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鹅细小病毒NS基因PCR和单抗竞争ELISA检测方法的建立及应用

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-22页
   ·鹅细小病毒概述第11-14页
     ·GPV 的分类地位第11-12页
     ·GPV 的形态结构和理化特性第12-13页
     ·GPV 的宿主范围和培养特性第13-14页
   ·GPV 分子生物学研究进展第14-17页
     ·GPV 基因组的结构特点第14-15页
     ·GPV 基因组的转录与复制第15页
     ·GPV 基因组编码的蛋白第15-17页
   ·鹅细小病毒病第17-19页
     ·流行病学第17-18页
     ·临床症状及病理变化第18-19页
     ·防治及特异性治疗第19页
   ·鹅细小病毒单克隆抗体的研究进展第19-20页
   ·鹅细小病毒病检测方法的研究进展第20-21页
     ·病原学检测方法第20页
     ·血清学检测方法第20-21页
   ·研究的目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·试验材料第22-24页
     ·病毒、菌株、细胞与实验动物第22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·血清及琼扩抗原第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·引物第24页
   ·试验方法第24-32页
     ·鹅细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用第24-27页
     ·抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备第27-30页
     ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 检测方法的建立及应用第30-32页
3 结果与分析第32-47页
   ·鹅细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用第32-35页
     ·PCR 条件优化结果第32页
     ·PCR 扩增结果第32-33页
     ·重组质粒pMD18-T-NS 的鉴定第33页
     ·PCR 产物测序结果第33页
     ·PCR 的敏感性试验第33页
     ·PCR 的特异性试验第33-35页
     ·PCR 的重复性试验第35页
     ·PCR 的适应性试验第35页
     ·临床应用第35页
   ·抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备第35-40页
     ·免疫原和检测抗原的 SDS-PAGE 分析第35页
     ·间接 ELISA 筛选方法的建立第35-36页
     ·细胞融合及杂交瘤细胞株的筛选第36页
     ·杂交瘤细胞的鉴定第36-37页
     ·单克隆抗体特性的鉴定第37-40页
   ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 检测方法的建立及应用第40-47页
     ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 检测方法的建立第40-43页
     ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 敏感性试验第43-44页
     ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 特异性试验第44页
     ·鹅细小病毒抗体竞争 ELISA 重复性试验第44-45页
     ·临床样本的检测第45页
     ·检测病毒样粒子免疫雏鹅后的血清抗体消长规律第45页
     ·竞争 ELISA 与琼扩试验的比较第45-47页
4 讨论第47-50页
   ·PCR 检测方法的建立第47页
   ·GPV 单克隆抗体的制备第47-48页
     ·免疫原和检测抗原的选择第47页
     ·单克隆抗体的制备第47页
     ·单克隆抗体的选择第47-48页
   ·C-ELISA 检测方法的建立第48-49页
     ·C-ELISA 检测抗原的选择第48页
     ·C-ELISA 检测方法的优化第48-49页
   ·免疫抗体消长规律的测定第49-50页
5 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58页

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