摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
缩略词/Abbreviations | 第9-15页 |
1 前言 | 第15-33页 |
·土壤盐渍化 | 第15-16页 |
·土壤盐渍化对植株生长发育的影响 | 第16-17页 |
·盐生植物及其研究意义 | 第17-18页 |
·盐生植物的类型 | 第18-19页 |
·盐胁迫对植物的伤害 | 第19-21页 |
·盐生植物的抗盐的机理 | 第21-24页 |
·形态适应在植物耐盐性中的作用 | 第21页 |
·渗透调节的作用 | 第21-23页 |
·离子在细胞水平上的区隔化 | 第23-24页 |
·植物耐盐的分子生物学研究和植物耐盐基因工程 | 第24-25页 |
·蛋白质组学技术在植物耐盐研究中应用及研究进展 | 第25-27页 |
·盐生植物海马齿研究进展 | 第27-31页 |
·本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
2 材料与方法 | 第33-55页 |
·材料与试剂 | 第33页 |
·植物材料 | 第33页 |
·菌株和载体 | 第33页 |
·SRTG152同源基因 | 第33页 |
·试剂 | 第33-34页 |
·生化试剂 | 第33页 |
·仪器 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-55页 |
·海马齿总RNA提取方法 | 第34-35页 |
·海马齿SRTG152同源基因分离 | 第35-41页 |
·反转录 | 第35页 |
·PCR扩增 | 第35-41页 |
·引物设计 | 第35-36页 |
·PCR反应 | 第36页 |
·目的片段的回收 | 第36-37页 |
·连接T载体 | 第37-38页 |
·连接产物转化E.coli DH5a感受态细胞 | 第38页 |
·DH5a感受态细胞的制备方法 | 第38页 |
·转化 | 第38页 |
·重组子的鉴定 | 第38-41页 |
·质粒提取方法 | 第39-40页 |
·质粒PCR鉴定 | 第40-41页 |
·质粒酶切鉴定 | 第41页 |
·测序 | 第41页 |
·SRTG152基因的功能研究 | 第41-47页 |
·SRTG152基因在大肠杆菌中的功能分析 | 第41页 |
·SRTG152基因在酵母(INVSc1)中的功能分析 | 第41-44页 |
·酵母表达载体构建 | 第42-43页 |
·酵母感受态的制备 | 第43页 |
·转化酵母 | 第43页 |
·SRTG152基因的功能分析 | 第43-44页 |
·SRTG152基因在拟南芥中的功能分析 | 第44-47页 |
·植物表达载体构建 | 第44页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第44-45页 |
·转化农杆菌GV3101(冷冻法转化法) | 第45页 |
·拟南芥培养及其管理 | 第45页 |
·农杆菌真空转化菌悬液制备 | 第45-46页 |
·重组农杆菌的筛选与鉴定 | 第46页 |
·真空渗入法转化拟南芥 | 第46-47页 |
·T1代拟南芥抗性筛选及抗性苗移栽 | 第47页 |
·SRTG152基因的功能分析 | 第47页 |
·不同处理条件下海马齿形态特征和生理特征 | 第47-49页 |
·海马齿材料种植 | 第48页 |
·叶片表皮细胞及气孔的观察 | 第48页 |
·蛋白质类物质的积累 | 第48-49页 |
·汞-溴酚蓝石蜡切片 | 第48-49页 |
·激光共聚焦技术 | 第49页 |
·海马齿电子显微镜观察 | 第49-50页 |
·透射电子显微镜观察 | 第49页 |
·扫描电子显微镜观察 | 第49-50页 |
·EDS-SEM联用元素半定量微区分析 | 第50页 |
·海马齿比较蛋白质组学研究 | 第50-55页 |
·海马齿蛋白质提取方法 | 第50-51页 |
·海马齿蛋白质定量 | 第51页 |
·SDS-PAGE单向电泳 | 第51页 |
·双向电泳 | 第51-52页 |
·蛋白质染色方法 | 第52页 |
·考马斯亮蓝R-350染色 | 第52页 |
·银染 | 第52页 |
·图像采集 | 第52页 |
·图像分析 | 第52-53页 |
·差异点的标示 | 第53页 |
·统计学方法 | 第53页 |
·肽质量指纹图谱鉴定蛋白质 | 第53-54页 |
·MS/MS鉴定 | 第54页 |
·数据整理 | 第54-55页 |
3 实验结果 | 第55-100页 |
·海马齿形态结构盐适应研究 | 第55-68页 |
·海马齿盐适应形态变化 | 第55页 |
·海马齿叶片表皮细胞光学显微镜观察 | 第55-56页 |
·茎、叶组织中蛋白质类物质积累观察 | 第56-58页 |
·海马齿茎的扫描电镜观察 | 第58-60页 |
·海马齿茎、叶组织中元素微区分析 | 第60-64页 |
·盐胁迫下海马齿叶肉细胞超微结构观察 | 第64-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
·海马齿比较蛋白质组学研究 | 第68-82页 |
·BPP法提取海马齿蛋白质 | 第68-69页 |
·海马齿蛋白质表达差异分析 | 第69-70页 |
·双向电泳 | 第69页 |
·差异点分析 | 第69-70页 |
·海马齿蛋白质表达情况分析 | 第70页 |
·MALDI-TOF-MS质谱 | 第70-76页 |
·目标蛋白点选择 | 第70-71页 |
·MALDI-TOF-MS | 第71-76页 |
·MALDI-TOF-TOF-MS质谱 | 第76-82页 |
·SRTG152基因分离及其功能初步研究 | 第82-100页 |
·海马齿RNA提取 | 第82页 |
·RT-PCR | 第82-83页 |
·T载体连接 | 第83-84页 |
·序列分析 | 第84-86页 |
·SRTG152基因功能预测 | 第86-87页 |
·SRTG152基因在酵母中功能鉴定 | 第87-94页 |
·SRTG152基因在拟南芥中功能初步鉴定 | 第94-100页 |
4 讨论 | 第100-110页 |
·海马齿盐适应叶片结构的变化 | 第100-103页 |
·海马齿盐适应叶片表皮细胞盐适应结构变化 | 第100页 |
·海马齿盐适应叶肉细胞质膜系统结构变化 | 第100-101页 |
·海马齿盐适应叶绿体结构变化 | 第101-103页 |
·海马齿盐适应线粒体结构变化 | 第103页 |
·海马齿耐盐性与Na、K和Cl元素的关系 | 第103-105页 |
·海马齿耐盐性与其它物质积累的关系 | 第105页 |
·海马齿植物盐胁迫与蛋白质表达 | 第105-108页 |
·与抗性相关的蛋白 | 第106页 |
·与抗氧化酶和解毒相关的蛋白 | 第106-107页 |
·与光合作用相关的蛋白 | 第107-108页 |
·与碳代谢和能量相关的蛋白 | 第108页 |
·与信号传导相关蛋白和其它蛋白 | 第108页 |
·海马中分离的SRTG152-I基因耐盐性分析 | 第108-110页 |
5 结论 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
附录 | 第122-124页 |