致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 干旱对植物的生长和发育的影响 | 第10-16页 |
1.1.1 干旱对小麦产量的影响 | 第10页 |
1.1.2 干旱对植物的生长的影响 | 第10-12页 |
1.1.2.1 植物在干旱胁迫下生长的变化 | 第10-11页 |
1.1.2.2 植物在干旱胁迫下生物量的变化 | 第11页 |
1.1.2.3 干旱对植物相对水分含量的影响 | 第11-12页 |
1.1.3 干旱对植物的抗氧化酶系统的影响 | 第12-13页 |
1.1.4 干旱对植物的光合作用的影响 | 第13-16页 |
1.1.4.1 干旱对植物的光合作用参数的影响 | 第13-14页 |
1.1.4.2 干旱对植物的叶绿素荧光参数的影响 | 第14-15页 |
1.1.4.3 干旱对植物的类囊体膜D1蛋白及其周转的影响 | 第15-16页 |
1.2 植物中H_2S的生物学功能研究 | 第16-21页 |
1.2.1 H_2S在生物体内的发现 | 第16-17页 |
1.2.2 植物体内H_2S的合成 | 第17-18页 |
1.2.3 植物中H_2S的生理效应研究 | 第18-21页 |
1.2.3.1 H_2S对植物种子萌发的影响 | 第18页 |
1.2.3.2 H_2S对气孔的影响 | 第18-19页 |
1.2.3.3 H_2S对植物活性氧和抗氧化酶的作用 | 第19页 |
1.2.3.4 H_2S对植物光合作用的影响 | 第19-20页 |
1.2.3.5 H_2S与植物干旱等逆境下的耐受性关系 | 第20-21页 |
1.3 叶绿体D1蛋白及其周转 | 第21-24页 |
1.3.1 D1蛋白的结构和功能 | 第21-22页 |
1.3.2 小麦D1蛋白的周转及其相关基因 | 第22-24页 |
2 引言 | 第24-25页 |
3 材料和方法 | 第25-34页 |
3.1 材料与处理 | 第25页 |
3.1.1 实验材料的选择和培养 | 第25页 |
3.1.2 实验材料处理 | 第25页 |
3.2 试剂和仪器 | 第25-27页 |
3.2.1 主要试剂 | 第25页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第25-26页 |
3.2.3 PCR引物 | 第26-27页 |
3.3 试验方法 | 第27-33页 |
3.3.1 实验材料表型观察 | 第27页 |
3.3.2 相对水分含量(RWC)及干物质量的测定 | 第27页 |
3.3.3 H_2S含量的测定 | 第27页 |
3.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第27-28页 |
3.3.5 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第28页 |
3.3.6 过氧化氢(H_2O_2)含量的测定 | 第28页 |
3.3.7 硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量的测定 | 第28页 |
3.3.8 叶绿素荧光参数的测定 | 第28页 |
3.3.9 小麦类囊体膜蛋白的提取和Western bloting分析 | 第28-29页 |
3.3.9.1 类囊体膜蛋白的提取 | 第28-29页 |
3.3.9.2 类囊体膜蛋白的SDS-PAGE和Western bloting检测 | 第29页 |
3.3.10 小麦D1蛋白降解相关基因的克隆 | 第29-30页 |
3.3.10.1 小麦D1蛋白降解相关基因的电子克隆 | 第29页 |
3.3.10.2 小麦D1蛋白降解相关基因的克隆 | 第29-30页 |
3.3.11 D1蛋白降解相关基因的q RT-PCR分析 | 第30-31页 |
3.3.12 小麦TaLCD和TaDCD的克隆、植物表达载体的构建及遗传转化 | 第31-33页 |
3.3.12.1 基因克隆及克隆载体构建 | 第31页 |
3.3.12.2 表达载体构建及大肠杆菌转化 | 第31页 |
3.3.12.3 表达载体的农杆菌转化 | 第31-32页 |
3.3.12.4 农杆菌介导转化拟南芥-浸花法 | 第32页 |
3.3.12.5 转基因拟南芥的初步鉴定 | 第32-33页 |
3.4 数据分析 | 第33-34页 |
4 结果与分析 | 第34-50页 |
4.1 干旱胁迫下H_2S含量的变化 | 第34-35页 |
4.2 H_2S对小麦幼苗生长和RWC的影响 | 第35-36页 |
4.3 H_2S对抗氧化酶活性和H_2O2含量的影响 | 第36-37页 |
4.3.1 H_2S对SOD活性的影响 | 第36-37页 |
4.3.2 H_2S对CAT活性的影响 | 第37页 |
4.3.3 H_2S对H_2O2含量的影响 | 第37页 |
4.4 H_2S对膜质过氧化作用的影响 | 第37页 |
4.5 H_2S对光系统II光化学效率的影响 | 第37-38页 |
4.6 H_2S对Psb A基因表达和D1蛋白含量的影响 | 第38-40页 |
4.7 H_2S对STN8基因及D1蛋白降解相关基因的表达的影响 | 第40-42页 |
4.8 小麦D1降解周转相关基因的克隆 | 第42-45页 |
4.9 小麦TaLCD和TaDCD的克隆及拟南芥遗传转化 | 第45-50页 |
4.9.1 小麦TaLCD和TaDCD的克隆 | 第45-46页 |
4.9.2 小麦TaLCD和TaDCD的克隆载体构建 | 第46页 |
4.9.3 小麦TaLCD和TaDCD的表达载体构建 | 第46-47页 |
4.9.4 小麦TaLCD和TaDCD的拟南芥遗传转化 | 第47-48页 |
4.9.5 转基因植株的筛选和鉴定 | 第48-50页 |
5 结论与讨论 | 第50-52页 |
5.1 外源H_2S减缓了干旱对小麦造成的氧化胁迫 | 第50页 |
5.2 外源H_2S减少了干旱胁迫对PSII的损伤 | 第50页 |
5.3 外源H_2S通过促进D1蛋白的周转减缓了干旱胁迫对PSII的损伤 | 第50-51页 |
5.4 获得了小麦TaLCD和TaDCD基因及D1蛋白降解相关基因TaDeg1、TaDeg2、TaDeg5、TaDeg7、TaDeg8、TaFts H1/5、TaFts H_2/8、TaPBCP的CDS全长 | 第51页 |
5.5 成功构建了小麦TaLCD和TaDCD基因的过表达载体,获得了转基因拟南芥 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-64页 |
英文摘要 | 第64-65页 |