创新点摘要 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第13-36页 |
1.1 石油污染对海洋生态环境的影响 | 第13-16页 |
1.1.1 海洋石油污染近况 | 第13-15页 |
1.1.2 石油在海洋中的残留 | 第15页 |
1.1.3 油污染对海洋环境的影响 | 第15-16页 |
1.2 油污染对模式生物的毒理学研究现状 | 第16-31页 |
1.2.1 油污染对模式生物毒性效应研究 | 第17-19页 |
1.2.2 油污染对模式生物毒性效应的检测方法研究进展 | 第19-27页 |
1.2.3 毒理学技术研究现状及存在的问题分析 | 第27-31页 |
1.3 研究的目的、意义、内容和技术路线 | 第31-36页 |
1.3.1 选题的来源及研究目的、意义 | 第31-34页 |
1.3.2 试验内容 | 第34-35页 |
1.3.3 技术流程 | 第35-36页 |
第2章 石油烃对马粪海胆胚胎四种酶活性的影响 | 第36-46页 |
2.1 试验材料与方法 | 第36页 |
2.1.1 试验生物 | 第36页 |
2.1.2 药品和仪器 | 第36页 |
2.2 试验方法 | 第36-38页 |
2.2.1 试验中溶液的制备 | 第36页 |
2.2.2 催产和毒性暴露试验 | 第36-37页 |
2.2.3 酶测定的方法 | 第37-38页 |
2.3 实验结果和讨论 | 第38-43页 |
2.3.1 胚胎发育的情况 | 第38页 |
2.3.2 石油烃对胚胎发育的影响 | 第38-39页 |
2.3.3 石油经对海胆胚胎4种酶的影响 | 第39-43页 |
2.4 结论 | 第43-46页 |
第3章 石油烃对马粪海胆DNA损伤的SCGE检测 | 第46-57页 |
3.1 试验材料 | 第46-47页 |
3.1.1 试验动物的培养 | 第46页 |
3.1.2 试剂 | 第46页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第46-47页 |
3.2 试验方法 | 第47-48页 |
3.2.1 单细胞悬液的制备 | 第47页 |
3.2.2 单细胞凝胶电泳实验 | 第47-48页 |
3.2.3 分析与统计 | 第48页 |
3.3 试验结果分析与讨论 | 第48-55页 |
3.3.1 石油烃对海胆细胞DNA损伤作用的检测结果分析 | 第48-55页 |
3.3.2 讨论 | 第55页 |
3.4 结论 | 第55-57页 |
第4章 石油烃导致马粪海胆基因突变的SNPS检测分析 | 第57-75页 |
4.1 试验材料 | 第57页 |
4.1.1 试验动物 | 第57页 |
4.1.2 所用试验药品 | 第57页 |
4.1.3 仪器与设备 | 第57页 |
4.2 试验方法 | 第57-62页 |
4.2.1 药品的配制 | 第57页 |
4.2.2 总DNA的获得 | 第57-58页 |
4.2.3 试验所用引物和PCR反应 | 第58-60页 |
4.2.4 PAGE电泳 | 第60-61页 |
4.2.5 测序 | 第61-62页 |
4.3 实验结果 | 第62-71页 |
4.3.1 DNA检测 | 第62页 |
4.3.2 SNPS结果分析 | 第62-65页 |
4.3.3 PCR产物的测序结果 | 第65-68页 |
4.3.4 石油烃污染影响下基因突变率情况 | 第68-71页 |
4.4 讨论 | 第71-75页 |
4.4.1 用SNPS方法解决三种基因突变 | 第71页 |
4.4.2 利用经典的酚-仿抽提提取DNA和摸索SNPS最佳的反应条件 | 第71-72页 |
4.4.3 SPLOX基因的结果 | 第72-73页 |
4.4.4 WNT8基因的结果 | 第73页 |
4.4.5 HNF—6基因的结果 | 第73-75页 |
第5章 石油烃对马粪海胆全基因组DNA甲基化的检测分析 | 第75-85页 |
5.1 试验材料 | 第76页 |
5.1.1 试验动物 | 第76页 |
5.1.2 试剂与药品 | 第76页 |
5.1.3 主要仪器与设备 | 第76页 |
5.2 试验方法 | 第76-78页 |
5.2.1 石油烃的制备 | 第76页 |
5.2.2 毒性试验 | 第76页 |
5.2.3 总DNA的获得 | 第76-77页 |
5.2.4 总DNA甲基化的测定 | 第77页 |
5.2.5 数据处理 | 第77-78页 |
5.3 结果与讨论 | 第78-82页 |
5.3.1 试验条件的摸索及优化 | 第78-80页 |
5.3.2 绘制标准曲线 | 第80-81页 |
5.3.3 石油烃污染对马粪海胆全基因组DNA甲基化水平的影响 | 第81-82页 |
5.4 讨论 | 第82-83页 |
5.5 结论 | 第83-85页 |
第6章 石油烃对马粪海胆DNA损伤的RAPD分析 | 第85-103页 |
6.1 试验材料 | 第85页 |
6.1.1 试验动物 | 第85页 |
6.1.2 试验试剂 | 第85页 |
6.1.3 主要仪器设备 | 第85页 |
6.2 试验方法 | 第85-86页 |
6.2.1 马粪海胆DNA的提取 | 第85页 |
6.2.2 DNA的检测 | 第85-86页 |
6.2.3 RAPD反应体系的优化 | 第86页 |
6.2.4 数据处理 | 第86页 |
6.3 试验结果分析与讨论 | 第86-96页 |
6.3.1 DNA检测 | 第86-87页 |
6.3.2 PCR反应程序 | 第87页 |
6.3.3 RAPD反应体系的优化与建立 | 第87-91页 |
6.3.4 RAPD结果的分析 | 第91-93页 |
6.3.5 讨论 | 第93-96页 |
6.4 结论 | 第96-97页 |
6.5 石油烃对马粪海胆DNA损伤的RAPD分析 | 第97页 |
6.5.1 试验动物 | 第97页 |
6.5.2 培养方法 | 第97页 |
6.6 试验试剂 | 第97页 |
6.7 试验方法 | 第97页 |
6.8 试验结果分析与讨论 | 第97-102页 |
6.8.1 实验结果分析 | 第97-100页 |
6.8.2 讨论 | 第100-102页 |
6.9 结论 | 第102-103页 |
第7章 总结与展望 | 第103-106页 |
7.1 全文结论 | 第103-105页 |
7.2 展望 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-118页 |
附录 | 第118-119页 |
攻读学位期间公开发表论文 | 第119-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
作者简介 | 第121页 |