摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
Chapter 1. Introduction | 第13-24页 |
1.1 Ovulation and Luteinization | 第13-14页 |
1.2 Post-Transcriptional Gene Regulation | 第14-15页 |
1.3 Post-Transcriptional Gene Regulation in the Ovary | 第15-16页 |
1.4 MicroRNA | 第16页 |
1.5 MicroRNA Biogenesis | 第16-18页 |
1.6 Mechanisms of Action | 第18-20页 |
1.7 Naming microRNA | 第20-21页 |
1.8 MicroRNA Functions | 第21页 |
1.9 MicroRNA in the Ovary | 第21-23页 |
1.10 Conclusion and hypothesis | 第23-24页 |
Chapter 2. Identification of miRNAs during mouse postnatal ovarian development andsuperovulation | 第24-56页 |
2.1 Introduction | 第24-27页 |
2.2 Material and Methods | 第27-31页 |
2.2.1 Animals | 第27-28页 |
2.2.2 Chemicals | 第28-29页 |
2.2.3 RNA extraction | 第29-30页 |
2.2.4 Small RNA library construction and deep sequencing | 第30页 |
2.2.5 Bioinformatics analysis and statistics | 第30-31页 |
2.2.6 Differential expression analysis | 第31页 |
2.2.7 Statistical analysis | 第31页 |
2.3 Results | 第31-48页 |
2.3.1 Sequence analysis of small RNAs in mouse ovary | 第31-35页 |
2.3.2 Differentially expressed miRNAs during postnatal development and superovulation in mouse ovaries | 第35-37页 |
2.3.3 Novel miRNAs | 第37-41页 |
2.3.4 Putative target genes of differentially expressed MicroRNA | 第41-43页 |
2.3.5 Gene ontology and Pathway annotation | 第43-48页 |
2.4 Discussion | 第48-55页 |
2.5 Conclusion | 第55-56页 |
Chapter 3. MicroRNA-484 mediated post transcriptional gene regulation in mousegranulosa cells | 第56-74页 |
3.1 Introduction | 第56-58页 |
3.2 Materials and Methods | 第58-60页 |
3.2.1 Main reagents | 第58页 |
3.2.2 Main solutionsandbuffers | 第58-59页 |
3.2.3 Main equipments | 第59-60页 |
3.3 Methodology | 第60-67页 |
3.3.1 Animals treatment and cell culture | 第60页 |
3.3.2 Cells transfection with microRNA-484 mimics and Inhibitors | 第60-61页 |
3.3.3 RNA extraction | 第61-63页 |
3.3.4 Removal of genomic DNA from RNA | 第63页 |
3.3.5 miRNA RT-PCR | 第63-64页 |
3.3.6 Bioinformatics analysis | 第64-65页 |
3.3.7 Total RNA cDNA Synthesis | 第65-66页 |
3.3.8 Quantitative RT-PCR (qRT-PCR) | 第66-67页 |
3.3.9 Statistical Analysis | 第67页 |
3.4 Results | 第67-72页 |
3.4.1 MicroRNA-484 (miR-484) | 第67-68页 |
3.4.2 Expression pattern of miR-484 | 第68-70页 |
3.4.3 Knock Down of miR-484 | 第70-71页 |
3.4.4 Over expression of miR-484 | 第71-72页 |
3.5 Discussion and conclusion | 第72-74页 |
Chapter 4. Conclusion and future prospects | 第74-76页 |
Chapter 5. References | 第76-95页 |
The papers published during PhD | 第95-96页 |
List of Figures | 第96-97页 |
List of tables | 第97-98页 |
Acknowledgement | 第98-100页 |