摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
前言 | 第14-18页 |
第一章 真核载体pcDNA3.0-38KD的构建及38KD蛋白的分泌性表达 | 第18-42页 |
1 材料 | 第18-22页 |
1.1 试剂 | 第18页 |
1.2 质粒载体及细胞 | 第18-19页 |
1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂配制 | 第20-22页 |
2 方法 | 第22-36页 |
2.1 携带结核杆菌38KD基因重组表达载体pcDNA3.0-38KD的构建及鉴定 | 第22-32页 |
2.2 重组载体质粒转染HEK 293T细胞 | 第32-34页 |
2.3 Western Blot检测目的蛋白的表达 | 第34-36页 |
3 结果 | 第36-40页 |
3.1 结核杆菌重组表达载体pcDNA3.0-38KD的构建及鉴定 | 第36-38页 |
3.2 重组质粒转染HEK 293T细胞 | 第38-39页 |
3.3 Western blot检测38KD蛋白在细胞中的表达 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-41页 |
5 小结 | 第41-42页 |
第二章 TB 38KD与eGFP双表达载体的构建及IRES-eGFP对38 KD蛋白表达的抑制作用 | 第42-55页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 试剂 | 第42-43页 |
1.2 质粒载体及细胞 | 第43页 |
1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
1.4 主要试剂配制 | 第44页 |
2 方法 | 第44-48页 |
2.1 38KD与eGFP双表达载体的构建及鉴定 | 第44-46页 |
2.2 携带38KD基因慢病毒载体的构建及鉴定 | 第46-48页 |
2.3 38KD双表达载体及慢病毒表达载体共转染HEK 293T细胞 | 第48页 |
2.4 Western Blot检测目的蛋白的表达及鉴定 | 第48页 |
3 结果 | 第48-52页 |
3.1 38KD与eGFP共表达载体pLV-38KD-IRES-eGFP的构建与鉴定 | 第48-49页 |
3.2 结核杆菌慢病毒表达载体pLV-38KD的构建及鉴定 | 第49-50页 |
3.3 重组质粒转染HEK 293T细胞 | 第50-51页 |
3.4 Western blot检测38KD蛋白在细胞中的表达 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
5 小结 | 第54-55页 |
第三章 结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的慢病毒载体的构建及其在293T细胞中分泌性表达 | 第55-66页 |
1 材料 | 第55页 |
2 方法 | 第55-61页 |
2.1 ESAT-6与eGFP双表达载体的构建及鉴定 | 第55-57页 |
2.2 携带ESAT-6基因慢病毒载体的构建及鉴定 | 第57-58页 |
2.3 携带ESAT-6基因慢病毒载体的构建及鉴定 | 第58-60页 |
2.4 慢病毒表达载体质粒转染HEK 293T细胞 | 第60页 |
2.5 Western Blot检测目的蛋白的表达及鉴定 | 第60-61页 |
3 结果 | 第61-63页 |
3.1 结核杆菌慢病毒双表达载体pLV-ESAT-6-IRES-eGFP的构建和鉴定 | 第61页 |
3.2 结核杆菌慢病毒表达载体pLV-ESAT-6的构建及鉴定 | 第61-62页 |
3.3 表达载体质粒转染HEK 293T细胞情况 | 第62页 |
3.4 Western blot检测ESAT-6蛋白在细胞中的表达 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
5 小结 | 第64-66页 |
第四章 ELISA方法鉴定结核分枝杆菌38KD蛋白与ESAT-6蛋白的免疫原性 | 第66-72页 |
1 材料 | 第66页 |
2 方法 | 第66-69页 |
3 结果 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71页 |
5 小结 | 第71-72页 |
总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
缩略词 | 第79-80页 |
硕士期间发表论文情况 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |