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快速检测大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析方法的建立

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
缩略语表第6-11页
第一章 引言第11-20页
   ·E. coli O157:H7的临床表现和感染第11-12页
   ·E. coli O157:H7的特异性抗原和抗体制备研究进展第12-14页
     ·E. coli O157:H7的O抗原第12页
     ·E. coli O157:H7的H抗原第12-13页
     ·其它特异性抗原第13-14页
   ·E. coli O157:H7检测方法的研究进展第14-17页
     ·常规检测方法第14-15页
     ·基于PCR的分子生物学方法第15-16页
     ·免疫学检测方法第16-17页
     ·新兴技术第17页
   ·胶体金快速检测技术的概述第17-19页
     ·胶体金的性质第18页
     ·胶体金制备方法第18页
     ·胶体金标记抗体第18-19页
     ·免疫胶体技术在微生物检测中的应用第19页
   ·展望第19-20页
第二章 抗大肠杆菌O157:H7多克隆抗体的制备第20-31页
   ·前言第20页
   ·材料与方法第20-25页
     ·菌株、免疫动物第20页
     ·主要试剂和仪器设备第20页
     ·相关试剂和培养基配置第20-21页
     ·E. coli O157:H7抗原制备第21-22页
     ·其它菌株包被原的制备第22页
     ·动物免疫第22-23页
     ·间接ELISA第23页
     ·E. coli O157:H7多克隆抗体效价监测第23页
     ·抗体纯化第23-24页
     ·多克隆抗体特异性评价第24-25页
   ·结果与讨论第25-31页
     ·E. coli O157:H7全菌抗原和细胞碎片抗原第25-26页
     ·多克隆抗体免疫应答曲线第26-27页
     ·纯化多抗电泳分析第27-28页
     ·多克隆抗体特异性第28-29页
     ·讨论第29-31页
第三章 大肠杆菌O157:H7胶体金快速检测试纸条的制备第31-42页
   ·前言第31页
   ·材料与方法第31-35页
     ·菌株第31页
     ·主要试剂和仪器设备第31页
     ·相关试剂与培养基配制第31-32页
     ·多克隆抗体和单克隆抗体配对第32-33页
     ·胶体金制备第33页
     ·标记pH值的确定第33页
     ·蛋白标记量的确定第33-34页
     ·标记胶体金离心参数第34页
     ·封闭剂的确定第34页
     ·检测线包被浓度的确定第34-35页
     ·质控线包被浓度的确定第35页
   ·结果与讨论第35-42页
     ·多克隆抗体和单克隆抗体配对第35-36页
     ·制备的胶体金分析第36-37页
     ·标记pH值的确定第37-38页
     ·蛋白标记量的确定第38页
     ·标记胶体金离心参数第38-39页
     ·封闭剂的确定第39页
     ·检测线包被浓度的确定第39-40页
     ·质控线包被浓度的确定第40-41页
     ·讨论第41-42页
第四章 大肠杆菌O157:H7胶体金快速检测试纸条的评价第42-52页
   ·前言第42页
   ·材料与方法第42-45页
     ·菌株第42页
     ·主要试剂和仪器设备第42页
     ·相关试剂与培养基配制第42-43页
     ·试纸条的制备第43页
     ·细菌培养与处理第43页
     ·阴性样品测试第43页
     ·试纸条特异性第43-44页
     ·试纸条灵敏度第44页
     ·食品样品检测第44页
     ·试纸条保质期第44-45页
   ·结果与讨论第45-52页
     ·试纸条阴性样品测试第45页
     ·试纸条特异性第45-47页
     ·试纸条灵敏度分析第47-48页
     ·试纸条保质期第48-49页
     ·食品样品检测第49-50页
     ·讨论第50-52页
第五章 抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体的制备第52-65页
   ·前言第52页
   ·材料与方法第52-59页
     ·菌株、免疫动物第52页
     ·主要试剂和仪器设备第52页
     ·相关试剂与培养基配制第52-53页
     ·E. coli O157:H7鞭毛蛋白提取第53-54页
     ·动物免疫第54页
     ·细菌培养第54-55页
     ·间接ELISA条件的确定第55页
     ·免疫动物效价和特异性测定第55页
     ·E. coli O157:H7杂交瘤细胞株的建立第55-58页
     ·单克隆抗体腹水配对第58-59页
   ·结果与讨论第59-65页
     ·E. coli O157:H7鞭毛蛋白第59-61页
     ·间接ELISA条件确定第61-62页
     ·小鼠血清抗体效价和特异性分析第62-63页
     ·抗E.coli O157:H7杂交瘤细胞的建立第63页
     ·单克隆抗体腹水配对第63-64页
     ·讨论第64-65页
第六章 结论与展望第65-66页
   ·结论第65页
     ·抗E.coli O157:H7多克隆抗体制备第65页
     ·E. coli O157:H7胶体金快速检测试纸条的研制及评价第65页
     ·抗E. coli O157:H7单克隆抗体制备第65页
   ·展望第65-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-72页
附录1 菌种目录第72-73页
附录2 仪器设备第73-74页
附录3 试剂药品第74-75页
个人介绍第75页
攻读学位期间的研究成果第75页

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