摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
ABBREVIATIONS | 第8-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-44页 |
1 植物发育过程中的时期转换 | 第14-16页 |
1.1 植物的发育时期 | 第14页 |
1.2 植物发育的时期转换 | 第14-16页 |
1.2.1 从幼年发育时期向成熟期的转换 | 第14-16页 |
1.2.2 从成熟期向生殖生长期的转换 | 第16页 |
2 植物开花的重要性及开花时间调控 | 第16-30页 |
2.1 植物开花的重要性 | 第16-17页 |
2.2 拟南芥开花时间调控机理 | 第17-30页 |
2.2.1 光周期途径 | 第18-21页 |
2.2.1.1 光受体 | 第19页 |
2.2.1.2 生物节律钟 | 第19-20页 |
2.2.1.3 光信号与生物钟信号的整合 | 第20-21页 |
2.2.2 GA途径 | 第21-22页 |
2.2.3 春化途径 | 第22-25页 |
2.2.4 自主途径 | 第25-27页 |
2.2.5 PAF1蛋白复合体途径 | 第27-28页 |
2.2.6 影响开花的其他因素 | 第28-30页 |
3 FLC做为开花关键抑制因子在植物开花过程中的作用 | 第30-35页 |
3.1 FLC基因表达的正调节 | 第30-33页 |
3.1.1 H3K4三甲基化修饰与冬季型拟南芥的晚花表型 | 第30-32页 |
3.1.2 H3K4三甲基化修饰与ATP依赖的核小体重组 | 第32页 |
3.1.3 H3K36甲基化修饰与FLC表达和开花发育 | 第32-33页 |
3.2 FLC基因表达的负调节 | 第33-35页 |
3.2.1 siRNA介导的组蛋白H3K9甲基化抑制FLC的表达 | 第33-34页 |
3.2.2 春化作用通过改变染色质修饰抑制FLC的表达 | 第34-35页 |
3.2.3 组蛋白精氨酸的甲基化也参与抑制FLC基因的表达 | 第35页 |
4 PcG蛋白与表观遗传学修饰 | 第35-44页 |
4.1 表观遗传学及研究内容 | 第35-37页 |
4.2 PcG蛋白 | 第37-44页 |
4.2.1 PcG蛋白分类 | 第37-39页 |
4.2.2 PcG蛋白的生物学功能 | 第39-40页 |
4.2.3 植物细胞中的PcG蛋白 | 第40-44页 |
4.2.3.1 植物细胞中的PRC2蛋白复合体 | 第40-42页 |
4.2.3.2 植物中PRC1复合体 | 第42-44页 |
第二部分 研究论文 | 第44-94页 |
1 引言 | 第44-47页 |
2 实验材料与方法 | 第47-59页 |
2.1 实验材料 | 第47-48页 |
2.1.1 植物材料 | 第47页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第47页 |
2.1.3 相关分子生物学试剂和仪器 | 第47页 |
2.1.4 培养基 | 第47-48页 |
2.1.5 引物合成和DNA测序 | 第48页 |
2.2 实验方法 | 第48-59页 |
2.2.1 拟南芥的种植 | 第48页 |
2.2.2 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第48-51页 |
2.2.2.1 DNA水平鉴定 | 第48-49页 |
2.2.2.2 转录本的鉴定 | 第49-51页 |
2.2.3 质粒构建 | 第51-53页 |
2.2.3.1 碱裂解法小量提取质粒DNA | 第51-52页 |
2.2.3.2 CaCl2法大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第52页 |
2.2.3.3 细菌转化 | 第52-53页 |
2.2.4 拟南芥的遗传转化与筛选 | 第53-55页 |
2.2.4.1 制备农杆菌感受态细胞 | 第53页 |
2.2.4.2 农杆菌的转化及鉴定 | 第53-54页 |
2.2.4.3 拟南芥受体材料选择 | 第54页 |
2.2.4.4 浸花法转化拟南芥 | 第54页 |
2.2.4.5 拟南芥转基因植株筛选 | 第54-55页 |
2.2.5 半定量RT-PCR检测基因表达水平 | 第55页 |
2.2.6 Real-time PCR | 第55-56页 |
2.2.7 YFP激光共聚焦观察 | 第56-57页 |
2.2.8 叶片透明化处理 | 第57页 |
2.2.9 载体构建信息和PCR引物序列信息 | 第57-59页 |
3 实验结果与分析 | 第59-88页 |
3.1 拟南芥BML基因的序列比对 | 第59-60页 |
3.2 拟南芥BML1基因表达模式分析 | 第60-61页 |
3.3 拟南芥BML1突变体鉴定 | 第61-65页 |
3.3.1 BML1突变体基因型鉴定及转录本分析 | 第62-63页 |
3.3.2 BML1 amiRNA转基因植株的鉴定与表型分析 | 第63-65页 |
3.4 BML1超表达植株表型分析 | 第65-86页 |
3.4.1 超表达BML1基因导致植物早花 | 第65-74页 |
3.4.1.1 35S::BML1-YFP/WT超表达植株鉴定及早花表型分析 | 第65-69页 |
3.4.1.2 AP1::BML1-GFP/WT超表达植株表型分析 | 第69-73页 |
3.4.1.3 BML1基因自身启动子驱动的基因超表达植株表型分析 | 第73-74页 |
3.4.2 转基因植株早花表型与FLC表达水平的关系 | 第74-77页 |
3.4.2.1 35S::BML1-YFP/WT超表达植株中FLC的表达量下调 | 第74-75页 |
3.4.2.2 35S::BML1-YFP/WT超表达植株中FT表达水平检测 | 第75-76页 |
3.4.2.3 AP1::BML1-YFP/WT超表达植株中FLC表达水平下调和FT的表达量上调 | 第76-77页 |
3.4.3 SUC2及KNAT1启动子驱动的BML1转基因植株早花表型分析 | 第77-78页 |
3.4.4 BML1基因超表达导致其它发育缺陷 | 第78-86页 |
3.4.4.1 超表达BML1基因改变叶片形状发生 | 第78-83页 |
3.4.4.2 BML1基因超表达导致植物出现终端花的表型 | 第83-84页 |
3.4.4.3 BML1转基因植株的株型发生变化 | 第84-85页 |
3.4.4.4 AP1::BML1-GFP/WT转基因植株的种子大小及萌发率 | 第85-86页 |
3.5 拟南芥BML1蛋白的亚细胞定位 | 第86-88页 |
4 讨论 | 第88-93页 |
4.1 BML1基因的异位表达可导致植物开花时间提前 | 第88-89页 |
4.2 BML1基因的异位表达导致植物叶片及其它发育缺陷 | 第89-90页 |
4.3 在野生型植物中超表达BML1基因抑制了开花关键基因FLC的表达 | 第90-91页 |
4.4 BML1蛋白可能是植物PcG蛋白PRC复合体中的一个组分 | 第91-93页 |
5 结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-115页 |
个人简历 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |