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中华绒螯蟹CYP2和CPR基因的表达及其对胆固醇含量的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 综述第12-20页
    1.1 前言第12-13页
    1.2 细胞色素(P450)酶系第13-17页
        1.2.1 CYP450第13-16页
            1.2.1.1 CYP450的命名第13-14页
            1.2.1.2 CYP450的结构第14页
            1.2.1.3 CYP450的分布第14-15页
            1.2.1.4 CYP450在甲壳动物中的研究现状第15-16页
        1.2.2 CPR第16-17页
            1.2.2.1 CPR的结构第16页
            1.2.2.2 CPR的功能第16-17页
            1.2.2.3 CPR的研究现状第17页
    1.3 胆固醇第17-18页
    1.4 研究的目的和意义第18-20页
        1.4.1 研究目的第18页
        1.4.2 研究意义第18-20页
第二章 中华绒螯蟹CYP2基因的cDNA克隆及表达分析第20-40页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 实验材料第20页
        2.1.2 实验仪器第20-21页
        2.1.3 实验试剂第21页
    2.2 实验方法第21-30页
        2.2.1 RNA的提取第21-22页
        2.2.2 RNA反转录第22-23页
        2.2.3 CYP2基因全序列的获得第23-29页
            2.2.3.1 3’FULL RACE第24-26页
            2.2.3.2 5’FULL RACE第26-29页
        2.2.4 序列分析和系统发育树构建第29页
        2.2.5 CYP2基因相对表达量的测定第29-30页
            2.2.5.1 荧光定量引物设计以及相关性验证第29-30页
            2.2.5.2 CYP2基因在各组织中的相对表达量第30页
    2.3 结果与分析第30-38页
        2.3.1 RNA的提取第30-31页
        2.3.2 CYP2基因cDNA的序列分析第31-34页
        2.3.3 中华绒螯蟹CYP2氨基酸序列同源分析第34页
        2.3.4 CYP2序列同源性分析第34-35页
        2.3.5 CYP2相对表达量的测定第35-38页
            2.3.5.1 标准曲线相关性和产物单一性检验第35-36页
            2.3.5.2 CYP2在各组织部位的表达第36-38页
    2.4 讨论第38-40页
第三章 中华绒螯蟹CPR基因的cDNA克隆及表达分析第40-49页
    3.1 实验材料第40页
        3.1.1 实验样品第40页
        3.1.2 实验仪器第40页
        3.1.3 实验试剂第40页
    3.2 实验方法第40-42页
        3.2.1 总RNA提取及反转录第40页
        3.2.2 CPR基因全序列的获得第40-41页
        3.2.3 序列分析和系统发育树构建第41页
        3.2.4 CPR基因相对表达量的测定第41-42页
            3.2.4.1 定量引物设计以及相关性验证第41页
            3.2.4.2 CPR基因在各组织中的相对表达量第41-42页
    3.3 结果与分析第42-47页
        3.3.1 总RNA的提取第42页
        3.3.2 CPR全序列的获得及序列分析第42-44页
        3.3.3 CPR序列同源性分析第44-45页
        3.3.4 CPR相对表达量的测定第45-47页
            3.3.4.1 标准曲线相关性和产物单一性检验第45-46页
            3.3.4.2 CPR基因在不同组织中的相对表达量第46-47页
    3.4 讨论第47-49页
第四章 中华绒螯蟹CYP2和CPR基因与胆固醇含量的相关性第49-56页
    4.1 材料与方法第49页
        4.1.1 实验材料第49页
        4.1.2 实验仪器第49页
        4.1.3 实验试剂第49页
    4.2 实验方法第49-51页
        4.2.1 组织总胆固醇酶法测定第49-51页
    4.3 结果分析第51-54页
        4.3.1 标准曲线的绘制第51页
        4.3.2 中华绒螯蟹蜕皮周期中胆固醇含量的变化第51-52页
        4.3.3 中华绒螯蟹蜕皮基因与胆固醇含量相关性分析第52-54页
            4.3.3.1 CYP2基因与胆固醇含量相关性分析第52-53页
            4.3.3.2 CPR基因与胆固醇含量的相关性分析第53-54页
    4.4 讨论第54-56页
第五章 结论第56-58页
参考文献第58-63页
致谢第63页

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