摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 苯乳酸概述 | 第14页 |
1.2 苯乳酸的抑菌谱与应用价值 | 第14-17页 |
1.2.1 苯乳酸的抑菌谱 | 第14-15页 |
1.2.2 苯乳酸在食品领域的应用 | 第15-16页 |
1.2.3 苯乳酸在医药领域的应用 | 第16页 |
1.2.4 苯乳酸在其他领域的应用 | 第16-17页 |
1.3 苯乳酸的合成方法与途径 | 第17-19页 |
1.3.1 苯乳酸的合成方法 | 第17-18页 |
1.3.2 苯乳酸的合成途径 | 第18-19页 |
1.4 乳酸脱氢酶的研究现状 | 第19-21页 |
1.4.1 乳酸脱氢酶概述 | 第19-20页 |
1.4.2 构建乳酸脱氢酶基因工程菌的研究现状 | 第20-21页 |
1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
1.6 研究主要内容 | 第22-23页 |
1.7 技术路线 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 材料与设备 | 第24-25页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-36页 |
2.2.1 主要培养基的配制 | 第25-26页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第26页 |
2.2.3 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.2.4 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因重组克隆质粒的构建 | 第27-32页 |
2.2.5 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因表达工程菌的构建 | 第32-34页 |
2.2.6 重组乳酸脱氢酶的酶学性质分析 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-52页 |
3.1 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析结果 | 第36-41页 |
3.1.1 乳酸脱氢酶基因核苷酸序列与氨基酸序列比对分析 | 第36-37页 |
3.1.2 乳酸脱氢酶理化性质与功能结构分析 | 第37-39页 |
3.1.3 乳酸脱氢酶蛋白的二级结构分析 | 第39-40页 |
3.1.4 乳酸脱氢酶蛋白的三级结构分析 | 第40-41页 |
3.2 乳酸脱氢酶基因重组工程菌的构建结果 | 第41-45页 |
3.2.1 乳酸脱氢酶基因PCR扩增产物的鉴定 | 第41页 |
3.2.2 克隆载体pMD18 T-ldh的鉴定 | 第41-42页 |
3.2.3 表达载体pET28a-ldh的鉴定 | 第42-43页 |
3.2.4 重组工程菌E.coli BL21 (DE3)-pET28a-ldh的诱导表达 | 第43-44页 |
3.2.5 重组乳酸脱氢酶的分离纯化与酶活鉴定 | 第44-45页 |
3.3 重组乳酸脱氢酶酶学性质的分析结果 | 第45-52页 |
3.3.1 重组乳酸脱氢酶酶活力的测定 | 第45-46页 |
3.3.2 温度对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响 | 第46-47页 |
3.3.3 pH对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响 | 第47-48页 |
3.3.4 金属离子对重组乳酸脱氢酶酶活力的影响 | 第48-49页 |
3.3.5 重组乳酸脱氢酶动力学常数的测定 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 植物乳杆菌LY-78 乳酸脱氢酶基因的生物信息学分析 | 第52页 |
4.2 乳酸脱氢酶基因重组工程菌的构建 | 第52-54页 |
4.2.1 宿主菌的选择 | 第52-53页 |
4.2.2 构建载体的选择 | 第53-54页 |
4.3 重组乳酸脱氢酶酶学性质的分析 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-58页 |
5.1 主要结论 | 第56页 |
5.2 创新点 | 第56页 |
5.3 展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
个人简历 | 第70-71页 |