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碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性的研究

中文摘要第4-5页
英文摘要第5-6页
第一章 引言第10-21页
    1.1 碱性蛋白酶的性质第10-12页
        1.1.1 分子量第10页
        1.1.2 最佳pH值及温度第10-11页
        1.1.3 金属离子对酶活性的影响第11页
        1.1.4 底物特异性第11页
        1.1.5 蛋白酶的自我剪切第11-12页
        1.1.6 环境对酶学性质的影响第12页
    1.2 碱性蛋白酶作用机制第12-13页
    1.3 碱性蛋白酶的分类第13-14页
        1.3.1 丝氨酸碱性蛋白酶第13-14页
            1.3.1.1 胰凝乳蛋白酶第13页
            1.3.1.2 枯草杆菌丝氨酸蛋白酶第13-14页
            1.3.1.3 黏球菌 α-溶菌蛋白酶第14页
    1.4 产碱性蛋白酶的微生物第14-16页
    1.5 碱性蛋白酶的功能与应用第16-18页
        1.5.1 碱性蛋白酶在清洁剂中的应用第16页
        1.5.2 碱性蛋白酶在丝绸脱胶中的应用第16页
        1.5.3 碱性蛋白酶在皮革工业中的应用第16-17页
        1.5.4 碱性蛋白酶在食品行业中的应用第17页
        1.5.5 碱性蛋白酶在制药工业中的应用第17页
        1.5.6 碱性蛋白酶在摄影行业中的应用第17页
        1.5.7 碱性蛋白酶在生活垃圾处理中的应用第17-18页
    1.6 碱性蛋白酶的应用现状第18-19页
    1.7 论文的研究意义与目的第19-21页
第二章 菌株Cellulomonas bogoriensis产酶条件的优化第21-38页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 实验菌株第21页
        2.1.2 实验药品第21页
        2.1.3 培养基第21-22页
        2.1.4 实验仪器第22页
    2.2 实验方法第22-25页
        2.2.1 制备碱性蛋白酶粗酶液第22页
        2.2.2 碱性蛋白酶活力测定方法第22-24页
        2.2.3 发酵条件的优化第24-25页
            2.2.3.1 单因素条件的优化第24-25页
            2.2.3.2 Box-Behnken组合设计法优化菌株发酵培养基第25页
    2.3 结果与讨论第25-37页
        2.3.1 验证菌株降解酪素的能力第25-26页
        2.3.2 发酵时间对菌株产酶的影响第26-27页
        2.3.3 培养基初始pH对菌株产酶的影响第27-28页
        2.3.4 培养温度对菌株产酶的影响第28页
        2.3.5 不同装液量对菌株产酶的影响第28-29页
        2.3.6 不同碳源对菌株产酶的影响第29-30页
        2.3.7 不同含碳量对菌株产酶的影响第30页
        2.3.8 培养基氮源对菌株产酶的影响第30-31页
        2.3.9 不同含氮量对菌株产酶的影响第31-32页
        2.3.10培养基初始NaCl含量对菌株产酶的影响第32-33页
        2.3.11 Box-Behnken组合设计法优化菌株发酵培养基第33-36页
        2.3.12验证菌株产碱性蛋白酶的最佳条件第36-37页
    2.4 小结与讨论第37-38页
第三章 碱性蛋白酶的分离纯化及性质研究第38-60页
    3.1 实验材料第38-39页
        3.1.1 实验菌株第38页
        3.1.2 培养基第38页
        3.1.3 实验药品第38页
        3.1.4 实验仪器第38-39页
    3.2 实验方法第39-44页
        3.2.1 碱性蛋白酶的分离纯化第39-40页
            3.2.1.1 碱性蛋白酶粗酶液的制备第39页
            3.2.1.2 硫酸铵沉淀去除部分杂蛋白第39-40页
            3.2.1.3 CM Sepharose Fast Flow离子交换层析第40页
        3.2.2 TCA沉淀第40-41页
        3.2.3 碱性蛋白酶纯度及分子量的测定第41页
        3.2.4 碱性蛋白酶性质研究第41-44页
    3.3 结果与讨论第44-58页
        3.3.1 碱性蛋白酶的纯化第44-45页
        3.3.2 碱性蛋白酶学性质的研究第45-58页
            3.3.2.1 碱性蛋白酶分子量测定第45-46页
            3.3.2.2 碱性蛋白酶的最适反应温度第46-47页
            3.3.2.3 碱性蛋白酶的热稳定性第47页
            3.3.2.4 碱性蛋白酶的最适反应pH第47-48页
            3.3.2.5 碱性蛋白酶的pH稳定性第48-49页
            3.3.2.6 金属离子对碱性蛋白酶活力的影响第49-50页
            3.3.2.7 化学试剂对碱性蛋白酶活力的影响第50页
            3.3.2.8 蛋白酶抑制剂对碱性蛋白酶活力的影响第50-51页
            3.3.2.9 碱性蛋白酶的底物特异性第51-52页
            3.3.2.10碱性蛋白酶的动力学分析第52-53页
            3.3.2.11碱性蛋白酶与商业去污剂的相容性第53页
            3.3.2.12碱性蛋白酶的脱毛效果第53-54页
            3.3.2.13碱性蛋白酶的去血污效果第54-55页
            3.3.2.14不同浓度NaCl对碱性蛋白酶活性的影响第55-56页
            3.3.2.15碱性蛋白酶N末端序列分析第56-58页
    3.4 小结与讨论第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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