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基于生物矿化提高蛋白质稳定性的研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 绪论第14-42页
    1.1 引言第14页
    1.2 生物矿化第14-26页
        1.2.1 天然生物矿物第14-18页
            1.2.1.1 钙化矿物第15-16页
            1.2.1.2 非钙化矿物第16-18页
        1.2.2 仿生矿化第18-21页
            1.2.2.1 模板作用第18-20页
            1.2.2.2 有限反应空间作用第20页
            1.2.2.3 非经典结晶第20-21页
            1.2.2.4 电场、磁场下的结晶过程第21页
        1.2.3 仿生矿化用于生命体的改造第21-26页
            1.2.3.1 细胞的仿生矿化第22-24页
            1.2.3.2 病毒的仿生矿化第24-26页
    1.3 蛋白质第26-40页
        1.3.1 蛋白质的结构和功能第26-30页
            1.3.1.1 蛋白质的结构第26-29页
            1.3.1.2 蛋白质的功能第29-30页
            1.3.1.3 蛋白质结构与功能的关系第30页
        1.3.2 蛋白质的应用第30-32页
        1.3.3 蛋白质的稳定性及提高策略第32-40页
            1.3.3.1 蛋白质的稳定性第32-33页
            1.3.3.2 提高蛋白质稳定性的现有策略第33-40页
    1.4 本论文的研究思路和目标第40-42页
第二章 磷酸钙矿化提商蛋白质热稳定性第42-58页
    2.1 前言第42-43页
    2.2 材料与方法第43-46页
        2.2.1 实验材料第43-44页
        2.2.2 蛋白质的原位矿化第44页
        2.2.3 金纳米颗粒标记蛋白第44页
        2.2.4 矿化蛋白的表征第44-45页
        2.2.5 过氧化氢酶活性测定第45页
        2.2.6 溶菌酶活性测定第45页
        2.2.7 蛋白质的热稳定性研究第45页
        2.2.8 蛋白质的结构稳定性研究第45-46页
        2.2.9 蛋白质的氢键交换研究第46页
        2.2.10 无定形磷酸钙中结构水的研究第46页
    2.3 实验结果与讨论第46-57页
        2.3.1 蛋白质的原位矿化第46-49页
        2.3.2 矿化蛋白的热稳定性第49页
        2.3.3 不同矿化方法对蛋白质热稳定性的影响第49-50页
        2.3.4 矿化蛋白的结构稳定性第50-52页
        2.3.5 无定形相的重要性第52-54页
        2.3.6 无定形相中结构水的作用第54-57页
    2.4 本章小结第57-58页
第三章 仿生硅矿化提商蛋白质稳定性第58-73页
    3.1 前言第58-60页
    3.2 材料与方法第60-62页
        3.2.1 实验材料第60页
        3.2.2 Fe_3O_4@C纳米颗粒的合成第60页
        3.2.3 蛋白质的化学修饰第60-61页
        3.2.4 蛋白质的原位硅矿化第61页
        3.2.5 酶活性测试第61页
        3.2.6 蛋白质的温度适用范围第61-62页
        3.2.7 蛋白质的热稳定性第62页
        3.2.8 蛋白质的有机溶剂耐受力第62页
        3.2.9 样品表征第62页
    3.3 结果与讨论第62-72页
        3.3.1 蛋白质的原位硅矿化策略第62-63页
        3.3.2 Fe_3O_4@C纳米颗粒的合成第63-64页
        3.3.3 蛋白质的PEI修饰及吸附第64-66页
        3.3.4 蛋白质的原位硅矿化第66-68页
        3.3.5 蛋白质的矿化率第68-69页
        3.3.6 矿化GOD的稳定性研究第69-70页
        3.3.7 矿化HRP的稳定性研究第70-72页
    3.4 本章小结第72-73页
第四章 四氧化三铁-矿化蛋白纳米复合物用于葡萄糖检测第73-87页
    4.1 前言第73-74页
    4.2 材料与方法第74-77页
        4.2.1 实验材料第74-75页
        4.2.2 Fe_3O_4@C-GOD-SiO_2纳米复合物的制备和表征第75页
        4.2.3 Fe_3O_4@C纳米颗粒的类过氧化物酶活性第75页
        4.2.4 Fe_3O_4@C纳米颗粒测定过氧化氢条件优化第75页
        4.2.5 Fe_3O_4@C纳米颗粒在不同pH下的溶解度第75-76页
        4.2.6 矿化葡萄糖氧化酶在不同pH下的稳定性第76页
        4.2.7 Fe_3O_4@C-GOD-SiO_2纳米复合物检测葡萄糖第76页
        4.2.8 底物专一性研究第76页
        4.2.9 可循环性研究第76-77页
    4.3 结果与讨论第77-85页
        4.3.1 Fe_3O_4@C纳米颗粒的类过氧化物酶性质第77页
        4.3.2 Fe_3O_4@C纳米颗粒的类过氧化物酶催化条件优化第77-79页
        4.3.3 Fe_3O_4@C纳米颗粒用于过氧化氢的检测第79-80页
        4.3.4 Fe_3O_4@C纳米颗粒的类酶静态动力学研究第80-81页
        4.3.5 矿化葡萄糖氧化酶在不同pH下的相对活性第81-82页
        4.3.6 Fe_3O_4@C-GOD-SiO_2纳米复合物用于葡萄糖检测第82-83页
        4.3.7 底物专一性第83-84页
        4.3.8 可循环性第84-85页
    4.4 本章小结第85-87页
第五章 结论与展望第87-90页
参考文献第90-113页
附录 缩略词表第113-115页
作者简介及攻读博士学位期间主要研究成果第115页

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