摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-16页 |
1 色素研究现状 | 第11-13页 |
1.1 黑色素细胞的发育 | 第11-12页 |
1.2 黑色素的合成 | 第12-13页 |
1.3 黑色素生成的调节 | 第13页 |
2 EDN3研究进展 | 第13-15页 |
2.1 EDN3主要功能及作用 | 第13-14页 |
2.2 EDN3与色素沉着 | 第14-15页 |
3 本研究的意义和内容 | 第15-16页 |
实验一 EDN3在不同毛色绵羊皮肤的表达与定位 | 第16-25页 |
1 实验材料 | 第16页 |
1.1 实验动物与材料 | 第16页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-20页 |
2.1 RNA的提取 | 第16-17页 |
2.2 cDNA的合成 | 第17页 |
2.3 设计引物及PCR扩增 | 第17-18页 |
2.4 qRT-PCR的扩增 | 第18-19页 |
2.5 总蛋白的提取 | 第19页 |
2.6 ELISA蛋白含量测定 | 第19页 |
2.7 免疫组织化学 | 第19-20页 |
3 结果 | 第20-25页 |
3.1 PCR扩增电泳结果 | 第20-21页 |
3.2 EDN3 mRNA的表达差异 | 第21-22页 |
3.3 ELISA试验结果 | 第22页 |
3.4 免疫组化结果 | 第22-25页 |
实验二 EDN3对不同毛色绵羊黑色素细胞的影响 | 第25-35页 |
1 实验材料与主要试剂 | 第25-26页 |
1.1 材料 | 第25页 |
1.2 主要仪器 | 第25页 |
1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-29页 |
2.1 黑色素细胞的复苏与传代 | 第26页 |
2.2 黑色素细胞活力的测定 | 第26页 |
2.3 Real-time PCR检测 | 第26-27页 |
2.4 提取细胞总蛋白 | 第27页 |
2.5 Western Blot | 第27-28页 |
2.6 Western Blot结果分析 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-35页 |
3.1 黑色素细胞的形态学观察 | 第29页 |
3.2 EDN3对细胞增殖率的影响 | 第29页 |
3.3 EDNRB、NRas及TYR mRNA的变化 | 第29-33页 |
3.4 Western blotting实验结果 | 第33-35页 |
讨论 | 第35-38页 |
1 EDN3在不同毛色绵羊皮肤的表达与定位 | 第35-36页 |
2 EDN3对不同毛色绵羊黑色素细胞的影响 | 第36-38页 |
全文结论及创新点 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
Abstract | 第43-44页 |
附录 | 第45-47页 |
致谢 | 第47页 |