| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 糖生物学概述 | 第8-9页 |
| 1.2 肿瘤细胞中糖链的异常唾液酸化修饰 | 第9-11页 |
| 1.2.1 唾液酸 | 第9页 |
| 1.2.2 异常唾液酸化与恶性肿瘤 | 第9页 |
| 1.2.3 唾液酸转移酶 | 第9-10页 |
| 1.2.4 唾液酸酶 | 第10-11页 |
| 1.3 Toll样受体的信号转导 | 第11-13页 |
| 1.3.1 Toll样受体概述 | 第11-12页 |
| 1.3.2 TLRs介导的信号传导途径 | 第12页 |
| 1.3.3 NF-κB途径 | 第12-13页 |
| 1.4 常用的肿瘤细胞模型-上皮间质转化模型 | 第13-14页 |
| 1.5 立题依据及意义 | 第14页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 菌株、细胞株与质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 培养基 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 引物设计和目的基因的扩增 | 第18-20页 |
| 2.2.2 NEU1基因真核表达载体的构建 | 第20页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞稳定转染及阳性单克隆的筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.5 瞬时干扰 | 第21页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第21页 |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹法（Western blotting） | 第21-22页 |
| 2.2.8 MTT法检测细胞增殖 | 第22页 |
| 2.2.9 细胞与基质间的粘附实验 | 第22页 |
| 2.2.10 唾液酸酶活测定 | 第22页 |
| 2.2.11 凝集素染色 | 第22-23页 |
| 2.2.12 细胞免疫荧光 | 第23页 |
| 2.2.13 细胞划痕实验 | 第23页 |
| 2.2.14 流式细胞检测 | 第23页 |
| 2.2.15 免疫组化IHC | 第23页 |
| 2.2.16 数据的统计学分析处理 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-42页 |
| 3.1 唾液酸酶Neu1与膀胱癌发展的相关性研究 | 第24-30页 |
| 3.1.1 膀胱癌细胞中含唾液酸糖链及唾液酸酶酶活的测定 | 第24-25页 |
| 3.1.2 唾液酸酶及唾液酸转移酶在不同转移潜能膀胱癌细胞中的表达 | 第25页 |
| 3.1.3 唾液酸酶Neu1在不同膀胱癌细胞中的表达 | 第25-26页 |
| 3.1.4 Neu1与膀胱癌患者病理的相关性研究 | 第26-30页 |
| 3.1.5 小结 | 第30页 |
| 3.2 上皮间质转化（EMT）过程对Neu1表达影响 | 第30-34页 |
| 3.2.1 TGF-β 诱导的EMT细胞模型构建 | 第30-31页 |
| 3.2.2 EMT发生后促进细胞迁移 | 第31-32页 |
| 3.2.3 EMT细胞模型中Sias表达水平研究 | 第32-33页 |
| 3.2.4 EMT发生后细胞中Neu1的表达减少 | 第33-34页 |
| 3.2.5 小结 | 第34页 |
| 3.3 Neu1对膀胱癌细胞行为的影响及其作用机制研究 | 第34-42页 |
| 3.3.1 过表达Neu1稳转细胞株的阳性筛选 | 第34-35页 |
| 3.3.2 过表达Neu1对细胞生物学行为的影响 | 第35-38页 |
| 3.3.3 Toll样受体（TLRs）在膀胱癌细胞系中的表达 | 第38页 |
| 3.3.4 Neu1与Toll样受体 3（TLR3）的表达关联 | 第38-40页 |
| 3.3.5 Neu1与TLR3的下游通路（NF-κB途径）之间的关系 | 第40-41页 |
| 3.3.6 小结 | 第41-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-44页 |
| 主要结论 | 第42页 |
| 展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录： 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |
