致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
缩写表 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-20页 |
·植物源和库的关系 | 第12页 |
·植物体内糖的运输 | 第12页 |
·植物中的糖转运蛋白 | 第12页 |
·桃蔗糖转运蛋白研究目的与意义 | 第12-13页 |
·植物 SUT 基因的克隆 | 第13-14页 |
·SUTs 的结构和分类 | 第14-15页 |
·SUTs 的结构 | 第14-15页 |
·SUTs 的分类 | 第15页 |
·SUTs 的表达定位和功能等方面的研究 | 第15-18页 |
·参与蔗糖/质子耦联的装载和卸载 | 第15-16页 |
·参与蔗糖的贮藏 | 第16页 |
·参与不同库组织的蔗糖供给 | 第16-17页 |
·参与信号转导 | 第17页 |
·参与蛋白互作 | 第17-18页 |
·参与一些特定的生理过程 | 第18页 |
·蔗糖转运蛋白表达的调控因素 | 第18页 |
·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第18-19页 |
·研究植物基因功能的策略和方法 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20-22页 |
3 材料与方法 | 第22-32页 |
·试验材料 | 第22-25页 |
·供试材料 | 第22-23页 |
·营养器官 | 第22页 |
·生殖器官 | 第22-23页 |
·硒处理材料 | 第23页 |
·蔗糖含量的测定 | 第23页 |
·供试仪器 | 第23页 |
·主要药品和试剂 | 第23页 |
·菌株与载体 | 第23页 |
·培养基的配制 | 第23页 |
·SDS-PAGE 电泳所用试剂及配制 | 第23-25页 |
·试验方法 | 第25-32页 |
·桃不同组织总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
·桃叶片总 RNA 的提取 | 第25页 |
·桃果实总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
·桃枝条韧皮部、萼片、雌蕊、雄蕊总 RNA 的提取 | 第26页 |
·RNA 的纯度与浓度检测 | 第26页 |
·RNA 的完整性检测 | 第26页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第26-27页 |
·桃 SUT 基因的克隆 | 第27-30页 |
·目的片段的 PCR 扩增 | 第27-28页 |
·PCR 扩增产物的检测和回收纯化 | 第28页 |
·回收产物与 pMD18-T 载体的连接 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28-29页 |
·含目的片段的连接产物对大肠杆菌的转化 | 第29页 |
·菌液 PCR 鉴定 | 第29页 |
·重组质粒的保存 | 第29页 |
·重组质粒的提取 | 第29-30页 |
·SUT 基因序列分析 | 第30页 |
·SUT 基因组织特异性表达分析 | 第30-31页 |
·成熟期 PpSUT1 基因富硒应答表达分析 | 第31页 |
·桃 PpSUT1 原核表达载体的构建 | 第31页 |
·目的片段与表达载体 pMAL-c2x 的酶切回收 | 第31页 |
·目的片段与表达载体的连接 | 第31页 |
·重组质粒 pMAL-c2x –PpSUT1 的表达 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-46页 |
·桃不同组织总 RNA 的提取 | 第32页 |
·内参基因的检测 | 第32-33页 |
·桃 SUT1 基因克隆及序列分析 | 第33-39页 |
·同源性分析 | 第36-38页 |
·PpSUT1 编码氨基酸的跨膜结构分析 | 第38-39页 |
·桃果实中蔗糖含量的变化 | 第39页 |
·PpSUT1 基因的时空表达分析 | 第39-42页 |
·PpSUT1 基因的亚硒酸钠应答分析 | 第42页 |
·原核表达 | 第42-46页 |
·桃 pMAL-c2x-PpSUT1 原核表达载体的构建 | 第42-44页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第44-46页 |
5 讨论 | 第46-48页 |
·桃的 RNA 提取 | 第46页 |
·SUT 基因的克隆 | 第46页 |
·SUT 基因的序列分析 | 第46-47页 |
·SUT 基因的时空表达 | 第47页 |
·pMAL-c2x-PpSUT1 原核表达 | 第47-48页 |
6 结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
Abstract | 第60-61页 |