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牛Asia1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白B细胞线性抗原表位鉴定

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-24页
   ·口蹄疫的流行及其危害第11-12页
   ·口蹄疫病毒的生物学特性第12-15页
     ·口蹄疫病毒的形态特征和理化特性第12-13页
     ·病毒基因组结构及功能第13-15页
   ·口蹄疫病毒的复制和抗感染免疫机制第15页
   ·口蹄疫实验室检测方法进展第15-21页
     ·病毒分离第16页
     ·血清学检测技术第16-19页
     ·分子生物学及其他检测技术第19-21页
   ·口蹄疫病毒3A 非结构蛋白研究进展第21-22页
   ·研究的目的和意义第22-24页
2 材料与方法第24-38页
   ·实验材料第24-25页
     ·质粒、载体与菌种第24页
     ·工具酶第24页
     ·分子生物学试剂第24页
     ·生化试剂第24页
     ·血清及酶标抗体第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·实验方法第25-38页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 基因的克隆、表达及抗原性鉴定第25-29页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的初步鉴定第29-32页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的精确定位第32-35页
     ·3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的序列比对分析第35页
     ·3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的突变体构建及抗原性鉴定第35-37页
     ·3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位与 Asia1 型口蹄疫感染阳性血清的反应第37-38页
3 结果与分析第38-54页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 基因的克隆、表达及抗原性鉴定第38-41页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 基因片段的 PCR 扩增结果第38页
     ·克隆载体pMD18-T-Asia1-3A 构建及序列测定第38页
     ·原核表达载体pET-32a-Asia1-3A 的构建第38-39页
     ·Asia1 口蹄疫病毒3A 基因在大肠杆菌中的诱导表达、纯化第39-40页
     ·Asia1-3A 基因表达蛋白的 Western blot 鉴定第40-41页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的初步鉴定第41-45页
     ·原核表达载体pET-32a-Asia1-A1-A15 的构建第41-42页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒 A1-A15 在大肠杆菌中的诱导表达与纯化第42-43页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒 A1-A15 表达蛋白的 Western blot 分析第43-45页
     ·Asia1 型口蹄疫病毒 A1-A15 表达蛋白的 ELISA 分析第45页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的精确定位第45-49页
     ·短肽原核表达载体的构建第45-48页
     ·短肽基因在大肠杆菌中的诱导表达与纯化第48-49页
     ·表达短肽融合蛋白的 Western blot 分析第49页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的分布第49-50页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的序列比对分析第50-51页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的突变体构建及抗原性鉴定第51-52页
     ·表位突变体表达载体的构建第51页
     ·表位突变体的诱导表达第51页
     ·表位突变体的 Western blot 分析第51-52页
   ·3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位与 Asia1 型口蹄疫感染阳性血清的反应第52-54页
4 讨论第54-57页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白作为表位筛选的目的蛋白的依据第54页
   ·小于20 个氨基酸的短肽基因的克隆策略第54页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的精确定位第54-55页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位突变体的构建第55页
   ·Asia1 型口蹄疫病毒3A 非结构蛋白 B 细胞线性表位的应用前景第55-57页
5 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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