摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 植物耐受低温的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 低温对植物的影响 | 第11-12页 |
1.1.2 植物对低温的适应性 | 第12-13页 |
1.2 代谢组学简介及研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 代谢组学的概念 | 第13页 |
1.2.2 谢组学研究方法 | 第13-14页 |
1.2.3 逆境下植物的代谢组学研究进展 | 第14-16页 |
1.3 蔗糖、肌醇、硫代谢对植物低温胁迫的响应 | 第16-17页 |
1.3.1 蔗糖代谢对植物低温胁迫的响应 | 第16页 |
1.3.2 肌醇代谢对植物低温胁迫的响应 | 第16-17页 |
1.3.3 硫代谢对植物低温胁迫的响应 | 第17页 |
1.4 qRT-PCR技术在基因表达检测中的应用 | 第17页 |
1.5 冬小麦东农冬麦1号的主要研究进展 | 第17-18页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-27页 |
2.1 试验材料 | 第19页 |
2.2 试验设计和取材 | 第19-20页 |
2.3 试验仪器与试剂 | 第20-21页 |
2.3.1 试验仪器 | 第20-21页 |
2.3.2 试验试剂 | 第21页 |
2.4 试验方法 | 第21-25页 |
2.4.1 GC-TOF/MS检测 | 第21-22页 |
2.4.2 Chroma TOF 4.3 X软件的使用 | 第22页 |
2.4.3 SIMCA软件的使用 | 第22页 |
2.4.4 基因表达量验证 | 第22-25页 |
2.5 试验数据统计分析 | 第25-26页 |
2.6 技术路线 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-44页 |
3.1 GC-TOF/MS检测 | 第27页 |
3.2 化合物鉴定 | 第27-29页 |
3.3 数据降维分析 | 第29-31页 |
3.3.1 主成分分析 | 第29页 |
3.3.2 正交偏最小二乘法判别分析及对模型的检验 | 第29-31页 |
3.4 显著差异代谢物的筛选 | 第31-35页 |
3.5 通路富集分析 | 第35-36页 |
3.6 差异显著代谢物的通路分析 | 第36-39页 |
3.6.1 -10℃比 5℃结果 | 第36-37页 |
3.6.2 -25℃比 5℃结果 | 第37-38页 |
3.6.3 -25℃比-10℃结果 | 第38-39页 |
3.7 相关基因的表达量分析 | 第39-44页 |
3.7.1 代谢关键酶基因引物设计 | 第39页 |
3.7.2 样品RNA的提取及DNase Ⅰ 处理效果 | 第39-40页 |
3.7.3 反转录和引物特异性检测 | 第40页 |
3.7.4 各温度下TaSuS,TaSPS定量结果及相关产物的相对含量变化 | 第40-41页 |
3.7.5 各温度下 TaMIPS、TaIMP 定量结果及相关产物相对含量变化 | 第41-42页 |
3.7.6 各温度下TdSAT,TaOASTL定量结果及相关产物的相对含量变化 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-49页 |
4.1 代谢组学分析得到物质相对含量随温度变化的关系 | 第44-46页 |
4.1.1 氨基酸代谢对低温的响应 | 第44页 |
4.1.2 糖代谢对低温的响应 | 第44-45页 |
4.1.3 氮素代谢对低温的响应 | 第45页 |
4.1.4 有机酸代谢对低温的响应 | 第45-46页 |
4.1.5 核苷及核苷酸类似物代谢对低温的响应 | 第46页 |
4.2 生物学方法验证低温胁迫的响应以及代谢组学数据的可靠性 | 第46-48页 |
4.2.1 蔗糖代谢对低温胁迫的响应 | 第46-47页 |
4.2.2 肌醇代谢对低温胁迫的响应 | 第47页 |
4.2.3 硫代谢对低温胁迫的响应 | 第47-48页 |
4.3 下步工作展望 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
附录 | 第59-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第61页 |