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异位表达一个多梳蛋白(PcG)基因影响拟南芥开花时间

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
ABBREVIATIONS第8-14页
第一部分 文献综述第14-44页
    1 植物发育过程中的时期转换第14-16页
        1.1 植物的发育时期第14页
        1.2 植物发育的时期转换第14-16页
            1.2.1 从幼年发育时期向成熟期的转换第14-16页
            1.2.2 从成熟期向生殖生长期的转换第16页
    2 植物开花的重要性及开花时间调控第16-30页
        2.1 植物开花的重要性第16-17页
        2.2 拟南芥开花时间调控机理第17-30页
            2.2.1 光周期途径第18-21页
                2.2.1.1 光受体第19页
                2.2.1.2 生物节律钟第19-20页
                2.2.1.3 光信号与生物钟信号的整合第20-21页
            2.2.2 GA途径第21-22页
            2.2.3 春化途径第22-25页
            2.2.4 自主途径第25-27页
            2.2.5 PAF1蛋白复合体途径第27-28页
            2.2.6 影响开花的其他因素第28-30页
    3 FLC做为开花关键抑制因子在植物开花过程中的作用第30-35页
        3.1 FLC基因表达的正调节第30-33页
            3.1.1 H3K4三甲基化修饰与冬季型拟南芥的晚花表型第30-32页
            3.1.2 H3K4三甲基化修饰与ATP依赖的核小体重组第32页
            3.1.3 H3K36甲基化修饰与FLC表达和开花发育第32-33页
        3.2 FLC基因表达的负调节第33-35页
            3.2.1 siRNA介导的组蛋白H3K9甲基化抑制FLC的表达第33-34页
            3.2.2 春化作用通过改变染色质修饰抑制FLC的表达第34-35页
            3.2.3 组蛋白精氨酸的甲基化也参与抑制FLC基因的表达第35页
    4 PcG蛋白与表观遗传学修饰第35-44页
        4.1 表观遗传学及研究内容第35-37页
        4.2 PcG蛋白第37-44页
            4.2.1 PcG蛋白分类第37-39页
            4.2.2 PcG蛋白的生物学功能第39-40页
            4.2.3 植物细胞中的PcG蛋白第40-44页
                4.2.3.1 植物细胞中的PRC2蛋白复合体第40-42页
                4.2.3.2 植物中PRC1复合体第42-44页
第二部分 研究论文第44-94页
    1 引言第44-47页
    2 实验材料与方法第47-59页
        2.1 实验材料第47-48页
            2.1.1 植物材料第47页
            2.1.2 菌株和载体第47页
            2.1.3 相关分子生物学试剂和仪器第47页
            2.1.4 培养基第47-48页
            2.1.5 引物合成和DNA测序第48页
        2.2 实验方法第48-59页
            2.2.1 拟南芥的种植第48页
            2.2.2 T-DNA插入突变体的鉴定第48-51页
                2.2.2.1 DNA水平鉴定第48-49页
                2.2.2.2 转录本的鉴定第49-51页
            2.2.3 质粒构建第51-53页
                2.2.3.1 碱裂解法小量提取质粒DNA第51-52页
                2.2.3.2 CaCl2法大肠杆菌感受态细胞的制备第52页
                2.2.3.3 细菌转化第52-53页
            2.2.4 拟南芥的遗传转化与筛选第53-55页
                2.2.4.1 制备农杆菌感受态细胞第53页
                2.2.4.2 农杆菌的转化及鉴定第53-54页
                2.2.4.3 拟南芥受体材料选择第54页
                2.2.4.4 浸花法转化拟南芥第54页
                2.2.4.5 拟南芥转基因植株筛选第54-55页
            2.2.5 半定量RT-PCR检测基因表达水平第55页
            2.2.6 Real-time PCR第55-56页
            2.2.7 YFP激光共聚焦观察第56-57页
            2.2.8 叶片透明化处理第57页
            2.2.9 载体构建信息和PCR引物序列信息第57-59页
    3 实验结果与分析第59-88页
        3.1 拟南芥BML基因的序列比对第59-60页
        3.2 拟南芥BML1基因表达模式分析第60-61页
        3.3 拟南芥BML1突变体鉴定第61-65页
            3.3.1 BML1突变体基因型鉴定及转录本分析第62-63页
            3.3.2 BML1 amiRNA转基因植株的鉴定与表型分析第63-65页
        3.4 BML1超表达植株表型分析第65-86页
            3.4.1 超表达BML1基因导致植物早花第65-74页
                3.4.1.1 35S::BML1-YFP/WT超表达植株鉴定及早花表型分析第65-69页
                3.4.1.2 AP1::BML1-GFP/WT超表达植株表型分析第69-73页
                3.4.1.3 BML1基因自身启动子驱动的基因超表达植株表型分析第73-74页
            3.4.2 转基因植株早花表型与FLC表达水平的关系第74-77页
                3.4.2.1 35S::BML1-YFP/WT超表达植株中FLC的表达量下调第74-75页
                3.4.2.2 35S::BML1-YFP/WT超表达植株中FT表达水平检测第75-76页
                3.4.2.3 AP1::BML1-YFP/WT超表达植株中FLC表达水平下调和FT的表达量上调第76-77页
            3.4.3 SUC2及KNAT1启动子驱动的BML1转基因植株早花表型分析第77-78页
            3.4.4 BML1基因超表达导致其它发育缺陷第78-86页
                3.4.4.1 超表达BML1基因改变叶片形状发生第78-83页
                3.4.4.2 BML1基因超表达导致植物出现终端花的表型第83-84页
                3.4.4.3 BML1转基因植株的株型发生变化第84-85页
                3.4.4.4 AP1::BML1-GFP/WT转基因植株的种子大小及萌发率第85-86页
        3.5 拟南芥BML1蛋白的亚细胞定位第86-88页
    4 讨论第88-93页
        4.1 BML1基因的异位表达可导致植物开花时间提前第88-89页
        4.2 BML1基因的异位表达导致植物叶片及其它发育缺陷第89-90页
        4.3 在野生型植物中超表达BML1基因抑制了开花关键基因FLC的表达第90-91页
        4.4 BML1蛋白可能是植物PcG蛋白PRC复合体中的一个组分第91-93页
    5 结论第93-94页
参考文献第94-115页
个人简历第115-116页
致谢第116-117页

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