摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 综述 | 第12-20页 |
1.1 前言 | 第12-13页 |
1.2 细胞色素(P450)酶系 | 第13-17页 |
1.2.1 CYP450 | 第13-16页 |
1.2.1.1 CYP450的命名 | 第13-14页 |
1.2.1.2 CYP450的结构 | 第14页 |
1.2.1.3 CYP450的分布 | 第14-15页 |
1.2.1.4 CYP450在甲壳动物中的研究现状 | 第15-16页 |
1.2.2 CPR | 第16-17页 |
1.2.2.1 CPR的结构 | 第16页 |
1.2.2.2 CPR的功能 | 第16-17页 |
1.2.2.3 CPR的研究现状 | 第17页 |
1.3 胆固醇 | 第17-18页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第18-20页 |
1.4.1 研究目的 | 第18页 |
1.4.2 研究意义 | 第18-20页 |
第二章 中华绒螯蟹CYP2基因的cDNA克隆及表达分析 | 第20-40页 |
2.1 材料与方法 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.3 实验试剂 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-30页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.2 RNA反转录 | 第22-23页 |
2.2.3 CYP2基因全序列的获得 | 第23-29页 |
2.2.3.1 3’FULL RACE | 第24-26页 |
2.2.3.2 5’FULL RACE | 第26-29页 |
2.2.4 序列分析和系统发育树构建 | 第29页 |
2.2.5 CYP2基因相对表达量的测定 | 第29-30页 |
2.2.5.1 荧光定量引物设计以及相关性验证 | 第29-30页 |
2.2.5.2 CYP2基因在各组织中的相对表达量 | 第30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
2.3.1 RNA的提取 | 第30-31页 |
2.3.2 CYP2基因cDNA的序列分析 | 第31-34页 |
2.3.3 中华绒螯蟹CYP2氨基酸序列同源分析 | 第34页 |
2.3.4 CYP2序列同源性分析 | 第34-35页 |
2.3.5 CYP2相对表达量的测定 | 第35-38页 |
2.3.5.1 标准曲线相关性和产物单一性检验 | 第35-36页 |
2.3.5.2 CYP2在各组织部位的表达 | 第36-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
第三章 中华绒螯蟹CPR基因的cDNA克隆及表达分析 | 第40-49页 |
3.1 实验材料 | 第40页 |
3.1.1 实验样品 | 第40页 |
3.1.2 实验仪器 | 第40页 |
3.1.3 实验试剂 | 第40页 |
3.2 实验方法 | 第40-42页 |
3.2.1 总RNA提取及反转录 | 第40页 |
3.2.2 CPR基因全序列的获得 | 第40-41页 |
3.2.3 序列分析和系统发育树构建 | 第41页 |
3.2.4 CPR基因相对表达量的测定 | 第41-42页 |
3.2.4.1 定量引物设计以及相关性验证 | 第41页 |
3.2.4.2 CPR基因在各组织中的相对表达量 | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第42页 |
3.3.2 CPR全序列的获得及序列分析 | 第42-44页 |
3.3.3 CPR序列同源性分析 | 第44-45页 |
3.3.4 CPR相对表达量的测定 | 第45-47页 |
3.3.4.1 标准曲线相关性和产物单一性检验 | 第45-46页 |
3.3.4.2 CPR基因在不同组织中的相对表达量 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
第四章 中华绒螯蟹CYP2和CPR基因与胆固醇含量的相关性 | 第49-56页 |
4.1 材料与方法 | 第49页 |
4.1.1 实验材料 | 第49页 |
4.1.2 实验仪器 | 第49页 |
4.1.3 实验试剂 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-51页 |
4.2.1 组织总胆固醇酶法测定 | 第49-51页 |
4.3 结果分析 | 第51-54页 |
4.3.1 标准曲线的绘制 | 第51页 |
4.3.2 中华绒螯蟹蜕皮周期中胆固醇含量的变化 | 第51-52页 |
4.3.3 中华绒螯蟹蜕皮基因与胆固醇含量相关性分析 | 第52-54页 |
4.3.3.1 CYP2基因与胆固醇含量相关性分析 | 第52-53页 |
4.3.3.2 CPR基因与胆固醇含量的相关性分析 | 第53-54页 |
4.4 讨论 | 第54-56页 |
第五章 结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |