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杨树连作障碍土壤生物修复功能菌的研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-30页
    1.1 植物的连作障碍及其防治第14-20页
        1.1.1 造成连作障碍的原因第14-18页
            1.1.1.1 植物的化感作用第14-16页
            1.1.1.2 土壤性状的改变第16-17页
            1.1.1.3 微生物种群的变化第17-18页
        1.1.2 连作障碍的防治第18-20页
            1.1.2.1 合理配置土壤质地第18页
            1.1.2.2 合理轮作与套作第18-19页
            1.1.2.3 加强田间管理第19-20页
    1.2 微生物肥料的研究与应用概况第20-27页
        1.2.1 微生物肥料的发展历史第20-22页
        1.2.2 微生物肥料的分类第22-23页
        1.2.3 微生物肥料的作用机制第23-25页
            1.2.3.1 改善土壤结构和肥力第23-24页
            1.2.3.2 调节土壤中微生物种群及数量第24页
            1.2.3.3 产生植物激素类物质第24页
            1.2.3.4 增强植物抗逆性第24页
            1.2.3.5 抑制病害第24-25页
            1.2.3.6 减少化肥、农药的施用量第25页
        1.2.4 微生物肥料的应用第25-27页
            1.2.4.1 在蔬菜上的应用第25-26页
            1.2.4.2 在果树上的应用第26页
            1.2.4.3 在经济作物上的应用第26页
            1.2.4.4 在观赏植物上的应用第26-27页
    1.3 微生物在植物根际及体内定殖规律的研究方法第27-28页
        1.3.1 抗生素标记法第27页
        1.3.2 免疫学方法第27-28页
        1.3.3 基因标记法第28页
        1.3.4 特异性寡核苷酸片段标记法第28页
    1.4 本研究的目的及意义第28-30页
2 材料与方法第30-44页
    2.1 材料第30-32页
        2.1.1 材料来源第30页
        2.1.2 微生物分离培养基第30页
        2.1.3 引物第30-31页
        2.1.4 主要软件第31页
        2.1.5 主要药品试剂第31页
        2.1.6 主要仪器第31-32页
    2.2 方法第32-44页
        2.2.1 杨树根际促生菌、苯甲酸降解菌和内生拮抗菌的分离第32-33页
        2.2.2 杨树根际促生细菌的生物活力测定第33-34页
            2.2.2.1 固氮细菌的固氮酶活力测定第33页
            2.2.2.2 解磷细菌的解磷能力测定第33页
            2.2.2.3 解钾细菌的解钾能力测定第33-34页
            2.2.2.4 拮抗菌的拮抗能力测定第34页
        2.2.3 杨树根际苯甲酸降解菌的降解能力和底物特异性测定第34页
        2.2.4 内生拮抗细菌的拮抗能力测定第34页
        2.2.5 杨树根际细菌及内生菌的定殖能力的测定第34-35页
            2.2.5.1 杨树根际细菌及内生菌的双抗生素筛选及稳定性检测第34-35页
            2.2.5.2 杨树根际细菌及内生细菌的灌根及回收试验第35页
        2.2.6 可定殖菌株的相互拮抗试验第35页
        2.2.7 可定殖菌株的菌体形态观察及生理生化指标测定第35-39页
            2.2.7.1 菌体及菌落形态观察第36页
            2.2.7.2 葡萄糖氧化发酵试验第36页
            2.2.7.3 需氧性测定试验第36页
            2.2.7.4 硝酸盐还原试验第36-37页
            2.2.7.5 接触酶试验第37页
            2.2.7.6 耐盐性试验第37页
            2.2.7.7 二乙酰测定(V-P测定)第37页
            2.2.7.8 淀粉水解试验第37页
            2.2.7.9 甲基红试验第37-38页
            2.2.7.10 明胶液化试验第38页
            2.2.7.11 氮源利用试验第38页
            2.2.7.12 碳源利用试验第38页
            2.2.7.13 柠檬酸盐利用试验第38页
            2.2.7.14 苯丙氨基酸脱氨酶试验第38-39页
        2.2.8 可定殖菌株的16S rRNA序列同源性分析第39页
            2.2.8.1 16S rRNA片断的扩增第39页
            2.2.8.2 DNA纯化第39页
            2.2.8.3 16S rRNA序列分析第39页
        2.2.9 各菌株菌体发酵最佳培养基优化第39-40页
        2.2.10 拮抗菌诱导系统抗性的研究第40页
            2.2.10.1 杨树叶片中过氧化物酶(POD)活性测定第40页
            2.2.10.2 杨树叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活力测定第40页
        2.2.11 苯甲酸降解菌对酚酸危害的解除试验第40-42页
        2.2.12 杨树连作障碍土壤微生物修复剂的研制第42页
            2.2.12.1 菌体的扩大培养及收集第42页
            2.2.12.2 菌剂的制备第42页
        2.2.13 盆栽试验第42-44页
            2.2.13.1 连作土壤的制备第42页
            2.2.13.2 菌剂的施用第42-43页
            2.2.13.3 使用效果检验第43-44页
3 结果与分析第44-64页
    3.1 杨树根际促生菌、苯甲酸降解菌和内生拮抗菌的分离结果第44页
    3.2 杨树根际促生细菌的生物活力测定结果第44-47页
        3.2.1 固氮细菌的固氮酶活性的测定结果第44页
        3.2.2 解有机磷细菌的解磷能力测定结果第44-45页
        3.2.3 解无机磷细菌的解磷能力测定结果第45-46页
        3.2.4 解钾细菌的解钾能力测定结果第46-47页
        3.2.5 拮抗菌的拮抗能力测定结果第47页
    3.3 苯甲酸降解菌的降解能力测定结果第47-49页
    3.4 内生拮抗菌的拮抗能力测定结果第49页
    3.5 各菌株在杨树根际及体内的定殖试验结果第49-50页
    3.6 定殖菌株的相互拮抗试验结果第50-51页
    3.7 杨树根际细菌及内生菌的鉴定结果第51-58页
        3.7.1 菌体形态及生理生化特性第51页
        3.7.2 16S rRNA序列及同源性分析第51-58页
    3.8 可定殖菌株菌体发酵培养基的优化结果第58-59页
    3.9 内生拮抗菌的诱导系统抗病性作用第59-60页
        3.9.1 杨树叶片中过氧化物酶(POD)活性测定结果第59-60页
        3.9.2 杨树叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定结果第60页
    3.10 苯甲酸降解菌对酚酸危害的解除第60页
    3.11 杨树连作障碍土壤微生物修复剂对杨树生长的促进作用第60-61页
    3.12 杨树连作障碍土壤微生物修复剂对杨树根际微生物数量的影响第61-64页
4 讨论第64-71页
    4.1 土壤微生物的分离第64页
    4.2 根际促生细菌生物活力的测定第64-67页
        4.2.1 固氮细菌的固氮酶活性测定第64-65页
        4.2.2 解磷细菌的解磷能力测定第65页
        4.2.3 解钾细菌的解钾能力测定第65-66页
        4.2.4 拮抗细菌的拮抗能力测定第66-67页
    4.3 细菌的鉴定第67-68页
    4.4 细菌的根际定殖规律第68-69页
    4.5 微生物肥料的制备第69-70页
    4.6 微生物肥料的应用效果第70-71页
5 结论第71-74页
    5.0 杨树根际细菌及内生菌的分离筛选第71页
    5.1 杨树根际细菌及内生菌的生物活力测定第71页
    5.2 杨树根际细菌及内生菌的定殖第71页
    5.3 可定殖细菌的鉴定第71-72页
    5.4 可定殖细菌菌体发酵最佳产培养基的优化第72页
    5.5 拮抗细菌诱导系统抗性作用第72页
    5.6 杨树连作障碍土壤微生物修复剂对杨树根际微生物数量的影响第72页
    5.7 杨树连作障碍土壤微生物修复剂对杨树的促生作用第72-73页
    5.8 关于进一步研究的设想第73-74页
参考文献第74-82页
附录一 SAS 9.0统计分析软件中的ANOVA分析程序第82-83页
附录二 解有机磷细菌培养48h后的浑浊圈第83-84页
附录三 解无机磷细菌培养72h后的透明圈第84-85页
附录四 根际及内生拮抗菌的拮抗效果第85-87页
附录五 根际及内生菌的16S rRNA序列第87-91页
致谢第91-92页
硕士期间发表的论文第92页

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