| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 1. A型流感病毒概述 | 第11-17页 |
| 2. H9N2禽流感病毒的起源 | 第17页 |
| 3. H9N2禽流感病毒在国内的流行现状 | 第17-18页 |
| 4. H9N2禽流感病毒的致病性及分子机制 | 第18-20页 |
| 5. H9N2禽流感病毒国内毒株变异与进化 | 第20-21页 |
| 6. H9N2禽流感病毒在国内的免疫状况 | 第21-22页 |
| 7. 本课题研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 研究内容一 H9N2禽流感病毒NA264N及其变体病毒的拯救 | 第23-37页 |
| 1. 材料 | 第23-24页 |
| 1.1 病毒及细胞 | 第23-24页 |
| 1.2 培养基 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2. 方法 | 第24-30页 |
| 2.1 流感病毒RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2 cDNA的制备 | 第25页 |
| 2.3 引物的设计 | 第25-26页 |
| 2.4 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.5 重组反应 | 第27页 |
| 2.6 快速克隆方法 | 第27-28页 |
| 2.7 反应产物转化涂板 | 第28页 |
| 2.8 克隆鉴定 | 第28页 |
| 2.9 构建264位突变体质粒 | 第28-29页 |
| 2.10 Overlap PCR法 | 第29页 |
| 2.11 病毒的拯救 | 第29-30页 |
| 2.12 血凝实验 | 第30页 |
| 2.13 流感病毒TCID_(50)的测定 | 第30页 |
| 3. 结果 | 第30-35页 |
| 3.1 H9N2分离株NA蛋白264位潜在糖基化位点分析 | 第30-31页 |
| 3.2 引物的设计 | 第31-32页 |
| 3.3 流感病毒基因及线性化克隆载体的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3.4 NA264位突变体质粒的构建 | 第33-34页 |
| 3.5 NA264变体质粒的测序 | 第34页 |
| 3.6 利用反向遗传技术拯救流感病毒 | 第34-35页 |
| 4. 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 研究内容二 NA264N对H9N2禽流感病毒特性的影响 | 第37-47页 |
| 1. 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 病毒 | 第37页 |
| 1.2 细胞及实验动物 | 第37-38页 |
| 1.3 培养基 | 第38页 |
| 1.4 主要仪器 | 第38页 |
| 2. 方法 | 第38-40页 |
| 2.1 病毒的扩增 | 第38页 |
| 2.2 流感病毒TCID_(50)的测定 | 第38-39页 |
| 2.3 流感病毒生长曲线的测定 | 第39页 |
| 2.4 动物试验 | 第39-40页 |
| 2.4.1 小鼠致病性实验 | 第39-40页 |
| 2.4.2 SPF鸡实验 | 第40页 |
| 2.4.3 HI实验 | 第40页 |
| 3. 结果 | 第40-45页 |
| 3.1 生长曲线 | 第40-41页 |
| 3.2 动物试验 | 第41-45页 |
| 3.2.1 小鼠致病性实验 | 第41-42页 |
| 3.2.2 SPF鸡实验 | 第42-44页 |
| 3.2.3 HI实验 | 第44-45页 |
| 4. 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 全文总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间发表的论文及申请的专利 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
