| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-14页 |
| ·顺式调控元件简介 | 第10-11页 |
| ·启动子、增强子和沉默子 | 第10-11页 |
| ·增强子和沉默子作用机制 | 第11页 |
| ·植物中温度诱导的cis-element | 第11-12页 |
| ·鱼类低温响应顺式调控元件的研究 | 第12-13页 |
| ·顺式调控元件的预测和功能鉴定 | 第13-14页 |
| 第二章 斑马鱼低温响应顺式调控元件的功能鉴定 | 第14-25页 |
| ·前言 | 第14-15页 |
| ·材料和方法 | 第15-19页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-19页 |
| ·斑马鱼基因组DNA提取 | 第16页 |
| ·gstp1、ubc、apoba基因启动子目的片段扩增 | 第16-17页 |
| ·基于Tol2转座子的EGFP报告基因载体构建 | 第17-18页 |
| ·重组质粒启动子顺式调控元件的突变 | 第18页 |
| ·斑马鱼胚胎显微注射和低温处理 | 第18页 |
| ·斑马鱼卵RNA提取 | 第18-19页 |
| ·RNA的反转录和荧光定量PCR | 第19页 |
| ·定量结果分析 | 第19页 |
| ·结果 | 第19-24页 |
| ·gstp1、ubc、apoba基因启动子目的片段扩增结果 | 第19-20页 |
| ·Tol2转座子重组质粒的构建及突变 | 第20-21页 |
| ·绿色荧光鱼卵低温处理的结果 | 第21-22页 |
| ·egfp基因mRNA水平上的表达变化 | 第22-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 斑马鱼ciarta基因启动子低温诱导核心区域的鉴定 | 第25-37页 |
| ·前言 | 第25-26页 |
| ·材料与方法 | 第26-29页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·斑马鱼基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·ciarta启动子生物信息学分析和截短 | 第27页 |
| ·引物设计与合成 | 第27页 |
| ·ciarta基因启动子的扩增 | 第27页 |
| ·荧光素酶报告基因载体的构建 | 第27-28页 |
| ·细胞培养、转染及低温处理 | 第28页 |
| ·ZF4细胞RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RNA的反转录和荧光定量PCR | 第29页 |
| ·定量结果分析 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-35页 |
| ·ciarta基因启动子生物信息学分析和截短 | 第29-31页 |
| ·ciarta启动子截短片段PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| ·构建荧光素酶报告基因重组质粒 | 第32-33页 |
| ·pGL4.10重组质粒转染ZF4细胞及定量PCR | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 结论与展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
