摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号与缩略语说明 | 第9-13页 |
1 绪论 | 第13-20页 |
1.1 扁桃酸研究状况 | 第13-15页 |
1.1.1 手性物质 | 第13-14页 |
1.1.2 手性扁桃酸 | 第14页 |
1.1.3 手性扁桃酸的制备 | 第14-15页 |
1.2 生物酶法拆分技术 | 第15-16页 |
1.2.1 生物酶法拆分的概念和特点 | 第15页 |
1.2.2 R-扁桃酸脱氢酶 | 第15-16页 |
1.3 NAD~+的再生 | 第16-18页 |
1.3.1 化学法再生NAD~+ | 第16页 |
1.3.2 电化学法再生NAD~+ | 第16页 |
1.3.3 光化学法再生NAD~+ | 第16-17页 |
1.3.4 酶法再生NAD~+ | 第17-18页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第18-20页 |
2 R-扁桃酸脱氢酶的提取及其酶学性质的研究 | 第20-36页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验试剂与材料 | 第20-22页 |
2.2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2.3 实验仪器与设备 | 第21页 |
2.2.4 培养基 | 第21页 |
2.2.5 菌种保藏方法 | 第21-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-29页 |
2.3.1 目的菌株的筛选及16S rDNA鉴定 | 第22页 |
2.3.2 菌体形态的电子显微镜观察 | 第22页 |
2.3.3 RMDH的提取与纯化 | 第22-23页 |
2.3.4 酶活及蛋白含量的测定 | 第23-25页 |
2.3.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第25-26页 |
2.3.6 RMDH酶学性质的测定 | 第26-29页 |
2.4 实验结果 | 第29-35页 |
2.4.1 产RMDH菌株透射电子显微镜观察 | 第29页 |
2.4.2 RMDH分离纯化结果 | 第29-31页 |
2.4.3 RMDH酶学性质 | 第31-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
3 NADH脱氢酶与漆酶偶联进行NAD~+循环的研究 | 第36-48页 |
3.1 引言 | 第36-37页 |
3.2 实验试剂与材料 | 第37页 |
3.2.1 实验试剂 | 第37页 |
3.2.2 实验材料 | 第37页 |
3.2.3 培养基 | 第37页 |
3.2.4 菌种保藏方法 | 第37页 |
3.3 实验方法 | 第37-42页 |
3.3.1 目的菌株的筛选及16S rDNA鉴定 | 第37-38页 |
3.3.2 测定NADH及NAD~+的标准曲线 | 第38页 |
3.3.3 NADH脱氢酶的提取与纯化 | 第38-39页 |
3.3.4 漆酶的提取与纯化 | 第39页 |
3.3.5 酶活的测定 | 第39-40页 |
3.3.6 NADH脱氢酶酶学性质的测定 | 第40-41页 |
3.3.7 NADH脱氢酶与漆酶的偶联 | 第41-42页 |
3.4 结果与讨论 | 第42-47页 |
3.4.1 NADH及NAD~+标准曲线 | 第42-43页 |
3.4.2 NADH脱氢酶酶学性质 | 第43-45页 |
3.4.3 NADH脱氢酶与漆酶偶联最适pH与最适温度及双酶在最适条件下稳定性 | 第45-46页 |
3.4.4 双酶偶联催化生成NAD~+ | 第46-47页 |
3.5 本章小结 | 第47-48页 |
4 RMDH与NADH脱氢酶的偶联 | 第48-53页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 实验试剂与材料 | 第48-49页 |
4.2.1 实验试剂 | 第48-49页 |
4.2.2 实验材料 | 第49页 |
4.3 实验方法 | 第49-50页 |
4.3.1 测定扁桃酸,苯乙酮酸的标准曲线 | 第49页 |
4.3.2 RMDH与NADH脱氢酶偶联实验 | 第49-50页 |
4.4 结果与讨论 | 第50-51页 |
4.4.1 扁桃酸,苯乙酮酸的标准曲线 | 第50页 |
4.4.2 双酶偶联最适反应pH | 第50-51页 |
4.4.3 双酶偶联最适反应温度 | 第51页 |
4.5 本章小结 | 第51-53页 |
5 结论、问题与展望 | 第53-55页 |
5.1 结论 | 第53页 |
5.2 问题 | 第53-54页 |
5.3 展望 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62页 |