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双孢蘑菇乙烯生物合成途径及与覆土出菇的关系研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-21页
   ·双孢蘑菇栽培历史及发展概况第10-11页
   ·双孢蘑菇的发育机理第11-14页
     ·双孢蘑菇的生活史第11-12页
     ·双孢蘑菇的形态特征和生长过程中的生理生化要求第12-13页
     ·双孢蘑菇由营养生长转向生殖生长的必要条件第13-14页
   ·双孢蘑菇覆土出菇机理的研究进展第14-16页
   ·乙烯的生物合成途径和生物作用机理第16-20页
     ·乙烯的生物合成途径的类型第16-17页
     ·乙烯的生理作用第17-18页
     ·乙烯的作用机理第18-19页
     ·乙烯的信号传导第19-20页
     ·乙烯作用抑制剂的研究进展第20页
   ·双孢蘑菇中乙烯代谢途径的研究进展第20-21页
2 引言第21页
3 材料与方法第21-30页
   ·实验材料与仪器第21-23页
     ·实验材料第21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验仪器第21-22页
     ·主要培养基第22-23页
       ·牛肉膏蛋白胨培养基第22页
       ·马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基第22页
       ·马铃薯葡萄糖液体培养基第22页
       ·DF 盐液体培养基第22页
       ·改变氮源的DF 盐液体培养基第22页
       ·改变氮源的DF 盐固体培养基第22-23页
       ·TSB 培养基第23页
       ·LB 培养基第23页
       ·双孢蘑菇栽培试验培养料的配方第23页
   ·实验方法第23-30页
     ·双孢蘑菇培养料和覆土中细菌的计数方法第23-24页
     ·能在改变氮源的DF 盐固体培养基生长的菌种的分离、纯化和鉴定第24-27页
       ·菌种的分离纯化第24页
       ·根据生理生化特性鉴定菌种(经典方法)第24页
       ·16S1DNA 鉴定(分子生物学方法)第24-27页
       ·鉴定后菌种的ACC脱氨酶基因的克隆第27页
       ·鉴定后菌种的ACC脱氨酶活性测定第27页
     ·双孢蘑菇经ACC 产生乙烯相关物质测定和酶基因克隆、酶活性测定第27-30页
       ·双孢蘑菇产生乙烯的测定方法第27页
       ·双孢蘑菇中ACC 的测定方法第27-28页
       ·ACC 合成酶活性测定第28页
       ·ACC 氧化酶体内活性测定第28页
       ·ACC 氧化酶体外活性测定第28-29页
       ·双孢蘑菇总RNA 的提取第29-30页
4 结果与分析第30-51页
   ·双孢蘑菇培养料和覆土在栽培的各时期细菌与ACC 降解菌变化趋势第30-33页
     ·双孢蘑菇培养料在栽培各个时期细菌与ACC 降解菌变化趋势第30-31页
     ·双孢蘑菇覆土在栽培各个时期细菌与ACC 降解菌变化趋势第31-33页
   ·双孢蘑菇灭菌覆土中添加ACC 降解菌对出菇的影响第33-34页
   ·覆土中ACC 降解菌的分离纯化和菌株鉴定第34-36页
   ·覆土中ACC 降解菌的ACC 脱氨酶基因克隆第36-39页
   ·覆土中ACC 降解菌酶活力的检测结果第39页
   ·双孢蘑菇生长过程中ACC 和乙烯产生量的测定结果第39-51页
     ·乙烯含量的测定第39-42页
       ·乙烯标准曲线的制定第39-40页
       ·双孢蘑菇在不同培养基中产乙烯的量第40页
       ·双孢蘑菇在不同培养基中生长过程中乙烯产量分析实验第40-41页
       ·乙烯对双孢蘑菇生长速度的影响第41-42页
     ·ACC 含量的测定第42-43页
       ·ACC标准曲线的制定第42页
       ·双孢蘑菇在PDA 液体培养基中ACC 产量分析实验第42-43页
     ·乙烯前体物和抑制剂对双孢蘑菇 ACC 合成酶和氧化酶活性的影响第43-45页
       ·乙烯前体物对 ACC 合成酶和氧化酶活性影响第43-44页
       ·双孢蘑菇ACC 合成酶和氧化酶抑制剂对其酶活性的影响第44-45页
     ·双孢蘑菇中ACC 合成酶和氧化酶的克隆第45-51页
       ·双孢蘑菇ACC 合成酶基因1(ACS1)的克隆及序列分析第45-48页
       ·双孢蘑菇ACC 合成酶基因2(ACS2)的克隆及序列分析第48-49页
       ·双孢蘑菇ACC 氧化酶基因的克隆及序列分析第49-51页
5. 结论与讨论第51-53页
   ·双孢蘑菇出菇时覆土中优势菌种鉴定及其在覆土中的重要作用第51-52页
   ·双孢蘑菇中乙烯的 ACC 代谢途径的研究及其意义第52-53页
6 参考文献第53-60页
Abstract第60-62页

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