中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
1 食欲肽与其受体 | 第11-18页 |
1.1 食欲肽与其受体的结构特征和分类 | 第11-12页 |
1.2 食欲肽B(OXB)及其受体的生理功能 | 第12-13页 |
1.3 食欲肽及其受体的研究现状 | 第13-16页 |
1.4 食欲肽受体2参与的信号转导机制 | 第16-18页 |
2 高通量药物筛选 | 第18-24页 |
2.1 高通量药物筛选的研究进展 | 第18-20页 |
2.2 基于细胞模型的高通量药物筛选 | 第20-22页 |
2.3 靶向G蛋白偶联受体的高通量药物筛选方法 | 第22-24页 |
3 天然中药材提取液的制备 | 第24-28页 |
3.1 天然中药材有效成分的提取 | 第24-26页 |
3.2 天然中药材有效成分的提取工艺研究进展 | 第26-27页 |
3.3 影响天然中药材提取效果的因素 | 第27-28页 |
4 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
第二章 以猪食欲肽受体2为靶点的细胞筛选模型的建立 | 第30-50页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 主要仪器设备 | 第30页 |
1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第31页 |
2 试验方法 | 第31-38页 |
2.1 CHO-K1细胞的复苏、传代培养与铺板 | 第31-32页 |
2.2 稳定细胞株的建立 | 第32-34页 |
2.3 验证阳性细胞、阴性细胞中目的基因的表达 | 第34-35页 |
2.4 优化筛选条件 | 第35-36页 |
2.5 筛选方法评估 | 第36-37页 |
2.6 pOX2R细胞株内源性干扰的检测 | 第37页 |
2.7 荧光素酶报告基因检测 | 第37页 |
2.8 数据处理与分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-46页 |
3.1 阳性及阴性细胞株的筛选和确定 | 第38-40页 |
3.2 验证目的基因及萤火虫荧光素酶基因的转入 | 第40-42页 |
3.3 筛选条件的优化结果 | 第42-45页 |
3.4 筛选方法的评估结果 | 第45页 |
3.5 猪OX2R阳性细胞株内源性干扰的检测结果 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 报告基因的确定 | 第46-47页 |
4.2 基于pOX2RcAMP/PKA信号通路的细胞筛选模型建立的理论依据 | 第47-48页 |
4.3 稳定细胞模型的优化与评估原则 | 第48-49页 |
5 本章小结 | 第49-50页 |
第三章 猪食欲肽受体2激动剂的细胞筛选模型的应用 | 第50-64页 |
1 材料 | 第50-51页 |
1.1 主要仪器设备 | 第50页 |
1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
2 试验方法 | 第51-54页 |
2.1 天然中药材提取物的制备 | 第51-52页 |
2.2 pOX2R受体激动剂的筛选 | 第52-53页 |
2.3 瞬时转染法分析阳性提取物的剂量效应关系 | 第53-54页 |
2.4 数据处理与分析 | 第54页 |
3 结果与分析 | 第54-61页 |
3.1 选取的天然中药材的名称与提取物浓度 | 第54-55页 |
3.2 pOX2R受体激动剂的筛选结果 | 第55-57页 |
3.3 阳性提取物的剂量效应关系分析 | 第57-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
4.1 天然中药材的选择 | 第61页 |
4.2 天然中药材提取方法的确定 | 第61-62页 |
4.3 阳性化合物剂量效应关系的探索及其有效成分、作用机理的探讨 | 第62-63页 |
5 本章小结 | 第63-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
在读期间发表的文章 | 第73-74页 |