| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 图表目录 | 第11-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-25页 |
| ·基因打靶简介 | 第14-15页 |
| ·TALEN 技术概述 | 第15-20页 |
| ·TALE 的结构组成和识别密码 | 第15-16页 |
| ·TALE 与 DNA 结合的机理 | 第16页 |
| ·TALE 靶位点的设计 | 第16-17页 |
| ·TALE 的组装 | 第17-18页 |
| ·TALEN 结构 | 第18页 |
| ·TALEN 切割的检测 | 第18-19页 |
| ·利用 TALEN 技术进行基因打靶的研究进展 | 第19页 |
| ·TALEN 技术的优点及不足 | 第19-20页 |
| ·EPSPS 研究 | 第20-22页 |
| ·拟南芥 SnRK2.2 和 SnRK2.3 基因简介 | 第22-23页 |
| ·立题依据和技术路线 | 第23-25页 |
| ·立题依据 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 拟南芥 5-烯醇式丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(EPSPS)的定点突变及草甘膦抗性鉴定 | 第25-38页 |
| ·材料与方法 | 第25-31页 |
| ·试验材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·拟南芥 EPSPS 基因 PCR 克隆及定点突变 | 第31页 |
| ·pEarlygateCD3-724 植物表达载体和原核表达载体构建 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌 ER2799 中 AtEPSPS 及 AtTIPS 的草甘膦抗性鉴定 | 第32-33页 |
| ·pEarlygateCD3-724 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第33页 |
| ·转基因拟南芥中 EPSPS 基因转录水平分析 | 第33-34页 |
| ·转基因拟南芥的草甘膦抗性鉴定 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 利用 TALEN 技术对拟南芥 EPSPS 基因进行基因打靶的初步研究 | 第38-50页 |
| ·材料与方法 | 第38-44页 |
| ·试验材料与试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·靶位点的确定和 TALEN 打靶两臂质粒的合成 | 第44页 |
| ·TALEN 与靶位点结合活性检测 | 第44-45页 |
| ·pER8-L-R17β-雌二醇诱导启动子调控 TALEN 植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·将构建完成的 pER8-L-R 载体转化农杆菌感受态 GV3101 | 第47页 |
| ·pER8-L-R 转基因植株的分子鉴定 | 第47-48页 |
| ·17β-雌二醇诱导调控 TALEN 表达分析 | 第48页 |
| ·TALEN 对 EPSPS 基因打靶情况的检测 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 利用 TALEN 技术对拟南芥 SnRK2.2 和 SnRK2.3 基因进行基因打靶的初步研究 | 第50-59页 |
| ·材料与方法 | 第50-54页 |
| ·试验材料与试剂 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·靶位点设计和 TALEN 打靶两臂质粒的合成 | 第54页 |
| ·TALEN 与靶位点结合活性检测 | 第54页 |
| ·p3301-121-L-R 双启动子植物表达载体的构建 | 第54-57页 |
| ·将构建完成的 p3301-121-L-R 载体转化农杆菌感受态 GV3101 | 第57页 |
| ·p3301-121-L-R 转基因阳性植株筛选鉴定 | 第57页 |
| ·TALEN 对 SnRK2.2 和 SnRK2.3 基因的打靶情况检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
