| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 骨骼肌卫星细胞 | 第11-14页 |
| 1.1.1 骨骼肌卫星细胞简介 | 第11页 |
| 1.1.2 骨骼肌卫星细胞激活与更新 | 第11-12页 |
| 1.1.3 骨骼肌卫星细胞增殖与分化 | 第12-13页 |
| 1.1.4 细胞培养的历史背景 | 第13页 |
| 1.1.5 细胞培养的优点 | 第13-14页 |
| 1.1.6 骨骼肌的生长发育及肉品质的改良 | 第14页 |
| 1.2 钙蛋白酶系统 | 第14-17页 |
| 1.2.1 钙蛋白酶系统简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 钙蛋白酶系统在骨骼肌生长发育中的作用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 CAPN1基因的研究进展 | 第16页 |
| 1.2.4 CAPN3基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 半胱天冬酶系统 | 第17-19页 |
| 1.3.1 半胱天冬酶系统简介 | 第17页 |
| 1.3.2 半胱天冬酶系统在细胞凋亡中的作用 | 第17-18页 |
| 1.3.3 CASP3基因的研究进展 | 第18页 |
| 1.3.4 CASP7基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.5 CASP9基因的研究进展 | 第19页 |
| 1.4 钙蛋白酶系统与半胱天冬酶系统的网络关系研究概况 | 第19-20页 |
| 1.5 肌肉调节因子基因家族 | 第20-21页 |
| 1.5.1 肌肉调节因子基因家族简介 | 第20页 |
| 1.5.2 Myo D基因 | 第20-21页 |
| 1.5.3 Myo G基因 | 第21页 |
| 1.5.4 Myf5基因 | 第21页 |
| 1.6 钙蛋白酶系统与肌肉嫩度的关系 | 第21-22页 |
| 1.7 研究意义 | 第22-23页 |
| 第2章 牛原代骨骼肌卫星细胞的分离提取与培养 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器与耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.4 实验用主要试剂溶液的配制 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 实验器皿的清洗与灭菌 | 第24-25页 |
| 2.2.2 牛原代骨骼肌卫星细胞的分离提取与培养 | 第25-26页 |
| 2.2.3 细胞纯化 | 第26页 |
| 2.2.4 细胞传代 | 第26页 |
| 2.2.5 牛骨骼肌卫星细胞生长曲线的绘制 | 第26-27页 |
| 2.2.6 细胞的冷冻保存与复苏 | 第27页 |
| 2.3 结果 | 第27-30页 |
| 2.3.1 牛原代骨骼肌卫星细胞的分离提取与培养 | 第27-28页 |
| 2.3.2 牛骨骼肌卫星细胞的纯化、传代培养以及冷冻保存与复苏 | 第28-29页 |
| 2.3.3 牛骨骼肌卫星细胞向成肌细胞的诱导分化 | 第29页 |
| 2.3.4 牛骨骼肌卫星细胞生长曲线 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-33页 |
| 2.4.1 牛原代骨骼肌卫星细胞分离提取方法 | 第30-31页 |
| 2.4.2 牛原代骨骼肌卫星细胞的纯化 | 第31页 |
| 2.4.3 牛原代骨骼肌卫星细胞的传代培养 | 第31-32页 |
| 2.4.4 牛原代骨骼肌卫星细胞的冷冻保存与复苏 | 第32页 |
| 2.4.5 牛骨骼肌卫星细胞的诱导分化 | 第32-33页 |
| 2.4.6 牛骨骼肌卫星细胞生长曲线 | 第33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-35页 |
| 第3章 牛骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第35-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 实验仪器与耗材 | 第35页 |
| 3.1.4 实验用主要试剂溶液的配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 细胞免疫荧光染色鉴定牛骨骼肌卫星细胞表面标志的表达 | 第36-37页 |
| 3.2.2 细胞总RNA提取 | 第37-38页 |
| 3.2.3 反转录 | 第38页 |
| 3.2.4 常规PCR | 第38-39页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳检测牛骨骼肌卫星细胞表面标志的表达 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-41页 |
| 3.3.1 细胞免疫荧光染色鉴定牛骨骼肌卫星细胞表面标志的表达 | 第39-40页 |
| 3.3.2 反转录PCR检测牛骨骼肌卫星细胞表面标志的表达 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.4.1 牛骨骼肌卫星细胞的形态学鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4.2 牛骨骼肌卫星细胞的抗原标记鉴定 | 第42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 CAPN1基因和CASP9基因在牛骨骼肌形成中mRNA表达特性分析 | 第43-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 实验对象 | 第43页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 实验仪器与耗材 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 4.2.1 引物设计与条件优化 | 第43-45页 |
| 4.2.2 实验总体注意事项 | 第45页 |
| 4.2.3 细胞总RNA提取 | 第45页 |
| 4.2.4 反转录 | 第45页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR | 第45页 |
| 4.2.6 数据处理 | 第45-46页 |
| 4.3 结果 | 第46-50页 |
| 4.3.1 CAPN1基因在牛骨骼肌形成中mRNA的表达 | 第46页 |
| 4.3.2 CAPN3基因在牛骨骼肌形成中mRNA的表达 | 第46-47页 |
| 4.3.3 CASP3基因在牛骨骼肌形成中mRNA的表达 | 第47-48页 |
| 4.3.4 CASP7基因在牛骨骼肌形成中mRNA的表达 | 第48页 |
| 4.3.5 CASP9基因在牛骨骼肌形成中mRNA的表达 | 第48-49页 |
| 4.3.6 肌肉调节因子基因家族在牛骨骼肌形成中m RNA的表达 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第5章 CAPN1基因和CASP9基因mRNA表达与肌纤维性状相关性分析 | 第54-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第54页 |
| 5.1.1 实验对象 | 第54页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第54页 |
| 5.1.3 实验仪器与耗材 | 第54页 |
| 5.1.4 实验用主要试剂溶液的配制 | 第54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.2.1 组织处理 | 第54-55页 |
| 5.2.2 切片制作 | 第55页 |
| 5.2.3 观察拍照 | 第55页 |
| 5.2.4 肌纤维性状测量 | 第55-56页 |
| 5.2.5 组织总RNA提取 | 第56页 |
| 5.2.6 荧光定量PCR | 第56页 |
| 5.2.7 数据处理 | 第56页 |
| 5.3 结果 | 第56-58页 |
| 5.3.1 肌纤维性状测定 | 第56页 |
| 5.3.2 不同年龄鲁西黄牛CAPN1基因mRNA表达的变化 | 第56-57页 |
| 5.3.3 不同年龄鲁西黄牛CASP9基因mRNA表达的变化 | 第57页 |
| 5.3.4 CAPN1和CASP9基因mRNA表达与肌纤维性状相关性分析 | 第57-58页 |
| 5.4 讨论 | 第58-59页 |
| 5.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第6章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 缩略语词汇表 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第73页 |
