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高温胁迫下甜菜碱对PSⅡ修复循环保护机理研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-24页
    1.1 高温胁迫对植物的影响第12-14页
        1.1.1 高温对植物光合作用的影响第13页
        1.1.2 高温对植物ROS产生和清除的影响第13-14页
        1.1.3 高温对蛋白修复循环的影响第14页
    1.2 甜菜碱概述第14-20页
        1.2.1 甜菜碱合成途径第15-17页
        1.2.2 甜菜碱基因工程研究第17页
        1.2.3 甜菜碱的运输第17-18页
        1.2.4 甜菜碱对光合机构的保护作用第18-20页
    1.3 PSⅡ的修复循环第20-23页
        1.3.1 PSⅡ结构和功能第20-21页
        1.3.2 PSⅡ的光抑制第21-22页
        1.3.3 PSⅡ修复循环的蛋白酶第22-23页
    1.4 本研究的目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-35页
    2.1 实验材料与处理第24-26页
        2.1.1 实验材料第24页
        2.1.2 实验材料培养和处理第24页
        2.1.3 主要仪器、酶与实验试剂第24-25页
        2.1.4 PCR所用引物第25-26页
    2.2 实验方法第26-28页
        2.2.1 CTAB法提取植物基因组DNA第26-27页
        2.2.2 目的基因的PCR扩增第27-28页
    2.3 生理指标测定第28-29页
        2.3.1 甜菜碱含量测定第28页
        2.3.2 光合速率测定第28页
        2.3.3 叶绿素荧光测定第28-29页
        2.3.4 ROS生成测定第29页
        2.3.5 抗氧化酶活性的测定第29页
        2.3.6 卡尔文循环关键酶活性测定第29页
    2.4 分子生物学实验第29-34页
        2.4.1 Trizol法提取植物总RNA第29-30页
        2.4.2 反转录获得cDNA的第一条链第30-31页
        2.4.3 实时荧光定量PCR第31页
        2.4.4 类囊体膜的提取第31-32页
        2.4.5 可溶性蛋白的提取第32页
        2.4.6 聚丙烯酰氨凝胶电泳第32-33页
        2.4.7 半干法蛋白转移第33页
        2.4.8 免疫检测第33-34页
        2.4.9 ECL化学发光法显色第34页
    2.5 统计分析第34-35页
3 结果与分析第35-51页
    3.1 转基因植株的鉴定第35-36页
    3.2 转基因植株叶片内甜菜碱含量第36-37页
    3.3 甜菜碱对番茄植株净光合速率影响第37页
    3.4 甜菜碱对番茄植株叶绿素荧光变化的影响第37-40页
    3.5 甜菜碱对番茄植株体内ROS影响第40-41页
    3.6 甜菜碱对番茄植株体内抗氧化酶活性的影响第41-42页
    3.7 甜菜碱对番茄植株体内卡尔文循环关键酶活性的影响第42-43页
    3.8 甜菜碱对相关基因表达的影响第43-48页
        3.8.1 甜菜碱对抗氧化酶相关基因表达的影响第43-44页
        3.8.2 甜菜碱对D1蛋白基因表达的影响第44-45页
        3.8.3 甜菜碱对相关蛋白酶基因表达的影响第45-48页
    3.9 甜菜碱对番茄植株体内可溶性蛋白氧化水平的影响第48-49页
    3.10 甜菜碱对D1含量的影响第49-51页
4 讨论第51-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61页

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