摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 小麦籽粒淀粉组分 | 第13-14页 |
1.1.1 直链淀粉 | 第13页 |
1.1.2 支链淀粉 | 第13-14页 |
1.2 淀粉合成同工酶及其与淀粉的关系 | 第14-18页 |
1.3 抗性淀粉研究进展 | 第18-19页 |
1.4 植物基因功能研究方法 | 第19-24页 |
1.4.1 RNAi的概述 | 第19-20页 |
1.4.2 VIGS的建立与发展 | 第20页 |
1.4.3 VIGS机制 | 第20-21页 |
1.4.4 VIGS影响因素 | 第21-22页 |
1.4.5 VIGS研究进展及其在小麦中的应用 | 第22-24页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-30页 |
2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第25页 |
2.1.1 试验材料 | 第25页 |
2.1.2 试验试剂 | 第25页 |
2.1.3 试验仪器 | 第25页 |
2.2 试验方法 | 第25-29页 |
2.2.1 小麦籽粒总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第25页 |
2.2.2 小麦各目的基因的克隆和测序 | 第25-26页 |
2.2.3 VIGS重组载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.4 VIGS载体的线性化及纯化 | 第27页 |
2.2.5 体外转录 | 第27-28页 |
2.2.6 接种 | 第28页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)检测 | 第28-29页 |
2.2.8 小麦籽粒直链淀粉和抗性淀粉含量的测定 | 第29页 |
2.2.9 叶绿素含量的测定 | 第29页 |
2.3 数据统计分析 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-40页 |
3.1 小麦穗部实施VIGS体系的优化 | 第30-36页 |
3.1.1 小麦籽粒总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第30页 |
3.1.2 小麦PDS基因的克隆和测序 | 第30-31页 |
3.1.3 VIGS重组载体的构建 | 第31页 |
3.1.4 VIGS载体的线性化 | 第31-32页 |
3.1.5 体外转录 | 第32页 |
3.1.6 接种试验 | 第32-36页 |
3.2 在小麦穗中诱导SBEⅡb基因沉默的研究 | 第36-40页 |
3.2.1 小麦 SBEⅡb 基因的克隆和测序 | 第36-37页 |
3.2.2 VIGS 重组载体的构建 | 第37页 |
3.2.3 VIGS 载体的线性化与体外转录 | 第37-38页 |
3.2.4 SBEⅡb 基因相对表达量的检测 | 第38页 |
3.2.5 直链淀粉和抗性淀粉含量的测定 | 第38-40页 |
第四章 讨论与结论 | 第40-45页 |
4.1 影响 BSMV-VIGS 的因素 | 第40-43页 |
4.1.1 寄主因素 | 第40-41页 |
4.1.2 载体因素 | 第41-42页 |
4.1.3 人为因素 | 第42-43页 |
4.2 BSMV-VIGS 诱导 SBEⅡb 基因沉默 | 第43页 |
4.3 BSMV-VIGS 应用展望 | 第43页 |
4.4 结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
导师评阅表 | 第54页 |