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海马齿盐适应细胞形态、结构、蛋白变化及耐盐基因功能初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
缩略词/Abbreviations第9-15页
1 前言第15-33页
   ·土壤盐渍化第15-16页
   ·土壤盐渍化对植株生长发育的影响第16-17页
   ·盐生植物及其研究意义第17-18页
   ·盐生植物的类型第18-19页
   ·盐胁迫对植物的伤害第19-21页
   ·盐生植物的抗盐的机理第21-24页
     ·形态适应在植物耐盐性中的作用第21页
     ·渗透调节的作用第21-23页
     ·离子在细胞水平上的区隔化第23-24页
   ·植物耐盐的分子生物学研究和植物耐盐基因工程第24-25页
   ·蛋白质组学技术在植物耐盐研究中应用及研究进展第25-27页
   ·盐生植物海马齿研究进展第27-31页
   ·本研究的目的和意义第31-33页
2 材料与方法第33-55页
   ·材料与试剂第33页
     ·植物材料第33页
     ·菌株和载体第33页
     ·SRTG152同源基因第33页
   ·试剂第33-34页
     ·生化试剂第33页
     ·仪器第33-34页
   ·实验方法第34-55页
     ·海马齿总RNA提取方法第34-35页
     ·海马齿SRTG152同源基因分离第35-41页
       ·反转录第35页
       ·PCR扩增第35-41页
         ·引物设计第35-36页
         ·PCR反应第36页
         ·目的片段的回收第36-37页
         ·连接T载体第37-38页
         ·连接产物转化E.coli DH5a感受态细胞第38页
           ·DH5a感受态细胞的制备方法第38页
           ·转化第38页
         ·重组子的鉴定第38-41页
           ·质粒提取方法第39-40页
           ·质粒PCR鉴定第40-41页
           ·质粒酶切鉴定第41页
           ·测序第41页
     ·SRTG152基因的功能研究第41-47页
       ·SRTG152基因在大肠杆菌中的功能分析第41页
       ·SRTG152基因在酵母(INVSc1)中的功能分析第41-44页
         ·酵母表达载体构建第42-43页
         ·酵母感受态的制备第43页
         ·转化酵母第43页
         ·SRTG152基因的功能分析第43-44页
       ·SRTG152基因在拟南芥中的功能分析第44-47页
         ·植物表达载体构建第44页
         ·农杆菌感受态细胞制备第44-45页
         ·转化农杆菌GV3101(冷冻法转化法)第45页
         ·拟南芥培养及其管理第45页
         ·农杆菌真空转化菌悬液制备第45-46页
         ·重组农杆菌的筛选与鉴定第46页
         ·真空渗入法转化拟南芥第46-47页
         ·T1代拟南芥抗性筛选及抗性苗移栽第47页
         ·SRTG152基因的功能分析第47页
     ·不同处理条件下海马齿形态特征和生理特征第47-49页
       ·海马齿材料种植第48页
       ·叶片表皮细胞及气孔的观察第48页
       ·蛋白质类物质的积累第48-49页
         ·汞-溴酚蓝石蜡切片第48-49页
         ·激光共聚焦技术第49页
     ·海马齿电子显微镜观察第49-50页
       ·透射电子显微镜观察第49页
       ·扫描电子显微镜观察第49-50页
       ·EDS-SEM联用元素半定量微区分析第50页
     ·海马齿比较蛋白质组学研究第50-55页
       ·海马齿蛋白质提取方法第50-51页
       ·海马齿蛋白质定量第51页
       ·SDS-PAGE单向电泳第51页
       ·双向电泳第51-52页
       ·蛋白质染色方法第52页
         ·考马斯亮蓝R-350染色第52页
         ·银染第52页
       ·图像采集第52页
       ·图像分析第52-53页
       ·差异点的标示第53页
       ·统计学方法第53页
       ·肽质量指纹图谱鉴定蛋白质第53-54页
       ·MS/MS鉴定第54页
       ·数据整理第54-55页
3 实验结果第55-100页
   ·海马齿形态结构盐适应研究第55-68页
     ·海马齿盐适应形态变化第55页
     ·海马齿叶片表皮细胞光学显微镜观察第55-56页
     ·茎、叶组织中蛋白质类物质积累观察第56-58页
     ·海马齿茎的扫描电镜观察第58-60页
     ·海马齿茎、叶组织中元素微区分析第60-64页
     ·盐胁迫下海马齿叶肉细胞超微结构观察第64-67页
     ·小结第67-68页
   ·海马齿比较蛋白质组学研究第68-82页
     ·BPP法提取海马齿蛋白质第68-69页
     ·海马齿蛋白质表达差异分析第69-70页
       ·双向电泳第69页
       ·差异点分析第69-70页
       ·海马齿蛋白质表达情况分析第70页
     ·MALDI-TOF-MS质谱第70-76页
       ·目标蛋白点选择第70-71页
       ·MALDI-TOF-MS第71-76页
     ·MALDI-TOF-TOF-MS质谱第76-82页
   ·SRTG152基因分离及其功能初步研究第82-100页
     ·海马齿RNA提取第82页
     ·RT-PCR第82-83页
     ·T载体连接第83-84页
     ·序列分析第84-86页
     ·SRTG152基因功能预测第86-87页
     ·SRTG152基因在酵母中功能鉴定第87-94页
     ·SRTG152基因在拟南芥中功能初步鉴定第94-100页
4 讨论第100-110页
   ·海马齿盐适应叶片结构的变化第100-103页
     ·海马齿盐适应叶片表皮细胞盐适应结构变化第100页
     ·海马齿盐适应叶肉细胞质膜系统结构变化第100-101页
     ·海马齿盐适应叶绿体结构变化第101-103页
     ·海马齿盐适应线粒体结构变化第103页
   ·海马齿耐盐性与Na、K和Cl元素的关系第103-105页
   ·海马齿耐盐性与其它物质积累的关系第105页
   ·海马齿植物盐胁迫与蛋白质表达第105-108页
     ·与抗性相关的蛋白第106页
     ·与抗氧化酶和解毒相关的蛋白第106-107页
     ·与光合作用相关的蛋白第107-108页
     ·与碳代谢和能量相关的蛋白第108页
     ·与信号传导相关蛋白和其它蛋白第108页
   ·海马中分离的SRTG152-I基因耐盐性分析第108-110页
5 结论第110-112页
参考文献第112-121页
致谢第121-122页
附录第122-124页

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