| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 英文缩略词表 | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一章 实验材料 | 第11-15页 |
| 1.1 受试动物和受试细胞 | 第11页 |
| 1.2 主要试剂和材料 | 第11-14页 |
| 1.3 主要仪器与耗材 | 第14-15页 |
| 第二章 实验方法 | 第15-22页 |
| 2.1 动物模型的建立 | 第15页 |
| 2.2 免疫组织化学技术 | 第15-16页 |
| 2.3 细胞培养技术 | 第16页 |
| 2.3.1 细胞的培养传代 | 第16页 |
| 2.3.2 细胞的冻存 | 第16页 |
| 2.3.3 细胞的复苏 | 第16页 |
| 2.4 CCK-8 检测技术 | 第16-17页 |
| 2.4.1 复制AngⅡ诱导平滑肌细胞增殖模型 | 第16-17页 |
| 2.4.2 测定熊果酸对AngⅡ诱导平滑肌细胞增殖的影响 | 第17页 |
| 2.4.3 转染si-SFRP4对模型组和给药组细胞活力的影响 | 第17页 |
| 2.4.4 Wnt通路抑制剂XAV939和激活剂LiCl的毒性检测 | 第17页 |
| 2.5 荧光定量PCR技术 | 第17-19页 |
| 2.5.1 RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.5.2 逆转录 | 第18页 |
| 2.5.3 RTFQ-PCR | 第18-19页 |
| 2.6 Western Blot 技术检测蛋白表达 | 第19-20页 |
| 2.6.1 细胞总蛋白的提取和浓度测定 | 第19页 |
| 2.6.2 Western blotting具体步骤 | 第19-20页 |
| 2.6.3 Western blot数据处理 | 第20页 |
| 2.7 siRNA转染A7r5细胞 | 第20-21页 |
| 2.7.1 转染效率的考察 | 第20-21页 |
| 2.7.2 转染后的蛋白检测 | 第21页 |
| 2.8 免疫荧光技术 | 第21页 |
| 2.9 统计学方法 | 第21-22页 |
| 第三章 实验结果 | 第22-30页 |
| 3.1 免疫组化结果 | 第22-23页 |
| 3.2 CCK-8 检测细胞活力 | 第23-25页 |
| 3.2.1 AngⅡ造模浓度的筛选 | 第23页 |
| 3.2.2 UA有效保护浓度的筛选 | 第23-24页 |
| 3.2.3 转染si-SFRP4对细胞增殖率的影响 | 第24页 |
| 3.2.4 Wnt通路抑制剂、激活剂的细胞毒性检测 | 第24-25页 |
| 3.3 UA对通路中各分子的影响 | 第25-27页 |
| 3.3.1 UA对AngⅡ诱导的A7r5细胞内SFRP4的mRNA及蛋白表达的影响 | 第25页 |
| 3.3.2 UA对AngⅡ诱导的A7r5细胞内β-catenin的mRNA及蛋白表达的影响 | 第25-26页 |
| 3.3.3 UA对AngⅡ诱导的A7r5细胞内FoxO3a的mRNA及蛋白表达的影响183.3.4 UA对AngⅡ诱导的A7r5细胞内p27的mRNA及蛋白表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.4 SFRP4/wnt/β-catenin/Foxo3a/p27信号通路的验证 | 第27-29页 |
| 3.4.1 Western Blot检测siRNA-SFRP4的基因沉默效率 | 第27-28页 |
| 3.4.2 Western Blot检测si-SFRP4对模型组和UA组细胞中β-catenin蛋白表达水平的影响 | 第28页 |
| 3.4.3 Wnt通路抑制剂XAV939对Foxo3a/p27的影响 | 第28-29页 |
| 3.4.4 Wnt通路激动剂LiCl对Foxo3a/p27的影响 | 第29页 |
| 3.5 免疫荧光结果 | 第29-30页 |
| 第四章 讨论 | 第30-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 综述 | 第44-65页 |
| 综述参考文献 | 第56-65页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
