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石油烃污染对海洋模式生物海胆的分子毒理效应及机制研究

创新点摘要第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第1章 绪论第13-36页
    1.1 石油污染对海洋生态环境的影响第13-16页
        1.1.1 海洋石油污染近况第13-15页
        1.1.2 石油在海洋中的残留第15页
        1.1.3 油污染对海洋环境的影响第15-16页
    1.2 油污染对模式生物的毒理学研究现状第16-31页
        1.2.1 油污染对模式生物毒性效应研究第17-19页
        1.2.2 油污染对模式生物毒性效应的检测方法研究进展第19-27页
        1.2.3 毒理学技术研究现状及存在的问题分析第27-31页
    1.3 研究的目的、意义、内容和技术路线第31-36页
        1.3.1 选题的来源及研究目的、意义第31-34页
        1.3.2 试验内容第34-35页
        1.3.3 技术流程第35-36页
第2章 石油烃对马粪海胆胚胎四种酶活性的影响第36-46页
    2.1 试验材料与方法第36页
        2.1.1 试验生物第36页
        2.1.2 药品和仪器第36页
    2.2 试验方法第36-38页
        2.2.1 试验中溶液的制备第36页
        2.2.2 催产和毒性暴露试验第36-37页
        2.2.3 酶测定的方法第37-38页
    2.3 实验结果和讨论第38-43页
        2.3.1 胚胎发育的情况第38页
        2.3.2 石油烃对胚胎发育的影响第38-39页
        2.3.3 石油经对海胆胚胎4种酶的影响第39-43页
    2.4 结论第43-46页
第3章 石油烃对马粪海胆DNA损伤的SCGE检测第46-57页
    3.1 试验材料第46-47页
        3.1.1 试验动物的培养第46页
        3.1.2 试剂第46页
        3.1.3 主要仪器设备第46-47页
    3.2 试验方法第47-48页
        3.2.1 单细胞悬液的制备第47页
        3.2.2 单细胞凝胶电泳实验第47-48页
        3.2.3 分析与统计第48页
    3.3 试验结果分析与讨论第48-55页
        3.3.1 石油烃对海胆细胞DNA损伤作用的检测结果分析第48-55页
        3.3.2 讨论第55页
    3.4 结论第55-57页
第4章 石油烃导致马粪海胆基因突变的SNPS检测分析第57-75页
    4.1 试验材料第57页
        4.1.1 试验动物第57页
        4.1.2 所用试验药品第57页
        4.1.3 仪器与设备第57页
    4.2 试验方法第57-62页
        4.2.1 药品的配制第57页
        4.2.2 总DNA的获得第57-58页
        4.2.3 试验所用引物和PCR反应第58-60页
        4.2.4 PAGE电泳第60-61页
        4.2.5 测序第61-62页
    4.3 实验结果第62-71页
        4.3.1 DNA检测第62页
        4.3.2 SNPS结果分析第62-65页
        4.3.3 PCR产物的测序结果第65-68页
        4.3.4 石油烃污染影响下基因突变率情况第68-71页
    4.4 讨论第71-75页
        4.4.1 用SNPS方法解决三种基因突变第71页
        4.4.2 利用经典的酚-仿抽提提取DNA和摸索SNPS最佳的反应条件第71-72页
        4.4.3 SPLOX基因的结果第72-73页
        4.4.4 WNT8基因的结果第73页
        4.4.5 HNF—6基因的结果第73-75页
第5章 石油烃对马粪海胆全基因组DNA甲基化的检测分析第75-85页
    5.1 试验材料第76页
        5.1.1 试验动物第76页
        5.1.2 试剂与药品第76页
        5.1.3 主要仪器与设备第76页
    5.2 试验方法第76-78页
        5.2.1 石油烃的制备第76页
        5.2.2 毒性试验第76页
        5.2.3 总DNA的获得第76-77页
        5.2.4 总DNA甲基化的测定第77页
        5.2.5 数据处理第77-78页
    5.3 结果与讨论第78-82页
        5.3.1 试验条件的摸索及优化第78-80页
        5.3.2 绘制标准曲线第80-81页
        5.3.3 石油烃污染对马粪海胆全基因组DNA甲基化水平的影响第81-82页
    5.4 讨论第82-83页
    5.5 结论第83-85页
第6章 石油烃对马粪海胆DNA损伤的RAPD分析第85-103页
    6.1 试验材料第85页
        6.1.1 试验动物第85页
        6.1.2 试验试剂第85页
        6.1.3 主要仪器设备第85页
    6.2 试验方法第85-86页
        6.2.1 马粪海胆DNA的提取第85页
        6.2.2 DNA的检测第85-86页
        6.2.3 RAPD反应体系的优化第86页
        6.2.4 数据处理第86页
    6.3 试验结果分析与讨论第86-96页
        6.3.1 DNA检测第86-87页
        6.3.2 PCR反应程序第87页
        6.3.3 RAPD反应体系的优化与建立第87-91页
        6.3.4 RAPD结果的分析第91-93页
        6.3.5 讨论第93-96页
    6.4 结论第96-97页
    6.5 石油烃对马粪海胆DNA损伤的RAPD分析第97页
        6.5.1 试验动物第97页
        6.5.2 培养方法第97页
    6.6 试验试剂第97页
    6.7 试验方法第97页
    6.8 试验结果分析与讨论第97-102页
        6.8.1 实验结果分析第97-100页
        6.8.2 讨论第100-102页
    6.9 结论第102-103页
第7章 总结与展望第103-106页
    7.1 全文结论第103-105页
    7.2 展望第105-106页
参考文献第106-118页
附录第118-119页
攻读学位期间公开发表论文第119-120页
致谢第120-121页
作者简介第121页

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