| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 代谢综合征的起源和胰岛素抵抗 | 第13-15页 |
| 1.1.1 代谢综合征 | 第13页 |
| 1.1.2 胰岛素抵抗 | 第13-15页 |
| 1.2 胰岛素抵抗的机制 | 第15-16页 |
| 1.2.1 胰岛素受体前水平的作用 | 第15页 |
| 1.2.2 胰岛素受体水平的作用 | 第15页 |
| 1.2.3 胰岛素受体后水平的作用 | 第15-16页 |
| 1.3 胰岛素抵抗模型 | 第16-18页 |
| 1.3.1 胰岛素抵抗动物模型 | 第16页 |
| 1.3.2 胰岛素抵抗细胞模型 | 第16-18页 |
| 1.4 改善胰岛素抵抗的生物活性物质 | 第18-20页 |
| 1.4.1 多糖类 | 第18页 |
| 1.4.2 活性肽类 | 第18页 |
| 1.4.3 皂苷类 | 第18-19页 |
| 1.4.4 黄酮类 | 第19页 |
| 1.4.5 挥发油和多酚类 | 第19页 |
| 1.4.6 其他 | 第19-20页 |
| 1.5 本论文研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 骨骼肌细胞的培养、分化与鉴定 | 第21-32页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.3.1.1 培养液的配置 | 第22-23页 |
| 2.3.1.2 Hoechst溶液的配置 | 第23页 |
| 2.3.2 细胞复苏与冻存 | 第23页 |
| 2.3.3 细胞培养和分化 | 第23-24页 |
| 2.3.4 细胞核Hoechst染色 | 第24页 |
| 2.4 实验结果 | 第24-27页 |
| 2.4.1 细胞的复苏与冻存 | 第24页 |
| 2.4.2 细胞的增殖 | 第24-25页 |
| 2.4.3 细胞的分化 | 第25-27页 |
| 2.4.4 细胞核Hoechst染色 | 第27页 |
| 2.5 讨论 | 第27-31页 |
| 2.5.1 细胞复苏与冻存 | 第27-28页 |
| 2.5.2 细胞培养与分化 | 第28-30页 |
| 2.5.3 Hoechst染色 | 第30-31页 |
| 2.6 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 基于荧光标记的骨骼肌细胞葡萄糖转运模型的建立及饱和脂肪酸诱导胰岛素抵抗模型的建立 | 第32-42页 |
| 3.1 引言 | 第32-33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.3.1 试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.3.1.1 2-NBDG的配制 | 第34页 |
| 3.3.1.2 MTT的配制 | 第34页 |
| 3.3.1.3 棕榈酸的配制 | 第34页 |
| 3.3.1.4 胰岛素的配制 | 第34-35页 |
| 3.3.2 细胞培养与分化 | 第35页 |
| 3.3.3 荧光酶标仪读数检测骨骼肌细胞摄取2-NBDG的能力 | 第35页 |
| 3.3.3.1 测定骨骼肌细胞摄取测2-NBDG的最佳浓度 | 第35页 |
| 3.3.3.2 测定骨骼肌细胞摄取2-NBDG的最佳时间 | 第35页 |
| 3.3.4 荧光显微镜拍照观察骨骼肌细胞对2-NBDG的摄取 | 第35页 |
| 3.3.5 棕榈酸诱导骨骼肌细胞胰岛素抵抗 | 第35-36页 |
| 3.4 实验结果 | 第36-39页 |
| 3.4.1 骨骼肌细胞的分化 | 第36页 |
| 3.4.2 2-NBDG检测C2C12骨骼肌细胞葡萄糖摄取的时效及量效关系 | 第36-37页 |
| 3.4.2.1 测定C2C12骨骼肌细胞摄取2-NBDG的最佳浓度 | 第36-37页 |
| 3.4.2.2 测定C2C12骨骼肌细胞摄取2-NBDG的最佳时间 | 第37页 |
| 3.4.3 骨骼肌细胞对2-NBDG的摄取 | 第37-38页 |
| 3.4.4 棕榈酸诱导骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的建立 | 第38-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-41页 |
| 3.5.1 骨骼肌的细胞增殖与分化 | 第39页 |
| 3.5.2 骨骼肌细胞葡萄糖转运模型的建立 | 第39-40页 |
| 3.5.3 F-与骨骼肌胰岛素抵抗 | 第40-41页 |
| 3.6 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 水飞蓟宾对饱和脂肪酸诱导骨骼肌细胞胰岛素抵抗的改善作用及机制探讨 | 第42-58页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料 | 第42-44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.3.1 水飞蓟宾的配制方法 | 第44页 |
| 4.3.2 细胞培养、分化以及分组处理 | 第44页 |
| 4.3.3 Western Blot法检测相关蛋白的表达 | 第44-47页 |
| 4.3.3.1 细胞膜蛋白的提取 | 第44-45页 |
| 4.3.3.2 细胞全蛋白的提取 | 第45-46页 |
| 4.3.3.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第46页 |
| 4.3.3.4 蛋白印迹 | 第46-47页 |
| 4.3.4 荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)的水平 | 第47页 |
| 4.3.5 比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性 | 第47-49页 |
| 4.3.6 细胞活力的测定 | 第49页 |
| 4.4 实验结果 | 第49-54页 |
| 4.4.1 水飞蓟宾对胰岛素抵抗骨骼肌细胞摄取葡萄糖的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.2 水飞蓟宾对葡萄糖转运体GLUT4的表达和转位的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.3 水飞蓟宾对胰岛素信号通路关键环节Akt活化的影响 | 第51页 |
| 4.4.4 水飞蓟宾对p-IRS-1(Ser307)和相关丝氨酸苏氨酸蛋白激酶表达的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.5 水飞蓟宾对IR状态下氧化应激相关指标的影响 | 第52-54页 |
| 4.4.5.1 水飞蓟宾对活性氧(ROS)释放的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.5.2 水飞蓟宾对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响 | 第53页 |
| 4.4.5.3 水飞蓟宾对骨骼肌细胞活力的变化 | 第53-54页 |
| 4.5 讨论 | 第54-57页 |
| 4.6 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 5.1 总结 | 第58页 |
| 5.2 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第67页 |
