| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 微生态学 | 第13-14页 |
| 1.2 肠道微生态及其研究现状 | 第14-20页 |
| 1.2.1 肠道菌群 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肠道微生态平衡及影响因素 | 第15-16页 |
| 1.2.3 肠道菌群与常见疾病 | 第16-18页 |
| 1.2.3.1 肠道菌群与炎症性肠病 | 第16页 |
| 1.2.3.2 肠道菌群与肥胖及相关代谢紊乱疾病 | 第16-17页 |
| 1.2.3.3 肠道菌群与肾脏疾病 | 第17页 |
| 1.2.3.4 肠道菌群与骨质疏松 | 第17-18页 |
| 1.2.3.5 肠道菌群与焦虑、抑郁症 | 第18页 |
| 1.2.4 微生态制剂的应用 | 第18-20页 |
| 1.3 小肠上皮细胞及其研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 小肠上皮细胞 | 第20页 |
| 1.3.2 营养物质对小肠上皮细胞的调控 | 第20-21页 |
| 1.3.2.1 氨基酸对小肠上皮细胞的调控 | 第20页 |
| 1.3.2.2 维生素对小肠上皮细胞的调控 | 第20-21页 |
| 1.3.2.3 生长因子对小肠上皮细胞的调控 | 第21页 |
| 1.3.2.4 脂类对小肠上皮细胞的调控 | 第21页 |
| 1.3.3 小肠菌群与小肠上皮细胞间关系的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 ω-3PUFAs与肠道健康的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4.1 ω-3长链多不饱和脂肪酸 | 第22页 |
| 1.4.2 ω-3PUFAs对肠道微生态的影响 | 第22页 |
| 1.4.3 ω-3PUFAs对小肠上皮细胞的影响 | 第22-23页 |
| 1.5 本课题选题及研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 高ω-3PUFAs含量鱼油对小鼠肠道菌群的影响 | 第24-42页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.3.1 鱼油脂肪酸成份检测 | 第25-26页 |
| 2.3.2 小鼠处理及样品收集 | 第26页 |
| 2.3.3 DNA提取 | 第26-28页 |
| 2.3.4 PCR-DGGE | 第28-29页 |
| 2.3.4.1 引物设计 | 第28-29页 |
| 2.3.4.2 PCR扩增 | 第29页 |
| 2.3.4.3 DGGE | 第29页 |
| 2.3.4.4 DGGE条带回收 | 第29页 |
| 2.3.5 回收条带DNA的纯化和克隆 | 第29-30页 |
| 2.3.6 DGGE条带测序 | 第30-31页 |
| 2.3.6.1 连接反应 | 第30页 |
| 2.3.6.2 连接产物转化 | 第30页 |
| 2.3.6.3 蓝白斑筛选 | 第30-31页 |
| 2.3.6.4 质粒提取 | 第31页 |
| 2.3.6.5 M13+/-测序 | 第31页 |
| 2.3.7 进化分析 | 第31页 |
| 2.3.8 荧光实时定量PCR | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果 | 第32-40页 |
| 2.4.1 鱼油中各脂肪酸含量的检测 | 第32-33页 |
| 2.4.2 鱼油对小鼠健康的影响 | 第33页 |
| 2.4.3 PCR-DGGE分析 | 第33-36页 |
| 2.4.3.1 PCR扩增产物 | 第33-34页 |
| 2.4.3.2 DGGE电泳图谱 | 第34-35页 |
| 2.4.3.3 目标条带DNA的纯化 | 第35-36页 |
| 2.4.4 测序结果 | 第36-37页 |
| 2.4.5 进化分析 | 第37-38页 |
| 2.4.6 鱼油组中肠道菌群的变化 | 第38-39页 |
| 2.4.7 幽门螺旋杆菌qPCR定量结果 | 第39-40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 ω-3 PUFAs对金属离子损伤的IEC-6细胞生长的影响及其机理研究 | 第42-70页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 IEC-6细胞培养 | 第42-43页 |
| 3.3.2 样品配制 | 第43页 |
| 3.3.3 MTT分析 | 第43-44页 |
| 3.3.3.1 金属离子及ω-3PUFAs浓度筛选 | 第43页 |
| 3.3.3.2 ω-3PUFAs对金属离子损伤细胞存活率的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.4 ω-3PUFAs对金属离子损伤的IEC-6细胞的保护机制研究 | 第44页 |
| 3.4 实验结果 | 第44-68页 |
| 3.4.1 金属离子及ω-3PUFAs浓度筛选 | 第44-47页 |
| 3.4.1.1 Cu~(2+)浓度筛选 | 第44页 |
| 3.4.1.2 Cd~(3+)浓度筛选 | 第44-45页 |
| 3.4.1.3 Pb~(2+)浓度筛选 | 第45页 |
| 3.4.1.4 DHA安全浓度筛选 | 第45-46页 |
| 3.4.1.5 EPA安全浓度筛选 | 第46-47页 |
| 3.4.2 ω-3PUFAs对金属离子损伤细胞存活率的影响 | 第47-57页 |
| 3.4.2.1 DHA对IEC-6细胞Cu~(2+)损伤的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.2.2 EPA对IEC-6细胞Cu~(2+)损伤的影响 | 第48-50页 |
| 3.4.2.3 DHA对IEC-6细胞Cd~(3+)损伤的影响 | 第50-52页 |
| 3.4.2.4 EPA对IEC-6细胞Cd~(3+)损伤的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.2.5 DHA对IEC-6细胞Pb~(2+)损伤的影响 | 第53-55页 |
| 3.4.2.6 EPA对IEC-6细胞Pb~(2+)损伤的影响 | 第55-57页 |
| 3.4.3 ω-3PUFAs对金属离子损伤的IEC-6细胞的保护机制研究 | 第57-68页 |
| 3.4.3.1 DHA与Cu~(2+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第57-59页 |
| 3.4.3.2 EPA与Cu~(2+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第59-61页 |
| 3.4.3.3 DHA与Cd~(3+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第61-62页 |
| 3.4.3.4 EPA与Cd~(3+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第62-64页 |
| 3.4.3.5 DHA与Pb~(2+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第64-66页 |
| 3.4.3.6 EPA与Pb~(2+)作用时细胞ROS、EGF及IL-6表达水平的变化 | 第66-68页 |
| 3.5 讨论 | 第68页 |
| 3.6 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间参加的科研项目和成果 | 第80页 |
