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苯乳酸生产菌株LY-78的乳酸脱氢酶基因克隆表达及酶学性质分析

摘要第10-12页
英文摘要第12-13页
1 文献综述第14-24页
    1.1 苯乳酸概述第14页
    1.2 苯乳酸的抑菌谱与应用价值第14-17页
        1.2.1 苯乳酸的抑菌谱第14-15页
        1.2.2 苯乳酸在食品领域的应用第15-16页
        1.2.3 苯乳酸在医药领域的应用第16页
        1.2.4 苯乳酸在其他领域的应用第16-17页
    1.3 苯乳酸的合成方法与途径第17-19页
        1.3.1 苯乳酸的合成方法第17-18页
        1.3.2 苯乳酸的合成途径第18-19页
    1.4 乳酸脱氢酶的研究现状第19-21页
        1.4.1 乳酸脱氢酶概述第19-20页
        1.4.2 构建乳酸脱氢酶基因工程菌的研究现状第20-21页
    1.5 研究目的与意义第21-22页
    1.6 研究主要内容第22-23页
    1.7 技术路线第23-24页
2 材料与方法第24-36页
    2.1 材料与设备第24-25页
        2.1.1 菌株与质粒第24页
        2.1.2 主要试剂第24-25页
        2.1.3 主要仪器设备第25页
    2.2 方法第25-36页
        2.2.1 主要培养基的配制第25-26页
        2.2.2 主要试剂的配制第26页
        2.2.3 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析第26-27页
        2.2.4 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因重组克隆质粒的构建第27-32页
        2.2.5 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因表达工程菌的构建第32-34页
        2.2.6 重组乳酸脱氢酶的酶学性质分析第34-36页
3 结果与分析第36-52页
    3.1 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析结果第36-41页
        3.1.1 乳酸脱氢酶基因核苷酸序列与氨基酸序列比对分析第36-37页
        3.1.2 乳酸脱氢酶理化性质与功能结构分析第37-39页
        3.1.3 乳酸脱氢酶蛋白的二级结构分析第39-40页
        3.1.4 乳酸脱氢酶蛋白的三级结构分析第40-41页
    3.2 乳酸脱氢酶基因重组工程菌的构建结果第41-45页
        3.2.1 乳酸脱氢酶基因PCR扩增产物的鉴定第41页
        3.2.2 克隆载体pMD18 T-ldh的鉴定第41-42页
        3.2.3 表达载体pET28a-ldh的鉴定第42-43页
        3.2.4 重组工程菌E.coli BL21 (DE3)-pET28a-ldh的诱导表达第43-44页
        3.2.5 重组乳酸脱氢酶的分离纯化与酶活鉴定第44-45页
    3.3 重组乳酸脱氢酶酶学性质的分析结果第45-52页
        3.3.1 重组乳酸脱氢酶酶活力的测定第45-46页
        3.3.2 温度对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响第46-47页
        3.3.3 pH对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响第47-48页
        3.3.4 金属离子对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响第48-49页
        3.3.5 重组乳酸脱氢酶动力学常数的测定第49-52页
4 讨论第52-56页
    4.1 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析第52页
    4.2 乳酸脱氢酶基因重组工程菌的构建第52-54页
        4.2.1 宿主菌的选择第52-53页
        4.2.2 构建载体的选择第53-54页
    4.3 重组乳酸脱氢酶酶学性质的分析第54-56页
5 结论第56-58页
    5.1 主要结论第56页
    5.2 创新点第56页
    5.3 展望第56-58页
参考文献第58-68页
致谢第68-70页
个人简历第70-71页

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