中文摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第10-21页 |
1.1 碱性蛋白酶的性质 | 第10-12页 |
1.1.1 分子量 | 第10页 |
1.1.2 最佳pH值及温度 | 第10-11页 |
1.1.3 金属离子对酶活性的影响 | 第11页 |
1.1.4 底物特异性 | 第11页 |
1.1.5 蛋白酶的自我剪切 | 第11-12页 |
1.1.6 环境对酶学性质的影响 | 第12页 |
1.2 碱性蛋白酶作用机制 | 第12-13页 |
1.3 碱性蛋白酶的分类 | 第13-14页 |
1.3.1 丝氨酸碱性蛋白酶 | 第13-14页 |
1.3.1.1 胰凝乳蛋白酶 | 第13页 |
1.3.1.2 枯草杆菌丝氨酸蛋白酶 | 第13-14页 |
1.3.1.3 黏球菌 α-溶菌蛋白酶 | 第14页 |
1.4 产碱性蛋白酶的微生物 | 第14-16页 |
1.5 碱性蛋白酶的功能与应用 | 第16-18页 |
1.5.1 碱性蛋白酶在清洁剂中的应用 | 第16页 |
1.5.2 碱性蛋白酶在丝绸脱胶中的应用 | 第16页 |
1.5.3 碱性蛋白酶在皮革工业中的应用 | 第16-17页 |
1.5.4 碱性蛋白酶在食品行业中的应用 | 第17页 |
1.5.5 碱性蛋白酶在制药工业中的应用 | 第17页 |
1.5.6 碱性蛋白酶在摄影行业中的应用 | 第17页 |
1.5.7 碱性蛋白酶在生活垃圾处理中的应用 | 第17-18页 |
1.6 碱性蛋白酶的应用现状 | 第18-19页 |
1.7 论文的研究意义与目的 | 第19-21页 |
第二章 菌株Cellulomonas bogoriensis产酶条件的优化 | 第21-38页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验菌株 | 第21页 |
2.1.2 实验药品 | 第21页 |
2.1.3 培养基 | 第21-22页 |
2.1.4 实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 制备碱性蛋白酶粗酶液 | 第22页 |
2.2.2 碱性蛋白酶活力测定方法 | 第22-24页 |
2.2.3 发酵条件的优化 | 第24-25页 |
2.2.3.1 单因素条件的优化 | 第24-25页 |
2.2.3.2 Box-Behnken组合设计法优化菌株发酵培养基 | 第25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-37页 |
2.3.1 验证菌株降解酪素的能力 | 第25-26页 |
2.3.2 发酵时间对菌株产酶的影响 | 第26-27页 |
2.3.3 培养基初始pH对菌株产酶的影响 | 第27-28页 |
2.3.4 培养温度对菌株产酶的影响 | 第28页 |
2.3.5 不同装液量对菌株产酶的影响 | 第28-29页 |
2.3.6 不同碳源对菌株产酶的影响 | 第29-30页 |
2.3.7 不同含碳量对菌株产酶的影响 | 第30页 |
2.3.8 培养基氮源对菌株产酶的影响 | 第30-31页 |
2.3.9 不同含氮量对菌株产酶的影响 | 第31-32页 |
2.3.10培养基初始NaCl含量对菌株产酶的影响 | 第32-33页 |
2.3.11 Box-Behnken组合设计法优化菌株发酵培养基 | 第33-36页 |
2.3.12验证菌株产碱性蛋白酶的最佳条件 | 第36-37页 |
2.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
第三章 碱性蛋白酶的分离纯化及性质研究 | 第38-60页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 实验菌株 | 第38页 |
3.1.2 培养基 | 第38页 |
3.1.3 实验药品 | 第38页 |
3.1.4 实验仪器 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-44页 |
3.2.1 碱性蛋白酶的分离纯化 | 第39-40页 |
3.2.1.1 碱性蛋白酶粗酶液的制备 | 第39页 |
3.2.1.2 硫酸铵沉淀去除部分杂蛋白 | 第39-40页 |
3.2.1.3 CM Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第40页 |
3.2.2 TCA沉淀 | 第40-41页 |
3.2.3 碱性蛋白酶纯度及分子量的测定 | 第41页 |
3.2.4 碱性蛋白酶性质研究 | 第41-44页 |
3.3 结果与讨论 | 第44-58页 |
3.3.1 碱性蛋白酶的纯化 | 第44-45页 |
3.3.2 碱性蛋白酶学性质的研究 | 第45-58页 |
3.3.2.1 碱性蛋白酶分子量测定 | 第45-46页 |
3.3.2.2 碱性蛋白酶的最适反应温度 | 第46-47页 |
3.3.2.3 碱性蛋白酶的热稳定性 | 第47页 |
3.3.2.4 碱性蛋白酶的最适反应pH | 第47-48页 |
3.3.2.5 碱性蛋白酶的pH稳定性 | 第48-49页 |
3.3.2.6 金属离子对碱性蛋白酶活力的影响 | 第49-50页 |
3.3.2.7 化学试剂对碱性蛋白酶活力的影响 | 第50页 |
3.3.2.8 蛋白酶抑制剂对碱性蛋白酶活力的影响 | 第50-51页 |
3.3.2.9 碱性蛋白酶的底物特异性 | 第51-52页 |
3.3.2.10碱性蛋白酶的动力学分析 | 第52-53页 |
3.3.2.11碱性蛋白酶与商业去污剂的相容性 | 第53页 |
3.3.2.12碱性蛋白酶的脱毛效果 | 第53-54页 |
3.3.2.13碱性蛋白酶的去血污效果 | 第54-55页 |
3.3.2.14不同浓度NaCl对碱性蛋白酶活性的影响 | 第55-56页 |
3.3.2.15碱性蛋白酶N末端序列分析 | 第56-58页 |
3.4 小结与讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |