| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第10-27页 |
| 1.1 聚乙二醇及其应用 | 第10-16页 |
| 1.1.1 聚乙二醇的理化性质 | 第10页 |
| 1.1.2 聚乙二醇的修饰优势及应用 | 第10-13页 |
| 1.1.3 聚乙二醇药物研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.4 聚乙二醇PEG修饰蛋白技术 | 第14-16页 |
| 1.2 聚乙二醇免疫机制研究进展 | 第16-21页 |
| 1.2.1 PEG药物的临床症状 | 第16-19页 |
| 1.2.2 PEG免疫机制的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 聚乙二醇修饰蛋白产物的分离纯化 | 第21-23页 |
| 1.3.1 凝胶过滤层析 | 第22页 |
| 1.3.2 超滤 | 第22页 |
| 1.3.3 离子交换层析 | 第22页 |
| 1.3.4 亲和层析 | 第22页 |
| 1.3.5 疏水相互作用层析和反相层析 | 第22-23页 |
| 1.4 PEG修饰蛋白产物表征方法 | 第23-25页 |
| 1.4.1 电泳法 | 第23页 |
| 1.4.2 圆二色光谱 | 第23-24页 |
| 1.4.3 动态光散射 | 第24页 |
| 1.4.4 凝胶过滤高效液相色谱 | 第24页 |
| 1.4.5 红外光谱 | 第24页 |
| 1.4.6 核磁共振技术 | 第24-25页 |
| 1.5 半抗原及载体蛋白 | 第25页 |
| 1.7 本课题研究意义和内容 | 第25-27页 |
| 1.7.1 本课题的立题依据 | 第25-26页 |
| 1.7.2 本课题的研究内容 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-39页 |
| 2.1 试剂与设备 | 第27-28页 |
| 2.1.1 试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.2 设备 | 第28页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-39页 |
| 2.2.1 载体蛋白的制备和纯化 | 第28-30页 |
| 2.2.2 载体蛋白-PEG的制备和纯化 | 第30页 |
| 2.2.3 PEG-载体蛋白的表征及结构分析 | 第30-34页 |
| 2.2.4 PEG-载体分子免疫学分析 | 第34-36页 |
| 2.2.5 PEG多克隆抗体的制备 | 第36-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-61页 |
| 3.1 载体蛋白的制备和纯化 | 第39-44页 |
| 3.1.1 载体蛋白的合成 | 第39-42页 |
| 3.1.2 载体蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| 3.2 载体蛋白-PEG的制备和纯化 | 第44-48页 |
| 3.2.1 TT-TT-PEG、BSA-TT-PEG制备和纯化 | 第44-46页 |
| 3.2.2 TT-PEG-1、TT-PEG-2的制备和纯化 | 第46-48页 |
| 3.2.3 OVA-PEG的制备和纯化 | 第48页 |
| 3.3 PEG-载体蛋白的表征和结构分析 | 第48-51页 |
| 3.3.1 PEG定量分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 凝胶过滤分析鉴定产物纯度 | 第49页 |
| 3.3.3 分子水动力学半径分析 | 第49-50页 |
| 3.3.4 修饰产物二级结构分析 | 第50-51页 |
| 3.4 PEG-载体蛋白及载体蛋白动物免疫分析 | 第51-57页 |
| 3.4.1 载体蛋白组血清免疫原性分析 | 第51页 |
| 3.4.2 PEG-载体蛋白组血清抗PEG分析 | 第51-55页 |
| 3.4.3 PEG-载体蛋白组血清抗原性分析 | 第55页 |
| 3.4.4 硫氰酸盐法测定抗PEG抗体亲和力 | 第55-56页 |
| 3.4.5 竞争性ELISA测定抗PEG抗体特异性 | 第56-57页 |
| 3.5 PEG多克隆抗体的制备 | 第57-61页 |
| 3.5.1 多克隆抗体效价的测定 | 第57页 |
| 3.5.2 多克隆抗体的纯化 | 第57-58页 |
| 3.5.3 酶标抗体的制备 | 第58-59页 |
| 3.5.4 酶标抗体灵敏度的检测 | 第59-61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 5 展望 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-72页 |
| 7 论文发表情况 | 第72-73页 |
| 8 致谢 | 第73-74页 |
| 附录:主要英文缩略词 | 第74页 |
