14-16页 |
| 3 有机磷与氨基甲酸酯类农药残留的检测现状 | 第16-17页 |
| 4 农药残留快速检测方法 | 第17-22页 |
| 4.1 化学快速检测技术 | 第17页 |
| 4.2 酶抑制法 | 第17-18页 |
| 4.3 免疫分析法 | 第18页 |
| 4.4 生物传感器法 | 第18-22页 |
| 4.4.1 生物传感器概念和基本结构 | 第19页 |
| 4.4.2 电化学生物传感器 | 第19-20页 |
| 4.4.3 光学生物传感器 | 第20-22页 |
| 4.4.4 化学发光生物传感器的发展前景 | 第22页 |
| 5 本课题研究的内容、目的及意义 | 第22-25页 |
| 5.1 研究目标 | 第22页 |
| 5.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 5.2.1 敏感性研究 | 第22-23页 |
| 5.2.2 固定化鲫鱼脑AChE及其部分性质的测定 | 第23页 |
| 5.2.3 化学发光生物传感器的研制及其检测效果的评价 | 第23页 |
| 5.2.4 检测机理的探讨 | 第23页 |
| 5.3 研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 鲫鱼乙酰胆碱酯酶的提取和性质研究 | 第25-35页 |
| 引言 | 第25-27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 1.1 主要试剂 | 第27页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 1.3.1 粗酶的提取 | 第27-28页 |
| 1.3.2 蛋白质含量测定 | 第28页 |
| 1.3.3 酶活测定 | 第28页 |
| 1.3.4 不同生长期鲫鱼酶活的测定 | 第28页 |
| 1.3.5 半抑制浓度测定 | 第28-29页 |
| 1.3.6 时间-抑制率曲线 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.1 不同生长期鲫鱼酶活的对比 | 第29-30页 |
| 2.2 不同种类农药对AChE粗酶液的抑制效应 | 第30-31页 |
| 2.3 不同种类农药对AChE粗酶液的半数抑制浓度 | 第31-32页 |
| 2.4 时间-抑制率曲线 | 第32-33页 |
| 3 结论与讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 鲫鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化及其固定化 | 第35-48页 |
| 引言 | 第35-37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 1.1 主要试剂 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第37页 |
| 1.3 实验方法 | 第37-40页 |
| 1.3.1 鲫鱼肌肉AChE的提取 | 第37页 |
| 1.3.2 PEG分级沉淀鲫鱼肌肉AChE | 第37-38页 |
| 1.3.3 硫酸铵盐析法纯化鲫鱼肌肉AChE | 第38页 |
| 1.3.4 固定化酶的制备 | 第38-39页 |
| 1.3.5 游离酶和固定化酶的pH稳定性和热稳定性 | 第39页 |
| 1.3.6 游离酶酶和固定化酶的动力学曲线 | 第39页 |
| 1.3.7 游离酶的酶活测定和蛋白质测定 | 第39页 |
| 1.3.8 固定化酶酶活测定 | 第39-40页 |
| 1.3.9 PEG含量测定 | 第40页 |
| 1.3.10 催化动力学分析 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-46页 |
| 2.1 鲫鱼肌肉AChE纯化结果 | 第40-42页 |
| 2.1.1 PEG分级沉淀鲫鱼肌肉AChE | 第40-41页 |
| 2.1.2 硫酸铵盐析法沉淀鲫鱼肌肉AChE | 第41-42页 |
| 2.2 固定化条件 | 第42-43页 |
| 2.3 固定化酶的pH值稳定性和热稳定性 | 第43-45页 |
| 2.4 游离酶和固定化酶的动力学曲线 | 第45页 |
| 2.5 催化动力学分析 | 第45-46页 |
| 3 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 基于固定化乙酰胆碱酯酶的化学发光生物传感器的研制 | 第48-70页 |
| 引言 | 第48-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-53页 |
| 1.1 实验材料 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第50页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第50-51页 |
| 1.5 实验方法 | 第51-53页 |
| 1.5.1 酶反应器的制备 | 第51页 |
| 1.5.2 传感器的组装及使用步骤 | 第51-52页 |
| 1.5.3 传感器的使用步骤 | 第52页 |
| 1.5.4 农药浓度的测定 | 第52页 |
| 1.5.5 样品准备 | 第52-53页 |
| 1.5.6 农药的氧化 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-66页 |
| 2.1 传感器操作条件 | 第53-59页 |
| 2.1.1 铁氰化钾浓度 | 第53-54页 |
| 2.1.2 鲁米诺浓度 | 第54页 |
| 2.1.3 体系pH | 第54-55页 |
| 2.1.4 流速 | 第55-56页 |
| 2.1.5 预氧化对农药测定的影响 | 第56页 |
| 2.1.6 农药抑制时间 | 第56-57页 |
| 2.1.7 复活剂恢复酶活时间 | 第57页 |
| 2.1.8 底物与酶反应时间 | 第57-59页 |
| 2.2 标准曲线的建立 | 第59-61页 |
| 2.3 检测方法的评价 | 第61-63页 |
| 2.3.1 精密度实验 | 第61页 |
| 2.3.2 回收率实验 | 第61-63页 |
| 2.3.3 重复使用效果 | 第63页 |
| 2.4 固定化酶的保存时间 | 第63-64页 |
| 2.5 机理的讨论 | 第64-66页 |
| 2.5.1 化学发光分析 | 第64页 |
| 2.5.2 紫外光谱分析 | 第64-66页 |
| 3 结论与讨论 | 第66-70页 |
| 3.1 酶传感器条件的优化与性能评价 | 第66-67页 |
| 3.3 固定化酶的复活 | 第67-68页 |
| 3.4 有机磷农药的预氧化 | 第68页 |
| 3.5 传感器的机理 | 第68-69页 |
| 3.6 进一步的研究方向 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间成果目录 | 第79页 |
