| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·微藻 | 第10-11页 |
| ·微藻与生物柴油 | 第11-12页 |
| ·微藻的经济应用价值 | 第12-14页 |
| ·微藻的遗传转化体系 | 第14-16页 |
| ·微拟球藻 | 第16-17页 |
| ·多不饱和脂肪酸 | 第17-19页 |
| ·脂肪酸去饱和酶和脂肪酸延长酶 | 第19-22页 |
| ·转录组测序技术 | 第22页 |
| ·研究目的及意义 | 第22-23页 |
| ·研究创新点 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-42页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·实验藻种 | 第24页 |
| ·主要的实验试剂及仪器 | 第24-28页 |
| ·微拟球藻培养周期转录组测定实验方法 | 第28-31页 |
| ·微拟球藻的培养与生长周期的测定 | 第28页 |
| ·RNA的提取与RNA-seq测序 | 第28-29页 |
| ·微拟球藻中性脂含量的测定 | 第29-30页 |
| ·微拟球藻脂肪酸含量的测定 | 第30页 |
| ·微拟球藻亚显微结构分析 | 第30-31页 |
| ·统计分析 | 第31页 |
| ·转基因微拟球藻的实验方法 | 第31-42页 |
| ·微拟球藻的培养 | 第31页 |
| ·全基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·基因NoD6、PtD5b和PtD6的扩增克隆 | 第32-34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34页 |
| ·大肠杆菌转化克隆以及质粒的提取 | 第34-35页 |
| ·测序验证 | 第35-36页 |
| ·电击穿孔转化微拟球藻 | 第36-37页 |
| ·转化藻的基因组PCR分析鉴定 | 第37页 |
| ·转化藻荧光定量PCR分析 | 第37-40页 |
| ·转化藻脂肪酸的提取及其组成成分分析 | 第40页 |
| ·转化藻中性脂含量的测定 | 第40页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测油体的变化 | 第40-41页 |
| ·光合效率测定 | 第41页 |
| ·扫描电镜检测细胞结构的变化 | 第41页 |
| ·统计分析 | 第41-42页 |
| 第三章 培养周期中微拟球藻基因表达差异分析 | 第42-57页 |
| ·实验结果 | 第42-53页 |
| ·微拟球藻培养的生长周期曲线以及中性脂含量变化 | 第42-43页 |
| ·微拟球藻的不同生长时期脂肪酸的变化 | 第43页 |
| ·微拟球藻的不同生长时期的电镜结果 | 第43-44页 |
| ·微拟球藻对数期和平台期转录组数据的初步分析 | 第44-46页 |
| ·微拟球藻多不饱和脂肪酸合成通路图 | 第46-50页 |
| ·微拟球藻平台期脂质合成途径 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 微拟球藻 Δ6 去饱和酶NoD6的功能研究 | 第57-66页 |
| ·前言 | 第57-58页 |
| ·实验结果 | 第58-64页 |
| ·NoD6蛋白序列结构分析 | 第58页 |
| ·NoD6基因的扩增及载体构建 | 第58-59页 |
| ·转化藻NoD6的PCR鉴定 | 第59-60页 |
| ·转化藻NoD6的生长周期以及光合作用的测定 | 第60-61页 |
| ·转化藻NoD6中性脂含量的测定 | 第61-62页 |
| ·转化藻NoD6亚显微结构分析 | 第62-63页 |
| ·转化藻NoD6脂肪酸成分分析 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第五章 微拟球藻异源表达三角褐指藻 Δ5 去饱和酶PtD5b | 第66-75页 |
| ·前言 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-73页 |
| ·PtD5b蛋白序列结构分析 | 第67页 |
| ·PtD5b基因的扩增，克隆及表达载体的构建 | 第67-68页 |
| ·转化藻PtD5b的验证 | 第68-69页 |
| ·转化藻PtD5b的生长周期的测定 | 第69-70页 |
| ·转化藻PtD5b中性脂含量的检测 | 第70-71页 |
| ·转化藻PtD5b亚细胞显微结构分析 | 第71-72页 |
| ·转化藻PtD5b脂肪酸成分分析 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第六章 在微拟球藻中异源表达三角褐指藻PtD5b和PtD6 | 第75-89页 |
| ·前言 | 第75-76页 |
| ·实验结果 | 第76-87页 |
| ·PtD5b蛋白序列结构分析 | 第76-77页 |
| ·PtD5b和PtD6的PCR扩增以及载体构建 | 第77-78页 |
| ·转化藻PtD5bD6的PCR鉴定 | 第78-79页 |
| ·转化藻PtD5bD6的qPCR分析结果 | 第79-80页 |
| ·转化藻PtD5bD6生长曲线 | 第80-81页 |
| ·转化藻PtD5bD6中性脂含量 | 第81-83页 |
| ·转化藻PtD5bD6的激光共聚焦分析 | 第83-84页 |
| ·转化藻PtD5bD6的亚细胞结构电镜分析 | 第84-85页 |
| ·转化藻PtD5b D6脂肪酸成分分析 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 总结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 在校期间发表的论文 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
