| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 卵母细胞低温保存的意义 | 第10页 |
| 1.2 卵母细胞冷冻的发展概况 | 第10-12页 |
| 1.3 慢速冷冻与玻璃化冷冻的生理因素分析 | 第12-13页 |
| 1.3.1 卵母细胞内钙离子 | 第12-13页 |
| 1.3.2 能量代谢 | 第13页 |
| 1.3.3 蛋白组学分析 | 第13页 |
| 1.4 影响卵母细胞玻璃化冷冻效果的因素 | 第13-18页 |
| 1.4.1 卵巢的质量 | 第13-14页 |
| 1.4.2 卵母细胞的分类 | 第14页 |
| 1.4.3 卵母细胞的成熟阶段 | 第14-15页 |
| 1.4.4 卵丘颗粒细胞 | 第15-16页 |
| 1.4.5 冷冻速率和解冻速率 | 第16页 |
| 1.4.6 冷冻保护液粘度 | 第16-17页 |
| 1.4.7 冷冻样品体积大小 | 第17-18页 |
| 1.5 玻璃化冷冻对卵母细胞造成不同方面的影响 | 第18-21页 |
| 1.5.1 发育能力 | 第18页 |
| 1.5.2 形态结构 | 第18-19页 |
| 1.5.3 相关基因表达 | 第19-21页 |
| 1.6 本实验的研究目的与意义 | 第21-24页 |
| 第2章 液氦冷冻对牛未成熟卵母细胞发育能力的影响 | 第24-36页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 实验仪器和试剂配制 | 第24-30页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第25-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.3.1 卵巢的采集和运输 | 第30页 |
| 2.3.2 卵母细胞的收集、挑选和分组 | 第30页 |
| 2.3.3 液氮玻璃化冷冻-解冻 | 第30-31页 |
| 2.3.4 液氦玻璃化冷冻-解冻 | 第31页 |
| 2.3.5 体外成熟（IVM） | 第31-32页 |
| 2.3.6 体外受精（IVF） | 第32-33页 |
| 2.3.7 体外培养（IVC） | 第33页 |
| 2.3.8 体外培养胚胎和单层细胞的换液 | 第33页 |
| 2.4 实验结果 | 第33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-36页 |
| 第3章 液氦冷冻对牛未成熟卵母细胞超微结构的影响 | 第36-42页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 材料和方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 卵母细胞的采集与分组（同 2.3.2） | 第36页 |
| 3.2.2 卵母细胞的冷冻-解冻（同 2.3.3 与 2.3.4） | 第36页 |
| 3.2.3 试剂的配制 | 第36-37页 |
| 3.2.4 卵母细胞的准备和固定 | 第37页 |
| 3.2.5 卵母细胞超薄切片的制备 | 第37页 |
| 3.2.6 卵母细胞超薄切片的观察 | 第37-38页 |
| 3.3 结果 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 液氦冷冻对牛未成熟卵母细胞相关基因表达的影响 | 第42-50页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 材料和方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 卵母细胞的采集与分组（同 2.3.2） | 第42页 |
| 4.2.2 卵母细胞的冷冻-解冻（同 2.3.3 与 2.3.4） | 第42页 |
| 4.2.3 卵母细胞的准备 | 第42-43页 |
| 4.2.4 总RNA的提取 | 第43页 |
| 4.2.5 反转录成cDNA（RT-PCR） | 第43页 |
| 4.2.6 引物设计 | 第43-44页 |
| 4.2.7 普通PCR | 第44页 |
| 4.2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第44-45页 |
| 4.2.9 实时荧光定量PCR | 第45页 |
| 4.3 结果 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 缩略语词汇表 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第64页 |
