| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-28页 |
| 1.1 绵羊肺腺瘤概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 OPA的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.2 OPA的临床症状、病理变化及流行情况 | 第13-14页 |
| 1.1.3 OPA的病原学 | 第14-15页 |
| 1.1.4 OPA的致瘤机制 | 第15-16页 |
| 1.1.5 OPA的诊断及防治 | 第16页 |
| 1.2 JSRV概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 JSRV基因组结构特征 | 第16-17页 |
| 1.2.2 JSRV基因编码的蛋白及作用 | 第17页 |
| 1.2.3 JSRV Env蛋白转化细胞的不同机制 | 第17页 |
| 1.2.4 JSRV的生命周期 | 第17-18页 |
| 1.2.5 内、外源性绵羊肺腺瘤病毒 | 第18页 |
| 1.3 JSRV受体透明质酸酶2 | 第18-19页 |
| 1.4 OPA的小型动物模型 | 第19页 |
| 1.5 细胞因子VEGF、EGFR、EGF及TGF-α与肿瘤 | 第19-26页 |
| 1.5.1 细胞因子VEGF与肿瘤 | 第20-22页 |
| 1.5.2 细胞因子EGFR与肿瘤 | 第22-23页 |
| 1.5.3 细胞因子EGF与肿瘤 | 第23-24页 |
| 1.5.4 细胞因子TGF-α与肿瘤 | 第24-26页 |
| 1.6 外源基因转染真核细胞技术 | 第26页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 2 试验一 脂质体法转染TC-1、TC-1-Hyal2及NIH 3T3细胞 | 第28-37页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 细胞与质粒 | 第28-29页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 脂质体法转染 | 第29页 |
| 2.2.2 激光共聚焦显微镜观察Env的定位 | 第29-30页 |
| 2.2.3 RT-PCR方法检测env的表达 | 第30-31页 |
| 2.2.4 Western blot方法检测Env的表达 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 激光共聚焦显微镜观察Env定位结果 | 第31-34页 |
| 2.3.2 细胞总RNA纯度及完整性的检测结果 | 第34页 |
| 2.3.3 RT-PCR鉴定env基因表达结果 | 第34-35页 |
| 2.3.4 Western blot鉴定Env蛋白表达结果 | 第35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 3 试验二 JSRV-Env对细胞因子VEGF、EGFR、TGF-α及EGF表达的影响 | 第37-60页 |
| 3.1 材料 | 第38页 |
| 3.1.1 细胞与质粒 | 第38页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 设计引物 | 第38-39页 |
| 3.2.2 qPCR方法检测JSRV-Env转染细胞后各细胞因子mRNA表达变化 | 第39页 |
| 3.2.3 ELISA方法检测JSRV-Env转染细胞后各细胞因子蛋白表达变化及标准曲线的绘制 | 第39-40页 |
| 3.2.4 数据统计与分析 | 第40页 |
| 3.3 结果 | 第40-56页 |
| 3.3.1 荧光定量PCR产物的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 β-actin、VEGF、TGF-α、EGFR的标准曲线 | 第41页 |
| 3.3.3 β-actin、VEGF、TGF-α、EGFR、EGF的扩增曲线和溶解曲线 | 第41-45页 |
| 3.3.4 JSRV-Env转染细胞后对VEGF、TGF-α、EGFR、EGFmRNA相对表达量的影响 | 第45-49页 |
| 3.3.5 JSRV-Env转染细胞后对VEGF、TGF-α、EGFR、EGF蛋白相对表达量的影响 | 第49-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 3.4.1 JSRV-Env转染细胞后细胞因子VEGF的表达变化 | 第56页 |
| 3.4.2 JSRV-Env转染细胞后细胞因子TGF-α的表达变化 | 第56-57页 |
| 3.4.3 JSRV-Env转染细胞后细胞因子EGFR及EGF的表达变化 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-60页 |
| 4 全文结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
