目录 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 前言 | 第14-31页 |
·课题的提出 | 第14-15页 |
·文献综述 | 第15-26页 |
·模式植物成花调控研究 | 第15-16页 |
·光周期途径(photoperiod pathway) | 第16-17页 |
·赤霉素途径(GA pathway) | 第17-18页 |
·春化途径(vernalization pathway) | 第18-20页 |
·自主途径(autonomous pathway) | 第20-22页 |
·年龄途径(ageing pathway) | 第22-23页 |
·常温途径(ambient temperature pathway) | 第23-24页 |
·开花调控途径的整合 | 第24-25页 |
·开花基因表达调控方式 | 第25-26页 |
·多年生植物成花调控研究 | 第26-28页 |
·柑橘成花调控研究进展 | 第28-30页 |
·柑橘成花习性 | 第28-29页 |
·柑橘成花调控机理进展 | 第29-30页 |
·本研究的目的、内容与意义 | 第30-31页 |
第二章 普通枳和早实枳成花转变期基因差异表达分析 | 第31-53页 |
·前言 | 第31页 |
·材料和方法 | 第31-35页 |
·材料 | 第31页 |
·总RNA提取 | 第31-32页 |
·mRNA分离 | 第32-33页 |
·第一链cDNA合成 | 第33页 |
·实时定量PCR检测 | 第33-34页 |
·大规模平行测序技术(MPSS) | 第34页 |
·MPSS数据分析 | 第34-35页 |
·差异表达基因的功能分类 | 第35页 |
·基因差异表达的验证 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-49页 |
·转录组测序结果组装 | 第35-37页 |
·早实枳和普通枳中MPSS标签序列的差异表达 | 第37页 |
·Unigenes的长度分布及注释 | 第37-38页 |
·差异表达基因的功能分类 | 第38-40页 |
·筛选成花调控基因 | 第40-46页 |
·验证差异表达基因 | 第46-49页 |
·讨论 | 第49-53页 |
·转录组测序为成花转变研究提供大量信息 | 第49页 |
·枳成花转变涉及所有的成花调控途径 | 第49-51页 |
·成花转变阶段表达差异基因参与成花调控 | 第51-53页 |
第三章 枳PtFCA的分离、表达分析及功能鉴定 | 第53-87页 |
·前言 | 第53页 |
·材料和方法 | 第53-62页 |
·材料 | 第53-54页 |
·总RNA提取 | 第54页 |
·mRNA分离 | 第54页 |
·第一链cDNA合成 | 第54-55页 |
·实时定量PCR检测 | 第55页 |
·3’RACE | 第55-56页 |
·载体及菌株 | 第56页 |
·超表达载体构建 | 第56-57页 |
·细胞定位载体构建 | 第57页 |
·分子荧光互补(BiFC)载体构建 | 第57页 |
·酵母双杂交(Y2H)载体构建 | 第57页 |
·载体转化农杆菌 | 第57页 |
·阳性菌落检测及保存 | 第57-58页 |
·花序侵染法转化拟南芥 | 第58页 |
·阳性苗鉴定 | 第58-59页 |
·转基因拟南芥的表型统计 | 第59页 |
·基因枪介导的洋葱表皮亚细胞定位 | 第59-60页 |
·基因枪介导的烟草By2悬浮细胞系双分子荧光互补 | 第60页 |
·酵母双杂交 | 第60-62页 |
·基因的结构和序列分析 | 第62页 |
·结果与分析 | 第62-82页 |
·PtFCA基因的分离及序列分析 | 第62-64页 |
·PtFCA选择性剪切验证 | 第64-65页 |
·PtFCA聚类分析 | 第65-68页 |
·PtFCA亚细胞定位 | 第68-69页 |
·PtFCA在普通枳和早实枳不同发育阶段的表达模式 | 第69-71页 |
·PtFCA在普通枳和早实枳空间表达模式 | 第71-72页 |
·PtFCA在fca-1拟南芥中的功能验证 | 第72-74页 |
·PtFCA互作蛋白筛选 | 第74-78页 |
·FCA-FY互作在植物中具有保守性 | 第78-79页 |
·PtFCA基因对温度和ABA的响应 | 第79-82页 |
·讨论 | 第82-87页 |
·FCA的基因结构和序列在植物中的保守性及多样性 | 第82-83页 |
·PtFCA可能参与调控枳成花时间和根系发育 | 第83-84页 |
·PtFCA通过WW结构域与发育相关的蛋白互作 | 第84-85页 |
·PtFCA表达受到ABA和环境温度影响 | 第85-87页 |
第四章 全文小结与展望 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-106页 |
附录 | 第106-119页 |
附录Ⅰ:部分操作步骤及培养基配方 | 第106-109页 |
附录Ⅱ:附图及附表 | 第109-117页 |
附录Ⅲ:作者简介 | 第117-119页 |
致谢 | 第119页 |