| 摘要 | 第4-6页 |
| SUMMARY | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-10页 |
| 实验仪器 | 第10-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 Oct 4 和Caspase 6 的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.1 Oct 4 的研究现状 | 第14-17页 |
| 1.1.1 Oct 4 的结构和功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 Oct 4 与干细胞多能性 | 第15-16页 |
| 1.1.3 Oct 4 与早期胚胎发育 | 第16-17页 |
| 1.2 Caspase家族的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 Caspase家族的命名和分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 Caspase酶原的结构及活化 | 第18页 |
| 1.2.3 Caspase相关的凋亡信号转导途径 | 第18-19页 |
| 2 细胞因子 | 第19-21页 |
| 2.1 细胞因子的简述 | 第19页 |
| 2.2 细胞因子的特性 | 第19-20页 |
| 2.3 细胞因子与生殖 | 第20-21页 |
| 3 细胞凋亡 | 第21-23页 |
| 3.1 细胞凋亡的简述 | 第21-23页 |
| 第二部分 实验部分 | 第23-50页 |
| 实验一Oct 4 和Caspase 6 在牦牛卵母细胞及早期胚胎发育过程中的表达 | 第23-37页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 1 材料与方法 | 第24-27页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第24页 |
| 1.2 牦牛卵母细胞的收集及体外培养 | 第24-25页 |
| 1.3 牦牛卵母细胞的体外受精及体外胚胎培养 | 第25页 |
| 1.4 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第25页 |
| 1.5 免疫荧光染色检测OCT4和CAS6蛋白定位的表达 | 第25-26页 |
| 1.6 qRT-PCR检测Oct 4 和Caspase 6 基因的表达 | 第26页 |
| 1.7 数据分析 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-35页 |
| 2.1 牦牛卵母细胞成熟及体外受精早期胚胎的发育 | 第27-28页 |
| 2.2 OCT4蛋白在牦牛卵母细胞和体外受精胚胎发育过程中的分布 | 第28-30页 |
| 2.3 CAS6蛋白在牦牛卵母细胞和体外受精胚胎发育过程中的分布 | 第30-32页 |
| 2.4 Oct 4 基因在牦牛卵母细胞和体外受精早期胚胎发育过程中的表达 | 第32-33页 |
| 2.5 Caspase 6 基因在牦牛卵母细胞和体外受精早期胚胎发育过程中的表达 | 第33-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| 4 结论 | 第36-37页 |
| 实验二LIF对牦牛卵母细胞中Oct 4 和Caspase 6 表达的影响 | 第37-50页 |
| 前言 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| 1.1 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.2 实验材料的获取 | 第39-40页 |
| 1.2.1 牦牛卵巢的采集 | 第39页 |
| 1.2.2 实验前的准备 | 第39页 |
| 1.2.3 牦牛卵巢的实验室处理 | 第39页 |
| 1.2.4 牦牛卵母细胞的获取及体外成熟培养 | 第39-40页 |
| 1.2.5 LIF作用牦牛卵母细胞 | 第40页 |
| 1.3 免疫荧光染色检测OCT 4 和CAS 6 蛋白的分布 | 第40-41页 |
| 1.4 成熟COCs总RNA的提取 | 第41-42页 |
| 1.4.1 实验前的准备 | 第41页 |
| 1.4.2 总RNA的提取 | 第41-42页 |
| 1.5 反转录及PCR扩增 | 第42页 |
| 1.5.1 RNA反转录 | 第42页 |
| 1.5.2 PCR的扩增 | 第42页 |
| 1.6 Oct 4 和Caspase 6 基因的qRT-PCR检测 | 第42-43页 |
| 1.7 数据分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| 2.1 OCT 4 和CAS 6 蛋白在牦牛卵母细胞中的分布 | 第43-45页 |
| 2.2 引物特异性的确定 | 第45-46页 |
| 2.3 不同浓度LIF作用下Oct 4 和Caspase 6 基因在卵母细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 4 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
