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H2S对干旱胁迫下小麦D1蛋白周转的影响及相关基因的克隆

致谢第4-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-24页
    1.1 干旱对植物的生长和发育的影响第10-16页
        1.1.1 干旱对小麦产量的影响第10页
        1.1.2 干旱对植物的生长的影响第10-12页
            1.1.2.1 植物在干旱胁迫下生长的变化第10-11页
            1.1.2.2 植物在干旱胁迫下生物量的变化第11页
            1.1.2.3 干旱对植物相对水分含量的影响第11-12页
        1.1.3 干旱对植物的抗氧化酶系统的影响第12-13页
        1.1.4 干旱对植物的光合作用的影响第13-16页
            1.1.4.1 干旱对植物的光合作用参数的影响第13-14页
            1.1.4.2 干旱对植物的叶绿素荧光参数的影响第14-15页
            1.1.4.3 干旱对植物的类囊体膜D1蛋白及其周转的影响第15-16页
    1.2 植物中H_2S的生物学功能研究第16-21页
        1.2.1 H_2S在生物体内的发现第16-17页
        1.2.2 植物体内H_2S的合成第17-18页
        1.2.3 植物中H_2S的生理效应研究第18-21页
            1.2.3.1 H_2S对植物种子萌发的影响第18页
            1.2.3.2 H_2S对气孔的影响第18-19页
            1.2.3.3 H_2S对植物活性氧和抗氧化酶的作用第19页
            1.2.3.4 H_2S对植物光合作用的影响第19-20页
            1.2.3.5 H_2S与植物干旱等逆境下的耐受性关系第20-21页
    1.3 叶绿体D1蛋白及其周转第21-24页
        1.3.1 D1蛋白的结构和功能第21-22页
        1.3.2 小麦D1蛋白的周转及其相关基因第22-24页
2 引言第24-25页
3 材料和方法第25-34页
    3.1 材料与处理第25页
        3.1.1 实验材料的选择和培养第25页
        3.1.2 实验材料处理第25页
    3.2 试剂和仪器第25-27页
        3.2.1 主要试剂第25页
        3.2.2 主要仪器设备第25-26页
        3.2.3 PCR引物第26-27页
    3.3 试验方法第27-33页
        3.3.1 实验材料表型观察第27页
        3.3.2 相对水分含量(RWC)及干物质量的测定第27页
        3.3.3 H_2S含量的测定第27页
        3.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第27-28页
        3.3.5 过氧化氢酶(CAT)活性测定第28页
        3.3.6 过氧化氢(H_2O_2)含量的测定第28页
        3.3.7 硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量的测定第28页
        3.3.8 叶绿素荧光参数的测定第28页
        3.3.9 小麦类囊体膜蛋白的提取和Western bloting分析第28-29页
            3.3.9.1 类囊体膜蛋白的提取第28-29页
            3.3.9.2 类囊体膜蛋白的SDS-PAGE和Western bloting检测第29页
        3.3.10 小麦D1蛋白降解相关基因的克隆第29-30页
            3.3.10.1 小麦D1蛋白降解相关基因的电子克隆第29页
            3.3.10.2 小麦D1蛋白降解相关基因的克隆第29-30页
        3.3.11 D1蛋白降解相关基因的q RT-PCR分析第30-31页
        3.3.12 小麦TaLCD和TaDCD的克隆、植物表达载体的构建及遗传转化第31-33页
            3.3.12.1 基因克隆及克隆载体构建第31页
            3.3.12.2 表达载体构建及大肠杆菌转化第31页
            3.3.12.3 表达载体的农杆菌转化第31-32页
            3.3.12.4 农杆菌介导转化拟南芥-浸花法第32页
            3.3.12.5 转基因拟南芥的初步鉴定第32-33页
    3.4 数据分析第33-34页
4 结果与分析第34-50页
    4.1 干旱胁迫下H_2S含量的变化第34-35页
    4.2 H_2S对小麦幼苗生长和RWC的影响第35-36页
    4.3 H_2S对抗氧化酶活性和H_2O2含量的影响第36-37页
        4.3.1 H_2S对SOD活性的影响第36-37页
        4.3.2 H_2S对CAT活性的影响第37页
        4.3.3 H_2S对H_2O2含量的影响第37页
    4.4 H_2S对膜质过氧化作用的影响第37页
    4.5 H_2S对光系统II光化学效率的影响第37-38页
    4.6 H_2S对Psb A基因表达和D1蛋白含量的影响第38-40页
    4.7 H_2S对STN8基因及D1蛋白降解相关基因的表达的影响第40-42页
    4.8 小麦D1降解周转相关基因的克隆第42-45页
    4.9 小麦TaLCD和TaDCD的克隆及拟南芥遗传转化第45-50页
        4.9.1 小麦TaLCD和TaDCD的克隆第45-46页
        4.9.2 小麦TaLCD和TaDCD的克隆载体构建第46页
        4.9.3 小麦TaLCD和TaDCD的表达载体构建第46-47页
        4.9.4 小麦TaLCD和TaDCD的拟南芥遗传转化第47-48页
        4.9.5 转基因植株的筛选和鉴定第48-50页
5 结论与讨论第50-52页
    5.1 外源H_2S减缓了干旱对小麦造成的氧化胁迫第50页
    5.2 外源H_2S减少了干旱胁迫对PSII的损伤第50页
    5.3 外源H_2S通过促进D1蛋白的周转减缓了干旱胁迫对PSII的损伤第50-51页
    5.4 获得了小麦TaLCD和TaDCD基因及D1蛋白降解相关基因TaDeg1、TaDeg2、TaDeg5、TaDeg7、TaDeg8、TaFts H1/5、TaFts H_2/8、TaPBCP的CDS全长第51页
    5.5 成功构建了小麦TaLCD和TaDCD基因的过表达载体,获得了转基因拟南芥第51-52页
参考文献第52-64页
英文摘要第64-65页

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